国家自然科学基金(20573124)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 甲烷氧化菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷单加氧酶基因与16S rRNA序列分析
- 2007年
- 甲烷氧化细菌中的关键酶系甲烷单加氧酶是一个含双核铁的多组份氧化酶,常温、常压下能够催化甲烷转化为甲醇。对甲烷氧化细菌Methylomonas sp.GYJ3中溶解性甲烷单加氧酶基因和16SrDNA进行了测序与分析。利用已知相关基因数据库信息,设计了PCR引物和测序引物,获得了满意的测序结果。全长的溶解性甲烷单加氧酶基因为5690bp,部分16S rDNA的序列长度为1280bp。与已发表的甲烷氧化细菌中甲烷单加氧酶进行了比较,结果表明MMOX组份中氨基酸序列的同一性为78%到99%,基因序列的同一性为71%到97%,6个组份中orfY片段的同一性相对较低。MMOX氨基酸序列的多序列联配表明,MMOX序列具有高度保守性,特别是在双核铁中心区域。16S rDNA进化分析显示Methylomonas sp.GYJ3与γ蛋白细菌是相关联的,基于MMOX氨基酸序列的进化分析证明,与Methylomonas sp.GYJ3最近似的菌株是Ⅰ型甲烷氧化细菌Methylomonas sp.KSWⅢ。综合分析表明,菌株GYJ3属于Ⅰ型甲烷氧化细菌Methylomonas sp.属。这个结果为Ⅰ型甲烷氧化细菌也能表达溶解性甲烷单加氧酶提供了新的证据。羟基化酶的理论等电点是6.28,理论分子量为248874.41Da。
- 华绍烽李树本谭海东赵家政
- 关键词：甲烷单加氧酶甲烷氧化细菌RDNA进化分析
- 甲烷单加氧酶羟基化酶的分离纯化及其表征
- ＜正＞应用层析方法纯化了II型甲烷氧化细菌Methylosinus trichosporium IMV 3011中甲烷单加氧酶的羟基化酶,并对其进行了表征。凝胶过滤法测定的该酶分子量为201,300 Da;SDS-PAG...
- 华绍烽李树本辛嘉英牛建中夏春谷唐威胡宵雪
- 关键词：甲烷氧化细菌甲烷单加氧酶羟基化酶纯化理化性质
- 文献传递
- 一个Ⅱ型甲烷氧化菌中甲烷单加氧酶羟基化酶的分离纯化和理化性质被引量：4
- 2006年
- 甲烷氧化细菌能够催化甲烷和一系列小分子烃类化合物的羟基化反应,对控制全球变暖起着重要作用,在工业催化和生物除污中具有非凡的潜能。应用层析方法纯化了Ⅱ型甲烷氧化细菌MethylosinustrichosporiumIMV3011中甲烷单加氧酶的羟基化酶,并对其进行了表征。凝胶过滤法测定了该酶分子量为201.3kD;SDS-PAGE表明羟基化酶含有三个亚基(αβγ),分子量分别为58kD、36kD和23kD,比较两种方法证明该羟基化酶是一个同型二聚体构型(αβγ)2,总分子量为234kD。薄层等电聚焦测定该酶的等电点为5.2。酶的比活力为603.6nmol/(min.mg),活力回收为34.3%。HPLC法测定该酶的纯度在95%以上。原子吸收光谱显示每分子羟基化酶中含有3.02个Fe原子。羟基化酶的稳定性pH值为6.2～7.5,稳定性温度为低于35℃。菌株IMV3011的细胞表观构型呈现了长型、稍微弯曲的杆状形态。
- 华绍烽李树本辛嘉英牛建中夏春谷唐威胡宵雪
- 关键词：甲烷氧化细菌甲烷单加氧酶羟基化酶纯化理化性质
- Methylomonas sp．GYJ3中甲烷单加氧酶的基因及其分子特征
- ＜正＞甲烷氧化细菌Methylomonas sp．GYJ3中溶解性甲烷单加氧酶基因和16S rDNA被测序和分析．溶解性甲烷单加氧酶基因的全长为5690bp,部分16S rDNA的序列长度为1280bp。对包括菌株GYJ...
- 华绍烽李树本谭海东牛建中赵家政
- 关键词：甲烷单加氧酶甲烷氧化细菌进化分析
- 文献传递
- 甲烷氧化细菌中甲烷单加氧酶基因组和16S rRNA分析
- ＜正＞报道了一个II型甲烷氧化菌Methylosinus trichosporium IMV 3011中的16S rDNA和溶解性甲烷单加氧酶基因序列和分析结果。对溶解性甲烷单加氧酶基因和16S rDNA进行了扩增和测序...
- 华绍烽谭海东辛嘉英李树本夏春谷
- 关键词：甲烷单加氧酶基因分析
- 文献传递
