中国博士后科学基金(201104611)
- 作品数：11 被引量：144H指数：7
- 相关作者：贾连群杨关林杜莹任路陈阳更多>>
- 相关机构：辽宁中医药大学沈阳市第六人民医院大连医科大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 化瘀祛痰方药及其拆方对H_2O_2诱导EA.hy926细胞凋亡的影响及机制研究被引量：11
- 2012年
- 目的探讨化瘀祛痰方药及其拆方含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926凋亡的影响及其机制。方法 40只SD大鼠随机分为5组,即全方组、补气组、化瘀组、祛痰组、空白血清对照组。各组大鼠分别以相应中药煎剂或生理盐水连续灌胃9 d,末次灌胃给药2 h后,腹主动脉采血,离心后分离血清。体外培养EA.hy926细胞,随机分为7组,即①正常对照组、②H2O2刺激组、③全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组、⑦空白血清对照组。其中②组加入终浓度为300μmol.L-1H2O2,③～⑦组用各组含药血清(浓度为10%)预处理24 h后加入终浓度为300μmol.L-1H2O2,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用流式细胞术检测EA.hy926细胞凋亡;实时定量反转录—聚合酶链反应(Real-time PCR)定量分析bcl-2、bax、caspase-3 mRNA表达;比色法检测caspase-3活性;蛋白质免疫印记技术(Western-blot)检测bcl-2、bax蛋白表达。结果与正常对照组相比,H2O2刺激后EA.hy926细胞凋亡率、bax、caspase-3表达显著增加,而bcl-2表达显著减少。全方组细胞凋亡率、bax、caspase-3水平较H2O2刺激组相比显著降低,而bcl-2水平显著升高,且全方组干预作用强于各拆方组。拆方各组中,化瘀组、祛痰组细胞凋亡率显著降低,化瘀组bax、cas-pase-3表达显著减少,而bcl-2表达显著增加。结论化瘀祛痰方药全方及化瘀拆方可显著抑制内皮细胞凋亡,影响凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3的表达,这可能是其抗AS的作用机制之一。
- 贾连群杨关林任路罗莹冯峻屹陈阳崔勇
- 关键词：拆方研究H2O2氧化应激
- 从“脾主运化”理论探讨膏脂转输与胆固醇逆向转运被引量：68
- 2013年
- 从脾主运化理论探讨脾失健运膏脂转输异常与胆固醇逆向转运(RCT)的关系。脾主运化,为精微运化之枢纽,血脂亦由脾运化水谷而生成,并依赖脾的转输功能布散周身,其中胆固醇从外周细胞逆向转运至肝脏的过程必然依赖于脾的运化和转输,脾虚气弱则脾失健运,RCT途径受阻。
- 贾连群杨关林张哲张林张会永杜莹曹媛
- 关键词：脾主运化胆固醇逆向转运高密度脂蛋白亚类
- 丹参酮ⅡA诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的机制被引量：7
- 2015年
- 目的探讨中药活性单体丹参酮ⅡA对人肝癌Hep G2细胞株增殖抑制和诱导凋亡的可能机制。方法用5、10、20、30、40、50μmol/L丹参酮ⅡA处理Hep G2细胞,应用MTT法分析细胞活力,MUSE细胞分析仪、PI染色等检测细胞增殖抑制、细胞周期以及凋亡情况。免疫蛋白印迹技术检测p53、Bax及Bcl-2等凋亡相关蛋白的表达。结果 5~50μmol/L丹参酮ⅡA显著降低细胞存活率(P<0.01),形态学观察可见细胞凋亡改变,细胞发生G2/M期周期阻滞。免疫印迹结果显示丹参酮ⅡA上调p53、Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。结论丹参酮ⅡA对Hep G2细胞的增殖抑制作用可能部分通过诱导细胞G2/M周期阻滞和线粒体途径凋亡实现。
- 陈阳赵秋宇宋囡贾连群
- 关键词：HEP细胞周期细胞凋亡
- 化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响被引量：16
- 2013年
- 目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)使巨噬细胞泡沫化。细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析ABCA1、CD36 mRNA水平。结果:模型组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低。RT-PCR结果提示模型组细胞ABCA1、CD36 mRNA水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1 mRNA,显著降低CD36 mRNA水平。结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox-LDL诱导的THP-1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP-1细胞对ox-LDL摄取有关。
- 贾连群杨关林赵钢李学涛张哲张会永杜莹曹媛
- 基于指示剂置换法利用紫外-可见光谱和比色检测水溶液中的半胱氨酸被引量：1
- 2012年
- 基于半胱氨酸(Cys)与二价铜离子的配位作用,发展了一种在纯水溶液中以4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)为指示剂,通过紫外-可见光谱定性定量检测半胱氨酸的方法.研究发现,在pH=7.0的含有PAR和二价铜离子(摩尔比为1∶1)的缓冲溶液中,当加入半胱氨酸后,由于配位竞争使PAR释放出来,实现了对半胱氨酸的识别,选择性研究结果表明,其它氨基酸不干扰体系对半胱氨酸的测定.通过紫外-可见光谱(UV-Vis)对识别过程进行了研究,确定了Cu2+与PAR的配位比为1∶1,Cu2+与Cys的配位比为1∶3;半胱氨酸的线性关系变化范围为0～240μmol/L,ε=7519 L/(mol.cm),线性相关系数为0.9982.在检测过程中可观察到溶液颜色由桃红色变成了黄色.
