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国家自然科学基金(39970291)

作品数：5 被引量：8H指数：3
相关作者：傅国辉孔宪刚杜洪清李宏涛刘明更多>>
相关机构：哈尔滨医科大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金教育部青年骨干教师基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇血型糖蛋白
  • 3篇血型糖蛋白A
  • 3篇糖蛋白
  • 2篇质粒
  • 2篇膜蛋白
  • 2篇酵母
  • 2篇酵母双杂合系...
  • 2篇杆状
  • 2篇杆状病毒
  • 2篇表达质粒
  • 2篇病毒
  • 1篇带3蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质类
  • 1篇相互作用
  • 1篇膜蛋白质
  • 1篇膜蛋白质类
  • 1篇抗原
  • 1篇克隆

机构

  • 4篇哈尔滨医科大...
  • 4篇中国农业科学...

作者

  • 4篇孔宪刚
  • 4篇傅国辉
  • 3篇李宏涛
  • 3篇杜洪清
  • 2篇姜晓姝
  • 2篇刘明
  • 1篇姜晓殊
  • 1篇龙晓宇
  • 1篇张宝山
  • 1篇张振宇
  • 1篇杨宝峰

传媒

  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇生物医学工程...
  • 1篇自然科学进展...

年份

  • 3篇2002
  • 1篇2001
共 5 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
表达血型糖蛋白A和带3蛋白膜段基因的杆状病毒转移载体的构建被引量：3
2001年
用RT-PCR方法从K562细胞中扩增了410 bp的血型糖蛋白A基因,以含有带3蛋白全长基因的质粒为模板扩增了1.5kb的带3蛋白膜段基因,分别克隆到pMD18-T载体上,筛选到阳性重组子pMD18-T-GPA和pMD18-T-B3m。再将基因分别亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中,随机筛选得到重组病毒转移载体pBacGPA和pBacB3m,为表达和进一步研究血型糖蛋白A和带3蛋白的相互关系打下基础。
傅国辉李宏涛秦勇杜洪清刘明孔宪刚
关键词：血型糖蛋白A带3蛋白杆状病毒基因表达
带3蛋白C端和血型糖蛋白A相互作用及其抗原相关性的研究被引量：7
2002年
采用高效液相色谱法分离鉴定了红细胞膜蛋白质跨膜域的亲水性肽链 ,结果显示血型糖蛋白A (GPA)Lys10 1～Asp130与带 3蛋白有相关性 .为进行深入研究 ,采用RT PCR方法从K5 6 2细胞中扩增了 410bp的GPA基因 ,分别克隆到酵母双杂交BD端表达质粒和杆状病毒转移载体上 .同时 ,以含有带 3蛋白全长基因的质粒为模板扩增了 34 8bp的带 3蛋白C端基因 ,将其克隆到酵母双杂交AD端表达质粒 .经酵母双杂交营养缺陷培养选择和 β半乳糖苷酶检测证实GPA与带 3蛋白之间存在相互作用 .GPA表达产物分别经抗带 3蛋白和抗GPA抗体进行蛋白质印迹分析 ,表明二者具有免疫交叉反应 .上述结果表明带 3蛋白与GPA在结构与功能上存在着密切联系 .
杜洪清傅国辉姜晓殊龙晓宇张振宇杨宝峰孔宪刚
关键词：血型糖蛋白A杆状病毒表达系统膜蛋白相互作用
酵母双杂合系统AD端阴离子交换蛋白C-末端表达质粒的构建被引量：2
2002年
利用 PCR方法 ,从阴离子交换蛋白 1(AE1)全长 c DNA中扩增出约 35 0 bp c末端 c DNA片段。测序后将其克隆至 p GADT7载体上。用醋酸锂法将构建好的 p GADT7- AE1- c-末端转染酵母菌 AH10 9,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果表明 ,获得了 35 0 bp AE1c-末端 c DNA,p GADT7- AE1- c-末端对酵母无毒性 ,不能激活检测基因 。
李宏涛傅国辉秦勇杜洪清姜晓姝刘明孔宪刚
关键词：酵母双杂合系统C-末端质粒克隆
酵母双杂合系统BD端血型糖蛋白A表达质粒的构建被引量：3
2002年
目的 :获得血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段 ,并构建酵母双杂合BD端表达质粒。方法 :利用RT -PCR方法 ,从K5 6 2细胞mRNA中扩增GPAcDNA片段 ,约 410bp。测序后将其克隆至pbridge载体上。用醋酸锂法将构建好的pbridge -GPA转染酵母菌AH10 9,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果 :克隆到的 410bpGPAcDNA编码的氨基酸序列基本与公布序列相同。pbridge—GPA转染酵母菌后 ,在SD/Gal/—His/Ura培养基上出现 1mm大小白色菌落。结论 :获得了血型糖蛋白AcDNA克隆 ,pbridge—GPA对酵母无毒性 ,不能激活检测基因 ,可作为酵母双杂合系统中的靶基因。
李宏涛傅国辉姜晓姝张宝山孔宪刚
关键词：血型糖蛋白膜蛋白质类
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