国家高技术研究发展计划(2006AA02A138)
- 作品数：27 被引量：35H指数：4
- 相关作者：易定华魏旭峰顾春虎刘维永谭红梅更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学唐都医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- bFGF纳米控释载体对骨髓间充质干细胞的生物学作用被引量：1
- 2010年
- 本研究旨在探讨甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA)载碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)凝胶纳米微球(dex-GMA-bFGF-NPs)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学作用。采用改良乳液聚合技术合成纳米微球,将单纯bFGF(A组)、空白dex-GMA凝胶纳米微球(B组)和载bFGF凝胶纳米微球(C组)加入骨髓间充质干细胞培养液中,不添加任何添加物的单纯MSCs为空白对照组(D),用细胞计数法、噻唑蓝比色法(MTT法)、流式细胞术观察细胞增殖情况;并检测细胞ALP活性,以反映dex-GMA-bFGF-NPs对BMSCs分化情况的影响。结果显示:dex-GMA-bFGF-NPs大小均匀,包封率高达88%,85%的bFGF在前14 d释放。dex-GMA-bFGF-NPs对bFGF缓释有效促进BMSCs的增殖,在培养12 d后,A、B、C和D组细胞数分别为(21.97±0.25)×104个细胞/ml(、12.43±0.13)×104个细胞/ml(、27.45±0.78)×104个细胞/ml和(12.03±0.43)×104个细胞/ml,差异有统计学意义(P<0.05),培养3 d后,A组的G2/M+S期百分数最高,7 d后,C组的G2/M+S期百分数最高。结论:dex-GMA-bFGF-NPs可控制活性bFGF的长时间持续释放,作为bFGF的缓释载体,可明显促进骨髓间充质干细胞的增殖和分化。
- 邬晓臣张近宝易定华顾春虎魏旭峰吴红欧阳辉高峰
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞
- 切应力对人骨髓间充质干细胞增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨切应力作用于人骨髓间充质干细胞(HMSCs)后,对细胞增殖的影响。方法:将HMSCs种植于平板流动腔中,待贴壁后对其施加1dyne/cm2的切应力作用6h,用MTT法测细胞增殖曲线,并用流式细胞仪测定细胞周期,计算增殖指数。结果:发现HMSCs在1dyne/cm2切应力作用6h后,增殖曲线抬高,G2+S期细胞明显增加。结论:HMSCs在切应力作用下,增殖能力增强,是组织工程血管种子细胞的理想选择。
- 孙阳易蔚魏旭峰易定华郭树忠
- 关键词：切应力骨髓间充质干细胞增殖细胞周期
- 应变率成像技术评价风湿性二尖瓣狭窄患者换瓣前后心肌收缩功能被引量：4
- 2009年
- 目的应用应变率成像(SRI)技术对风湿性二尖瓣狭窄患者换瓣前后心肌收缩功能进行测量,并评价其判断二尖瓣换瓣术预后的价值。方法42例风湿性二尖瓣狭窄患者按术后恢复情况分为A、B两组:A组30例为恢复良好组,B组12例为恢复较差组;健康对照组26例。术前及术后常规超声心动图检测二尖瓣瓣口面积、左心房和左心室大小、左心室射血分数、左心室短轴缩短率;应用SRI技术测量左心室各壁基底段和中间段收缩期峰值应变率(SRs)参数,比较术前、术后1个月的SRs变化情况。结果术前A、B两组左心室壁各节段SRs均小于对照组相应节段(P<0.05);B组各节段SRs均小于A组对应节段(P<0.05)。术后A组左心室壁各节段明显改善(P<0.05)。B组术后左心室壁各节段SRs改善不明显(P>0.05)。结论SRI技术可定量评价风湿性MS患者心肌收缩功能,对判断手术预后具有一定的临床意义。
- 王红梅张军朱永胜张海滨刘丽文
- 关键词：二尖瓣狭窄瓣膜置换术心肌收缩功能应变率成像
- 脉动生物反应器中新型直线电机的研制
- 2011年
