国家自然科学基金(81273214)
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 相关作者：贾筱琴李国利张子兰李晓敏刘浩更多>>
- 相关机构：扬州大学扬州市江都人民医院南通市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miRNA在肝癌发生与转移中的研究进展被引量：3
- 2013年
- 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤。转移、扩散是其预后不良的主要原因。因此,探索肿瘤发生、发展和侵袭转移的分子机制,寻求新的治疗靶点,对于提高肝癌的疗效具有重要意义。microRNA简称为miRNA,通常长度为19-25个核苷酸,广泛存在于真核生物中,是一类高度保守的非编码的小分子单链RNA。miRNA通过与靶mRNA3'-UTR区完全或部分互补结合,导致靶区降解或转录后翻译抑制,从而调控靶基因的表达。miRNA具有癌基因和抑癌基因的作用,直接或间接参与肝癌发生和发展。
- 张子兰贾筱琴
- 关键词：MICRORNA肝癌
- 肿瘤相关巨噬细胞在肝癌中的研究进展被引量：7
- 2014年
- 近年来肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)与肿瘤的关系成为研究热点,尤其是肝癌等实体肿瘤。肿瘤微环境中的TAMs释放多种细胞因子和趋化因子介导免疫反应,通过参与上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymaltransitions,EMT),血管生成等过程促进肝癌的侵袭和转移。本文将从TAMs的募集和分化、与肿瘤微环境的关系、促进转移的机制、与肝癌之间的通路以及靶向TAMs治疗肝癌的新方法等方面对TAMs在肝癌中的研究进展进行综述。
- 缪俊俊李国利贾筱琴
- 关键词：肿瘤相关巨噬细胞肝细胞癌血管生成上皮细胞间质转化
- 胃癌组织与血清miR-126的表达及临床意义被引量：2
- 2017年
- 目的:分析胃癌患者癌组织与血清miR-126的表达水平,探讨胃癌组织与血清miR-126在胃癌诊断中的价值。方法:收集42对胃癌组织及其对应的远癌对照组织(距离癌组织5 cm以上)为实验组,60例年龄相近的健康人群作对照组,标本系胃癌根治术后新鲜标本,采集患者术前、术后1周及健康对照组人群的外周血各5 mL,采用实时定量PCR法检测miR-126在癌组织和患者血清中的表达情况,另采集患者术前、术后1周的外周血各5 mL送检验科做癌胚抗原(CEA)检测。根据组织及血清中miR-126检测结果和CEA值作ROC曲线判断诊断效率。结果:胃癌组织miR-126的相对表达水平低于远癌对照组织(t=7.276,P<0.05);miR-126在癌组织中的表达与肿瘤大小、临床分期、组织分化程度有关;在胃癌患者血清中,术前血清miR-126的相对表达水平低于术后(t=6.316,P<0.05);术后血清中的相对表达水平低于健康对照者(t=4.338,P<0.05);miR-126在血清中的表达与肿瘤临床分期、组织分化程度有关;胃癌组织miR-126的诊断效率ROC曲线下面积(AUC)为0.823,血清AUC为0.776,CEA的诊断效率AUC为0.537。Pearson相关分析显示,胃癌患者癌组织与术前血清中miR-126的相对表达水平呈正相关(r=0.484,P<0.01)。结论:胃癌组织和血清中miR-126表达下调;血清miR-126可以作为评估胃癌患者病情严重程度的标志之一;血清miR-126的表达对胃癌具有较好的诊断价值,优于血清CEA;胃癌组织和血清miR-126的表达水平呈正相关,有望成为诊断早期胃癌和监测胃癌复发的生物学标志物。
- 龚瑜杨其昌袁荣华周峰李国利
- 关键词：MIR-126胃癌组织血清实时定量PCR肿瘤标志物
- 过表达miR-16下调IL-4诱导分化的THP-1细胞IL-10和Arg1的表达
- 2015年
