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国家自然科学基金(31071234)
作品数:
2
被引量:6
H指数:2
相关作者:
王少鑫
巩伟丽
靳宝锋
陈媛
韩秋影
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相关机构:
军事医学科学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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1篇
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干涉Gankyrin基因表达对小鼠乳腺癌转移的影响
被引量:2
2013年
目的 建立稳定干涉癌基因Gankyrin的4T1-luc细胞株,探讨Gankyrin对小鼠乳腺癌转移的影响。方法采用慢病毒感染和抗性筛选方法获得稳定干涉Gankyrin的乳腺癌细胞株4T1-luc/shGankyrin,通过蛋白质印迹和实时定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测Gankyrin的干涉效果;选用BALB/c小鼠进行4T1细胞原位种植,利用活体成像技术实时观测小鼠体内肿瘤生长和肿瘤转移情况,并对小鼠肺转移瘤进行病理学分析。结果采用免疫印迹和实时定量PCR,检测稳定敲低Gankyrin4T1细胞在蛋白质水平和mRNA水平的表达,均明显低于对照细胞,与对照细胞相比,不同干涉序列的4T1细胞mRNA水平分别为对照细胞的4.9%、25.1%、69.8%。利用活体成像进行细胞数与细胞发光强度的检测,选择细胞数与发光强度基本一致的#2细胞株进行小鼠原位种植,其产生的转移瘤进行实时观测,结果显示敲低Gankyrin的4T1细胞诱导的肺转移瘤荧光强度为3.02×10^6,而对照细胞为10.9×10^6,同时病理学证实了对照细胞产生的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阳性,而敲低Gankyrin的4T1细胞的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阴性。结论采用慢病毒感染的方法可以有效建立稳定敲低Gankyrin表达的细胞株;Gankyrin稳定干涉后对小鼠乳腺癌转移具有明显的抑制作用。Gankyrin有可能成为新的肿瘤治疗靶点。
王少鑫
巩伟丽
韩秋影
满江红
靳宝锋
关键词:
慢病毒感染
肿瘤转移
UBE2W抑制TNFα诱导的NF-κB转录活性
被引量:4
2012年
UBE2W(ubiquitin-conjugating enzyme E2W)是一新的泛素结合酶,关于其功能研究甚少。采用双荧光报告系统和Western blot等方法,分别干涉和过表达UBE2W,分析UBE2W对TNF(刺激下NF-(B转录活性的影响。结果显示UBE2W能够显著抑制TNFα诱导的NF-κB的转录活性,提示该基因可能参与NF-κB相关功能的调控。
王少鑫
巩伟丽
陈媛
靳宝锋
关键词:
NF-ΚB
TNFΑ
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