- 李咏玲张建刚卫艳丽程芳琴
- 关键词：4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚半胱氨酸紫外-可见光谱
- 化瘀祛痰方通过调节ApoE^(-/-)小鼠胆固醇代谢相关基因表达抗动脉粥样硬化被引量：29
- 2014年
- 目的观察化瘀祛痰方对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠粥样斑块以及胆固醇代谢相关基因的影响,探讨化瘀祛痰方抗动脉粥样硬化(As)作用及可能的机制。方法 10只C57BL/6/J小鼠作为空白对照组,30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰组[20 g/(kg·d)]和辛伐他汀组[0.005 g/(kg·d)]。全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC),HE染色观察主动脉结构及动脉粥样硬化程度,油红O染色观察主动脉脂质沉积,RT-PCR和Western blot检测肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)及主动脉CD36 mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测腹腔巨噬细胞CD36蛋白表达。结果与空白对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDLC水平显著升高;HDLC水平显著降低,主动脉管腔中形成较大粥样斑块,管壁形成大量脂质沉积,肝脏LDLR、LCAT基因表达显著下调,主动脉、巨噬细胞CD36基因表达显著上调。通过药物干预,与模型组相比,化瘀祛痰组和辛伐他汀组小鼠TC、TG、LDLC水平显著下降,HDLC显著升高,主动脉管腔中粥样斑块面积和管壁脂质沉积量明显减少,肝脏LDLR、LCAT基因表达显著上调,主动脉、巨噬细胞CD36基因表达显著下调。结论化瘀祛痰方可抑制ApoE-/-小鼠主动脉斑块形成,其机制可能与调控血脂及胆固醇代谢相关基因LDLR、LCAT及CD36的表达有关。
- 贾连群杨关林陈文娜李学涛杜莹曹媛赵秋宇
- 关键词：动脉粥样硬化载脂蛋白E基因敲除小鼠低密度脂蛋白受体胆固醇
- 化瘀祛痰方药及其拆方对内皮细胞TLR4/NF-κB炎症信号通路干预的研究被引量：25
- 2012年
- 目的探讨化瘀祛痰方药及其拆方含药血清对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926 TLR4/NF-κB信号通路活化的干预作用。方法 40只SD大鼠随机分为5组,即空白对照组、全方组、补气组、化瘀组、祛痰组,各组大鼠分别以生理盐水和相应中药煎剂连续灌胃9 d,末次灌胃给药2 h后,腹主动脉采血,离心后分离血清。体外培养EA.hy926细胞,随机分为7组,即①正常对照组、②LPS刺激组、③全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组、⑦空白血清对照组。其中②组加入终浓度为10μg/ml的LPS,③～⑦组用各组含药血清(浓度为10%)预处理24 h后加入终浓度为10μg/ml的LPS,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用实时定量反转录-聚合酶链反应(Real-time PCR)定量分析TLR4、NF-κB和TNF-αmRNA表达;ELISA法检测TNF-α含量;Western印迹检测TLR4、NF-κB蛋白表达。结果与正常对照组相比,LPS刺激后TLR4、NF-κB和TNF-α表达显著增加(P<0.01),全方组TLR4、NF-κB和TNF-α的表达与刺激组相比显著减少(P<0.01);拆方各组中,化瘀组TLR4、NF-κB和TNF-α水平均显著减少(P<0.01),而补气组和祛痰组TLR4、NF-κB和TNF-α水平降低不明显。结论化瘀祛痰方药及化瘀拆方可显著抑制内皮细胞TLR4/NF-κB炎症信号通路的活化,这可能是其抗AS的作用机制之一。
- 贾连群杨关林任路冯峻屹陈阳崔勇
- 关键词：化瘀祛痰炎症信号通路
- 化瘀祛痰颗粒质量标准研究被引量：2
- 2013年
- 目的建立化瘀祛痰颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对化瘀祛痰颗粒中党参、黄芪、绞股蓝、郁金进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量,色谱柱为Diamonsil C18柱,流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30︰10︰1︰59),流速1.0 mL/min,检测波长286 nm,柱温30℃。结果薄层鉴别各样品特征斑点显色清晰,阴性样品无干扰;高效液相色谱法测出丹酚酸B在0.142 5～1.425 0μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率为98.45%,RSD=1.99%。结论本方法准确可靠、专属性强、重复性好,可用于化瘀祛痰颗粒的质量控制。
- 贾连群杨关林陈阳任路张哲张会永
- 关键词：薄层色谱法高效液相色谱法
- 丹参酮ⅡA诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的机制研究
- 目的探讨中药活性单体丹参酮ⅡA对人肝癌HepG2细胞株增殖抑制和诱导凋亡的可能作用机制。方法用5、10、20、30、40、50μmol/L丹参酮ⅡA处理HepG2细胞,应用MTT法分析细胞活力,MUSE细胞分析仪、PI染...
- 陈阳赵秋宇宋囡贾连群
- 关键词：HEPG2细胞细胞周期细胞凋亡
- 丹参酮ⅡA诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的机制研究
- 目的 探讨中药活性单体丹参酮ⅡA对人肝癌HepG2细胞株增殖抑制和诱导凋亡的可能作用机制。方法 用5、10、20、30、40、50μmol/L丹参酮ⅡA处理HepG2细胞,应用MTT法分析细胞活力,MUSE细胞分析仪、P...
- 陈阳赵秋宇宋囡贾连群
- 关键词：HEPG2细胞细胞周期细胞凋亡
