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国家自然科学基金(31160534)

作品数:8 被引量:23H指数:3
相关作者:盛军庆洪一江王军花彭扣史建伍更多>>
相关机构:南昌大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金江西省自然科学基金国家公益性行业科研专项更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 8篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 8篇池蝶蚌
  • 3篇基因
  • 2篇蛋白
  • 2篇性腺
  • 2篇原核表达
  • 2篇线粒体基因
  • 2篇线粒体基因组
  • 2篇基因组
  • 1篇单性
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡抑制
  • 1篇性腺发育
  • 1篇应激
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇荧光定量PC...
  • 1篇月龄
  • 1篇全序列
  • 1篇全序列分析
  • 1篇重排

机构

  • 8篇南昌大学

作者

  • 7篇彭扣
  • 7篇王军花
  • 7篇洪一江
  • 7篇盛军庆
  • 3篇史建伍
  • 2篇曾柳根
  • 2篇林巧惠
  • 2篇徐灵
  • 1篇王诚远
  • 1篇吴娣
  • 1篇辜清
  • 1篇何书豪
  • 1篇熊文芳
  • 1篇何静
  • 1篇陈永玲
  • 1篇刘国凤
  • 1篇邵攀
  • 1篇刘彤彤
  • 1篇胡芳琴
  • 1篇罗春

传媒

  • 5篇水生生物学报
  • 1篇动物学杂志
  • 1篇南昌大学学报...
  • 1篇Zoolog...

