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解放军总医院科技创新苗圃基金(07MP68)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
孙胜
徐菲菲
刘秀华
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相关机构:
中国人民解放军总医院
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发文基金:
解放军总医院科技创新苗圃基金
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相关领域:
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刘秀华
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孙胜
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2009
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缺氧后处理诱导大鼠心肌细胞蛋白质差异表达
被引量:2
2009年
目的研究缺氧后处理(hypoxic postconditioning,H-postC)与缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的大鼠心肌细胞蛋白质差异表达,旨在从内源性蛋白表达变化的角度阐明后处理保护的分子机制。方法原代培养Sprague-Dawley(SD)乳鼠心肌细胞随机分为3组(均n=4):(1)缺氧/复氧(H/R)组:将细胞置于缺氧仓内,通入95%N2-5%CO2混合气2h后,37℃常氧孵育24h;(2)缺氧后处理(H-postC)组:细胞置于缺氧仓内2h,复氧10mitt/缺氧20rain,反复2次,37℃常氧孵育24h;(3)对照组(control):细胞置于CO2孵箱37℃常氧孵育至实验结束。提取各组心肌细胞蛋白质,经双向电泳分离、考马斯亮蓝染色后扫描分析蛋白质表达变化,选取9个差异显著的蛋白点进行胶内酶切、肽质量指纹图谱分析和NCBInr数据库检索。结果双向电泳可分离(553±31)个蛋白质,点匹配率为80.1%±1.5%。与对照组相比,6种蛋白质在H-postC组表达升高,而在H/R组表达降低;1种蛋白质在H-postC组和H/R组表达均降低,而H-postC组降低更为明显;1种蛋白质在H-postC组和H/R组表达均升高,而H-postC组升高更为明显;1种蛋白质仅在H-postC组表达升高。质谱鉴定的9种蛋白质可分为5类:①保护性伴侣分子:DJ-1蛋白、αB-晶体蛋白、热休克蛋白27;②细胞凋亡调节分子:星型胶质细胞磷蛋白15。非受体6型蛋白酪氨酸磷酸酶;③核糖核蛋白复合体组分:不均质核内核糖核蛋白K;④线粒体能量代谓十相关分子:线粒体ATP合酶D链、细胞色素C氧化酶亚单位VIa;⑤细胞骨架蛋白:β-肌动蛋白。结论H-postC可能通过上调保护性分子伴侣、调节细胞凋亡相关的信号分子、稳定核糖核蛋白复合体结构、维持线粒体功能活性、稳定细胞骨架而发挥心肌保护作用。
徐菲菲
孙胜
刘秀华
关键词:
心肌细胞
蛋白质组
双向电泳
质谱
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