- 目的探讨慢病毒介导的miR-16对THP-1巨噬细胞表达白细胞介素10(IL-10)和精氨酸酶1(Arg1)的影响。方法利用重组人IL-4(rh IL-4)将THP-1细胞诱导分化为M2型巨噬细胞,利用ELISA检测诱导前后细胞IL-10的分泌,实时荧光定量PCR检测THP-1巨噬细胞诱导前后miR-16的表达;通过慢病毒感染获得miR-16过表达细胞;ELISA检测miR-16过表达细胞和对照细胞IL-10的分泌;流式细胞术检测miR-16过表达细胞和对照细胞IL-10的表达;Western blot法检测miR-16过表达细胞和对照细胞Arg1的表达。结果 THP-1细胞经IL-4诱导后,培养上清中IL-10的分泌逐渐增加,并在第6天达峰值。IL-4将THP-1细胞诱导为M2型巨噬细胞后,miR-16表达下调;慢病毒感染M2型巨噬细胞经嘌呤霉素筛选后GFP表达率提高至97.7%;ELISA检测M2型巨噬细胞miR-16过表达组上清液中IL-10的分泌量为(72.15±0.16)pg/m L,较对照组(103.47±0.14)pg/m L低。流式细胞术检测显示miR-16过表达细胞IL-10的平均荧光强度(Gm)为3.47,胞内IL-10的表达水平较对照组(Gm=12.40)低。过表达miR-16后,M2型巨噬细胞中Arg1表达降低。结论慢病毒介导的miR-16能够抑制IL-4诱导分化的THP-1巨噬细胞中IL-10和Arg1的表达。
- 缪俊俊花晨沈娅婷王正兵李国利贾筱琴
- 关键词：白细胞介素-10
- miR-16对人肝癌细胞BEL-7402增殖与凋亡的影响被引量：4
- 2018年
- 背景与目的:miR-16和miR-15a基因复合体位于人13q14区域的DLEU2基因内含子内,是目前公认的抑癌基因之一。该基因区域的缺失与多种实体肿瘤有关,miR-16同时促进肿瘤细胞的凋亡。该研究旨在探讨miR-16对BEL-7402肝癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:人肝癌细胞BEL-7402分为miR-16感染组(加入LV-hsamiR-16-1慢病毒)和阴性对照组(加入阴性对照病毒),采用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光的强度;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测miR-16对BEL-7402肝癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析miR-16对人肝癌细胞BEL-7402的细胞周期与凋亡的影响。结果:CCK-8检测结果显示,感染组细胞增殖能力明显降低(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,阴性对照组BEL-7402细胞周期中G1期细胞百分率数值明显下降,但S及G2/M期细胞的百分率均明显上升(P<0.05)。miR-16促进BEL-7402肝癌细胞凋亡。结论:miR-16抑制BEL-7402肝癌细胞的增殖并促进其凋亡,miR-16有望成为临床肝癌靶向治疗的新靶点。
- 缪欣丁岚刘浩李晓敏徐聪贾筱琴李国利
- 关键词：增殖凋亡
- miR-16/15a^(-/-)小鼠NK细胞功能及其对结肠癌移植瘤敏感度分析
- 2021年
- 目的:观察miR-16是否通过调节NKG2D表达而影响自然杀伤(natural killer,NK)细胞的生物学功能及其抗肿瘤活性。方法:miR-16/15a^(-/-)小鼠和对照小鼠经皮下注射MC38细胞制备结肠癌移植瘤模型,观察两组小鼠皮下实体瘤生长情况;比较普通小鼠生理或荷瘤状态下NK1.1+NKG2D+细胞和NK1.1+NKG2D-细胞内miR-16的表达;分析生理及荷瘤状态下miR-16/15a^(-/-)小鼠NK细胞NKG2D表达、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)分泌及细胞毒性作用。结果:与同品系小鼠比较,miR-16/15a^(-/-)小鼠中MC38结肠癌移植瘤的生长受到显著抑制,生理状态小鼠NK1.1+NKG2D+细胞miR-16的表达明显低于NK1.1+NKG2D-细胞,而在荷瘤小鼠来源的两组细胞中无明显差异;与野生型小鼠相比,生理及荷瘤状态下的miR-16/15a^(-/-)小鼠NK1.1+NKG2D+细胞的比例及NK细胞活性无明显变化。结论:miR-16/15a敲除抑制MC38结肠癌移植瘤生长,而miR-16/15a敲除小鼠体内NK细胞的比例及功能及荷瘤状态下NK细胞活性并无明显变化,提示miR-16/15a缺失并非通过NK细胞抑制MC38结肠癌移植瘤生长。