年份

  • 1篇2019
  • 1篇2015
  • 5篇2014
  • 2篇2012
8 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
池蝶蚌CyPA的应激表达及对Hela细胞生长的影响被引量:2
2015年
研究分析了池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)亲环蛋白A(Cyclophilin A,Cy PA)诱导的应激反应和对Hela细胞生长的影响。采用嗜水气单胞杆菌诱导刺激池蝶蚌,并利用Real-time PCR技术对其肝脏、性腺和血淋巴中Cy PA基因m RNA的表达量进行分析,应激实验表明,在嗜水气单胞杆菌刺激后血淋巴、肝脏和性腺中的Cy PA在诱导4h出现一个表达峰,8h后开始下降,说明池蝶蚌Hs Cy PA基因参与免疫防御应答反应;利用p ET-32a(+)表达载体,根据Hs Cy PA基因c DNA的序列,构建了含有完整开放阅读框(ORF)的表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,优化诱导条件后,通过亲和层析获得了含量较高的上清可溶性蛋白;采用MTT法,将原核表达的重组Cy PA蛋白稀释到相应(50、100、200、400和800 ng/m L)浓度,刺激Hela细胞系后发现,重组池蝶蚌Cy PA蛋白能促进Hela细胞生长,刺激浓度为100 ng/m L时,达到最大增殖率18.5%。结果初步表明,池蝶蚌Cy PA是一个既参与免疫应激又对细胞的生长发育具有影响的功能广泛的蛋白质。
罗春徐灵何静史建伍盛军庆彭扣王军花黄滨洪一江
关键词:池蝶蚌REAL-TIMEPCR原核表达HELA细胞MTT法
池蝶蚌组织蛋白酶L基因的组织表达及免疫应激分析被引量:7
2012年
应用cDNA文库筛查及同源片段克隆拼接技术,克隆了池蝶蚌组织蛋白酶L(Hs-CtsL)cDNA基因全长序列(GenBank注册号为JN604558)。其cDNA全长1152 bp,5′-非翻译区(Untranslated Region,UTR)长1 bp,3′-UTR长149 bp包括1个多聚腺苷信号AATAAA和Poly(A)尾巴,开放阅读框(Open reading frame ORF)为1002 bp,编码333个氨基酸组成的多肽链。其分子量约37.7 kD,理论等电点为7.16,包含信号肽、前体域和成熟域。系统进化分析显示,Hs-CtsL同无脊椎动物组织蛋白酶L聚为一支,且同三角帆蚌亲缘关系最近,其次为褶纹冠蚌。组织表达分析结果显示,池蝶蚌组织蛋白酶L在肠、鳃、性腺、外套膜、斧足、闭壳肌、血细胞、肝胰腺、肾和心脏均有表达,其中血细胞中表达量最高。应激实验表明,经嗜水气单胞菌刺激后,Hs-CtsL在血细胞、鳃、肝胰腺和外套膜中的表达量显著上调。其中在肝胰腺中刺激后6h表达量到达峰值,在血细胞、鳃和外套膜中的表达模式近似,表现为一个波动变化,在4h、12h和48h被上调。结果暗示着Hs-CtsL除参与了池蝶蚌血细胞的先天性免疫防御以外,还参与了其消化腺免疫器官的免疫应答反应。
彭扣王军花刘彤彤盛军庆史建伍邵攀何书豪洪一江
关键词:池蝶蚌CATHEPSIN免疫应激
池蝶蚌Sox2基因在不同组织及不同月龄精巢中的表达被引量:4
2012年
Sox基因家族在胚胎发育过程和性别分化中起重要作用,为研究池蝶蚌中Sox基因的功能,以人SRY基因HMG-box保守区的序列设计简并引物,以雌、雄池蝶蚌基因组DNA和精巢cDNA为模板进行扩增,获得了2个不完全相同的序列,分别为DNA-HMG1、DNA-HMG2和cDNA-HMG,长度均为220 bp,编码73个氨基酸。与人等物种Sox1、Sox2、Sox3及Sox14有很高的同源性,雌雄个体之间没有序列差异性。采用RACE-PCR扩增获得了池蝶蚌性腺Sox2部分cDNA片段,长度为1774 bp,该序列核苷酸与欧洲帽贝的SoxB和人类的Sox2的同源性最高;在部分开放阅读框249个氨基酸残基中,具有Sox家族典型的HMG-box结构域,与人类、小鼠、原鸡和斑马鱼等Sox2的HMG-box同源性为98%。为了解该基因在各组织中的表达情况,采用实时荧光定量PCR方法分析了外套膜、闭壳肌、鳃、肠、肝、肾、精巢和卵巢在内的8种组织hs-Sox2的表达情况,结果显示,hs-Sox2基因在8种组织中均有表达,其中在肾脏中的表达量最高,其次是肠与闭壳肌,在雄性性腺中的表达量明显高于雌性性腺,在肝脏中的表达量最低;为了解hs-Sox2在不同性腺发育时期的表达情况,采用实时荧光定量PCR方法分析了5个不同月龄的精巢组织中hs-Sox2的表达情况,结果显示在39月龄性腺的表达量最高,其次是16月龄性腺,63月龄蚌中的表达量最少。以上结果表明,hs-Sox2基因可能参与了池蝶蚌精巢的发育及功能的维持。
曾柳根徐灵王军花盛军庆辜清彭扣洪一江
关键词:池蝶蚌性腺荧光定量PCR
池蝶蚌金属硫蛋白基因的原核表达及活性分析被引量:1
2014年
筛选池蝶蚌性腺转录组并运用RT-PCR方法扩增池蝶蚌金属硫蛋白(metallothionein,MT)ORF框序列。该序列有216个碱基组成,编码71个氨基酸,其中半胱氨酸含量丰富,富含金属硫蛋白典型的Cys-X(1-3)-Cys结构。多序列比对表明,池蝶蚌MT蛋白序列和其他物种MT序列有很高的同源性,与三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)MT蛋白具有100%的同源性。将该ORF框片段导入原核表达载体pET-32a上,在IPTG诱导下成功在E.coli BL21(DE3)中融合表达。SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小约为27kDa,在25℃,终浓度为1mM IPTG诱导4h表达量最高,重组蛋白主要存在上清液中,纯化并获得了重组蛋白。细胞增殖实验表明,纯化的MT融合蛋白有生物活性并能有效地减轻宫颈癌Hela细胞的氧化胁迫效应。
