国家高技术研究发展计划(2006AA02A232)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 相关作者：李建民陈薇王革王秉翔李睿更多>>
- 相关机构：军事医学科学院兰州生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 联合疫苗应用现状及评价被引量：5
- 2009年
- 联合疫苗含有两种或多种免疫原(活的、灭活的病原体或者提纯的抗原),用于预防多种疾病或由同一病原体的不同亚型或血清型引起的疾病,可以避免常规免疫多次注射的问题。然而和单价疫苗相比,联合疫苗研发的复杂性大大增加,将多种免疫原混合到一起进行免疫时不同免疫原间可能因为物理、化学和免疫学机制而干扰其他免疫原的免疫反应,此外佐剂和防腐剂等非活性成分也可能对联合后的活性成分产生影响,这就对联合疫苗的评价提出了特别的要求。现就联合疫苗的研究应用现状、临床评价和发展前景等方面做一综述。
- 任军李建民陈薇
- 关键词：联合疫苗有效性安全性
- 炭疽芽孢杆菌中和性抗体的研究进展被引量：3
- 2010年
- 炭疽芽孢杆菌的中和性抗体在炭疽的被动免疫和治疗中有着重要的意义。抗保护性抗原(protective antigen,PA)抗体既能够抑制芽孢出芽又具有中和毒素的作用。抗致死因子(lethal factor,LE)/水肿因子(edema factor,EF)抗体能阻断致死毒素(lethal toxin,LT)/水肿毒素(edema toxin,ET)发挥活性,荚膜抗体能结合补体导致细菌繁殖体裂解。同时中和性抗体的水平也可以作为保护性免疫的评价标准。另一方面中和性单克隆抗体可以作为分析确定PA的中和性表位的有力工具。对中和性表位的分析既有利于探索炭疽毒素致病机制,也可以为现有炭疽疫苗的使用和发展表位疫苗等新型炭疽疫苗提供理论依据。该文综述了炭疽芽孢杆菌中和性抗体的研究进展。
- 李冰李建民陈薇
- 关键词：炭疽芽孢杆菌炭疽毒素中和性抗体
- 氢氧化铝吸附炭疽杆菌重组保护性抗原的影响因素
- 2011年
- 目的探讨氢氧化铝吸附炭疽杆菌重组保护性抗原(Recombinant protective antigen,rPA)的影响因素。方法取含不同PO43-浓度的PBS和添加EDTA的PBS,分别稀释rPA后,加入氢氧化铝,放置2～8℃及(23±2)℃作用不同时间,检测A280和A260值,计算未吸附的rPA蛋白量,并比较不同溶液中氢氧化铝对rPA的吸附效果。结果氢氧化铝对rPA的吸附率随PO43-浓度的增加而降低;PBS中添加EDTA后,氢氧化铝对rPA的吸附效果明显下降;2～8℃较(23±2)℃的吸附率略有增加,但不同时间的吸附量无明显差异;在H2O中氢氧化铝对rPA的吸附效率比在PBS中高。结论稀释缓冲液和离子强度、EDTA均可影响氢氧化铝与rPA的吸附效果,但吸附温度和时间对吸附的影响不大。
- 王革李睿王秉翔
- 关键词：氢氧化铝炭疽抗原
- 炭疽杆菌保护性抗原在大肠杆菌中的表达及其纯化被引量：1
- 2010年
- 利用基因重组技术获取炭疽杆菌保护性抗原(PA)。将炭疽杆菌保护性抗原编码基因pag与pET载体连接构建重组质粒,转化大肠杆菌DE3株,诱导表达炭疽杆菌保护性抗原,并经亲和层析及凝胶过滤纯化此抗原。实验成功构建了表达炭疽杆菌保护性抗原的重组菌株,纯化后PA纯度达90%,且经检测纯化产物具有天然PA的生物学活性。同时表明从大肠杆菌中纯化PA较以往从炭疽杆菌中获取PA简便易行。
- 王革尤明强李睿王秉翔
- 关键词：纯化
- 抗炭疽保护性抗原人-鼠嵌合抗体在CHO细胞中的表达和活性研究被引量：2
- 2009年
- 目的在CHO细胞中表达抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原（rPA）人-鼠嵌合抗体，并对其活性进行分析。方法RT—PCR克隆具有中和活性鼠源单克隆抗体的轻、重链可变区基因，分别与人Kappa型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建了轻重链嵌合抗体基因。将轻重链嵌合抗体基因克隆表达载体上，构建了嵌合抗体的双启动子表达载体pSecTag-5E1。将pSecTag-5E1转染CHO—dhfr（DG44）细胞，撤掉胸腺嘧啶和次黄嘌呤并不断提高氨甲蝶呤（MTX）的浓度，筛选表达量高的克隆，扩大培养，收集上清，并纯化，用纯化的嵌合抗体进行SDS—PAGE、Westernblot、抗原结合活性、体外细胞保护试验和动物试验。结果在MTX的浓度为5×10^-8mol／L时，获得稳定表达细胞株，表达量为18mg／L。结论成功在CHO—dhfr（DG44）细胞中表达了具有中和活性的抗rPA人-鼠嵌合抗体，为制备抗炭疽的被动免疫制剂奠定了良好的基础。
- 李冰李建民张军徐俊杰刘树玲任军张金龙付玲侯利华陈薇
- 关键词：炭疽人-鼠嵌合抗体CHO细胞
- 炭疽杆菌致死因子的克隆与表达
- 2009年
- 以炭疽杆菌A16R株基因组DNA为模板,PCR扩增出炭疽杆菌致死因子LF基因。构建pET-28(a)/LF表达质粒,并在大肠杆菌中表达。优化表达条件,可溶性目的蛋白表达量约占细菌可溶性总蛋白的10%,表达产物经疏水层析纯化后,目的蛋白约占90%。免疫双扩散及免疫印迹试验检测结果显示,该表达产物与炭疽杆菌诊断血清有特异性反应,具有抗原性。
- 李睿王革尤明强傅林锋王秉翔
- 关键词：炭疽杆菌蛋白表达蛋白纯化