- 魏莹莹胡翔宇祖丽皮耶·艾尔肯龚卫娟贾筱琴
- 关键词：结肠癌NK细胞NKG2D活性
- miR-148a对肝癌细胞株侵袭和迁移的抑制作用及机制被引量：3
- 2014年
- 背景与目的:原发性肝癌是肝细胞或肝内胆管上皮发生的恶性肿瘤,其复发和转移十分常见。本实验以慢病毒介导miR-148a,感染人肝癌SMMC-7721细胞,观察其对SMMC-7721细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:选用SMMC-7721肝癌细胞株,进行miR-148a慢病毒载体的构建,筛选稳定表达miR-148a肝癌细胞株。RTPCR检测细胞中miR-148a的表达水平。划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞侵袭迁移能力。采用明胶酶谱法测定MMP-2、MMP-9的活性。蛋白质印迹法(Western blot)检测MMP-2、MMP-9和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达情况。结果:RT-PCR结果显示,和对照组相比,LV-miR-148a肝癌细胞感染组表达miR-148a明显增高,体外侵袭实验细胞划痕实验显示过表达miR-148a后SMMC-7721的侵袭和迁移能力明显下降。明胶酶谱法结果显示过表达miR-148a的肝癌细胞,MMP-2和MMP-9降解明胶的能力下降(P<0.05)。过表达miR-148a同时能降低肝癌细胞SMMC-7721中vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白的表达,但并未影响E-cadherin的表达。结论:miR-148a在体外能抑制肝癌细胞SMMC-7721的侵袭和迁移,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9和vimentin的表达水平有关。
- 贾筱琴缪俊俊雍军张子兰花晨李国利
- 关键词：肝细胞癌MMP-2MMP-9
- miR-15a/16-1基因敲除小鼠的鉴定及其脾脏免疫细胞频率分析被引量：1
- 2016年
- 目的 :探讨mi R-15a/16-1基因敲除小鼠的繁育与子代鼠的鉴定,及其脾脏免疫细胞频率。方法 :从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定。mi R-15a/16-1基因敲除小鼠眼眶取血,用动物血液分析仪进行全血细胞分析。采用流式细胞仪分析mi R-15a/16-1基因敲除小鼠脾脏中免疫细胞频率。结果:mi R-15a/16-1+/+、mi R-15a/16-1+/-、mi R-15a/16-1-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律。流式结果显示,mi R-15a/16-1基因敲除小鼠与野生型小鼠相比,CD19+、NKG2D+细胞增多,其余无明显差异。全血细胞分析结果显示淋巴细胞增多。结论:实验所用PCR方法可以鉴定mi R-15a/16-1-/-小鼠;mi R-15a/16-1-/-小鼠的获得为进一步探究mi R-15a/16-1的作用提供了较理想的动物模型;敲除mi R-15a/16-1基因,小鼠脾脏CD19+、NKG2D+细胞增多。
- 沈娅婷胡春霞陈文艳李晓敏刘浩李国利龚卫娟贾筱琴
- 关键词：基因敲除小鼠免疫功能全血细胞分析
- miR--15a/16调节CD8+T细胞NKG2D的表达及其对DSS--肠炎的影响
- miR-15a/16最早发现于慢性淋巴细胞白血病(CLL)的研究中，CLL患者染色体13q14区通常缺失，提示该区域含有抑癌基因。作为目前公认的抑癌基因，miR-15a/16还广泛参与细胞的增殖分化、自身免疫性疾病和炎症...
- 魏莹莹
- 关键词：肠炎
- 文献传递