王诚远胡芳琴刘国凤王军花彭扣盛军庆洪一江
关键词:池蝶蚌金属硫蛋白原核表达活性分析
池蝶蚌致雄性化基因fem-1c及其蛋白分子的结构特征分析被引量:1
2014年
研究首次获得淡水珍珠贝池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)的致雄性化基因feminization-1C亚型,即fem-1c基因,并进行全长克隆及序列分析。从转录组中Race-PCR扩增fem-1c基因全长cDNA序列,用生物信息学方法对fem-1c基因进行基因组结构分析、多序列同源性比较、跨膜区段、亲疏水性分析、功能结构域预测等。研究结果如下:该cDNA序列全长2328 bp,包含一个1869 bp的最大开放阅读框,编码622个氨基酸,经同源比对和进化树分析,fem-1基因c亚型编码的氨基酸与太平洋牡蛎的同源性最高,为79%;疏水性分析显示该蛋白为亲水性蛋白;二级结构预测发现该蛋白有大量的α螺旋和随机卷曲,形成9个锚蛋白重复序列(Ankyrin repeat,ANK),同时,三级结构预测中可以清楚的看到9个ANK模体,跟SMART预测的结构位点结果相近。从无脊椎动物到脊椎动物fem-1c基因的保守性表明它们有共同的起源,暗示这个基因家族在功能上具备保守性,推测池蝶蚌fem-1c基因可能具备与线虫fem-1基因在性别决定方面上相似的功能。
熊文芳史建伍蒋谋炎陈永玲彭扣盛军庆王军花洪一江
关键词:池蝶蚌克隆
Molecular cloning, sequence analysis, and cadmium stress-rated expression changes of BTG1 in freshwater pearl mussel(Hyriopsis schlegelii)被引量:7
2014年
The B cells translocation gene 1 (BTG1) is a member of the BTG/TOB family of anti-proliferative genes, which have recently emerged as important regulators of cell growth and differentiation among vertebrates. Here, for the first time we cloned the full-length eDNA sequence of Hyriopsis schlegelii (Hs-BTG1), an economically important freshwater shellfish and potential indicator of environmental heavy metal pollution, for the first time. Using rapid amplification of eDNA ends (RACE) together with splicing the EST sequence from a haemocyte eDNA library, we found that Hs-BTG1 contains a 525 bp open reading frame (ORF) encoding a 174 amino-acid polypeptide, a 306 bp 5' untranslated region (5' UTR), and a 571 bp 3' UTR with a Poly(A) tail as well as a transcription termination signal (AATAAA). Homologne searching against GenBank revealed that Hs-BTG1 was closest to Crassostrea gigas BTG1, sharing 50.57% of protein identities. Hs-BTG1 also shares some typical features of the BTG/TOB family, possessing two well-conserved A and B boxes. Clustering analysis of Hs-BTG1 and other known BTGs showed that Hs-BTG1 was also closely related to BTG1 of C. gigas from the invertebrate BTG1 clade. Function prediction via homology modeling showed that both Hs-BTG1 and C. gigas BTG1 share a similar three-dimensional structure with Homo sapiens BTG1. Tissue-specific expression analysis of the Hs-BTG1 via real-time PCR showed that the transcripts were constitutively expressed, with the highest levels in the hepatopancreas and gills, and the lowest in both haemocyte and muscle tissue. Expression levels of Hs-BTG1 in hepatopancreas (2.03-fold), mantle (2.07-fold), kidney (2.2-fold) and haemocyte (2.5-fold) were enhanced by cadmium (Cd2+) stress, suggesting that Hs-BTG 1 may have played a significant role in H, schlegelii adaptation to adverse environmental conditions.
Kou PENGCheng-Yuan WANGJun-Hua WANGJun-Qing SHENGJian-Wu SHIJian LIYi-Jiang HONG
池蝶蚌线粒体基因组双单性遗传现象分析被引量:2
2014年
部分双壳贝类的线粒体遗传方式不同于标准的母系遗传(SMI),被称为双单性遗传现象(DUI)。池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)是淡水双壳贝类,是否存在双单性遗传现象?本文采用普通PCR扩增、SHOT-GUN测序及软件拼接获得了雄性池蝶蚌线粒体基因组(以下简称Hs-mtDNA)全序列,并与本实验室已报道的雌性池蝶蚌线粒体基因组全序列进行差异性分析。结果表明,雄性和雌性Hs-mtDNA全长分别为15961 bp和15939 bp,雄性比雌性长22 bp,雌雄线粒体基因组成与排列顺序一致。各蛋白编码基因的碱基数目均一致,碱基转换率为1.01%~7.34%,颠换率为0.00%~0.62%,氨基酸差异率为0.00%~9.35%;其中,COX1基因变异率为2.72%;COX2基因碱基变异率最高,达7.50%,雄性COX2的3'末端没有出现编码延伸区。雄性12S rRNA基因发生5 bp的碱基转换,差异率为0.6%;16S rRNA基因比雌性长9 bp,碱基差异率仅为1.2%。雌雄tRNA-His均位于H链上,介于COX2与ND3之间,没有出现位置的差异性。雌雄Hs-mtDNA的非编码区共有28个1~393 bp的片段,但未见控制区。在tRNA-Glu与tRNA-Tyr间有一段长393 bp的非编码区存在蛋白质翻译功能,但非雄性特异性蛋白。以COX1基因建立系统进化树,池蝶蚌和三角帆蚌(H.cumingii)聚在一起,而含有双单性遗传现象的无齿蚌属的Pyganodon grandis、小方蚌亚科的Venustaconcha ellipsiformis及小方形蚌属的Quadrula quadrula三者雄性聚为一支,雌性聚为一支。因此,雌雄池蝶蚌线粒体存在一定的差异性,但其差异要比其他具有双单性遗传现象的淡水双壳类小得多,且池蝶蚌线粒体遗传可能不存在双单性遗传现象。
盛军庆林巧惠王军花彭扣曾柳根洪一江
关键词:池蝶蚌线粒体基因组
池蝶蚌凋亡抑制相关因子(IAP)在性腺中的表达特征
池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)原产于日本琵琶湖,1997年引入中国,是目前中国的重要育珠对象之一。经我们的前期研究发现:池蝶蚌在性腺发育过程中12月龄后就出现明显的性别分化,但在28月龄时出现雌雄同体...
吴娣
关键词:池蝶蚌性腺发育
文献传递
池蝶蚌线粒体基因组全序列分析被引量:2
2014年
采用普通PCR扩增、SHOT-GUN测序、软件拼接首次获得了池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)线粒体基因组全序列。线粒体基因组全长为15939 bp,由13个蛋白质编码基因、22个tRNA基因、2个SrRNA基因和28个长度为1—393 bp的非编码区组成;除ND3-ND5、ND4L、ATP6、ATP8、COX1-COX3、tRNA-D、tRNA-H之外,其他大多数基因在L链编码。池蝶蚌线粒体全基因组序列、蛋白编码基因、tRNA基因、rRNA基因及非编码区的A+T含量分别为60.36%、59.84%、61.7%、60.23%及62.5%,与其他淡水蚌类一致,均表现出A+T偏好性,淡水蚌类线粒体基因组长度的差异主要表现在非编码区长度的差异。池蝶蚌mtDNA的COX2-12SrRNA区域基因排列存在差异,是ND3、tRNAHis、tRNAAla、tRNASer1、tRNASer2、tRNAGlu、ND2、tRNAMet 8个基因发生重组造成。22个tRNA基因都具有典型的三叶草二级结构,tRNA-E与tRNA-W间的非编码区含有一个ORF区,而控制区并未发现。从GenBank上下载的14种双壳纲贝类的mtDNA序列构建的系统进化树,显示池蝶蚌与三角帆蚌亲缘关系最近。研究结果为淡水珍珠蚌线粒体基因重排及进化特征提供理论依据。
盛军庆林巧惠王军花彭扣洪一江
关键词:池蝶蚌线粒体基因组基因重排
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