- 为了给脉动生物反应器提供一个稳定可靠,且输出力量和工作行程可调的脉动源,设计并研制出一种新型直线电机;该电机采用动磁分体式结构,解决了该类电机输出力不平稳的问题,同时利用STC89C52为核心的控制模块,设计出正负脉冲变频电源,使脉动源输出压力达到160mmHg,输出流量达到100ml;经过反复的实验论证,此直线电机运行可靠,各项指标均已达到设计要求;与同类相比,该电机结构设计新颖,工作安全可靠,性价比高。
- 陈晖宁铎黄建兵郭飞飞
- 关键词：直线电机STC89C52
- 正常小鼠主动脉瓣膜的组织形态学研究
- 2010年
- 目的:建立转基因小鼠主动脉瓣疾病模型的评估标准。方法:采用3月龄C57成年小鼠20只,分离小鼠心脏称重后固定,经HE染色、免疫荧光、激光共聚焦和Massoon染色后光镜观察及电镜观察,分别对瓣膜的细胞数量、分布、胶原含量及瓣膜超微结构进行组织形态学分析。结果:正常小鼠主动脉瓣的面积为(0.1978±0.003)mm2,周长为(9.18±0.06)×102μm,平均细胞数为(9.75±0.04)×102个/mm2,其中内皮细胞数为(3.23±0.10)×102个/mm2,间质细胞数为(5.05±0.07)×102个/mm2,胶原含量为(23.77±8.38)%。此外,通过激光共聚焦显微镜观察还发现,成体内皮下层存在一些共表达CD31及α-SMA的细胞,表明成体瓣膜仍保留具有上皮-间质转化潜能的细胞。电镜观察发现,瓣膜的心室面内皮与主动脉面内皮在形态上存在有很大的差异:心室面内皮呈扁平形与血流方向一致,主动脉面内皮呈方形与血流方向垂直。间质中成纤维细胞处于静止状态,其细胞胞体较小,呈长梭形,粗面内质网和高尔基复合体均不发达。细胞外基质胶原的含量丰富,主要集中于流出道。结论:本实验首次详细观测了小鼠主动脉瓣形态学特征,建立了正常小鼠主动脉瓣组织形态学研究的标准,为今后小鼠主动脉瓣疾病模型的研究提供重要的参考依据。
- 历志魏旭峰顾春虎康晓军王春梅韩骅易定华
- 关键词：主动脉瓣膜上皮-间质转化小鼠
- 梗死心肌组织裂解液对鼠骨髓间充质干细胞诱导分化作用的体外研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨梗死心肌组织裂解液对骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞分化的诱导作用。方法取SD大鼠梗死区心肌组织及其周围区域正常心肌组织分别制备梗死心肌组织裂解液和正常心肌组织裂解液;用Balb/c小鼠骨髓细胞进行MSC培养,取生长较好的第2代MSC制备MSC贴片,分别用DMEM培养基(空白对照组)、加入正常心肌组织裂解液的DMEM培养基(正常心肌组织裂解液组)和加入梗死心肌组织裂解液的DMEM培养基(梗死心肌组织裂解液组)培养。取各组培养14d的MSC,透射电镜下观察细胞超微结构;并进行免疫细胞化学染色,观察α-肌动蛋白(actin)、心肌特异性转录因子4(GATA-4)、心肌特异性肌球蛋白重链(MHC)、心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)、心肌增强因子2(MEF-2)、连接蛋白(Cx)43和Cx45的表达情况。结果超微结构观察显示空白对照组细胞器结构正常;正常心肌组织裂解液组细胞内未见明显的肌丝样结构;而梗死心肌组织裂解液组部分细胞内可见细小的肌丝样结构。免疫细胞化学染色分析显示,空白对照组MSC不表达心肌细胞特异性蛋白;正常心肌组织裂解液组MSC仅表达α-actin;而梗死心肌组织裂解液组MSC表达α-actin、GATA-4、MHC、cTnT、cTnI和MEF-2等心肌特异性标志蛋白,但不表达Cx43和Cx45。结论梗死心肌组织裂解液可以诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化。
- 赵金超顾春虎王云雅魏旭峰董小超刘金成王云易定华
- 关键词：间质干细胞心肌梗死细胞分化
- 染料介导光氧化处理去细胞猪主动脉瓣的生物学特性被引量：1
- 2008年
- 目的探讨染料介导光氧化处理猪主动脉瓣膜的生物学特性,以期获得性能良好的新型生物瓣膜材料。方法经去细胞处理的猪主动脉瓣30个,随机分为3组。光氧化处理组(n=10):去细胞瓣膜经染料介导光氧化处理;戊二醛处理组(n=10):去细胞瓣膜采用戊二醛处理;去细胞对照组(n=10):去细胞瓣不做固定处理,置于生理盐水中备用。分别测定并比较3组瓣膜的形态学改变、组织学特点、瓣膜厚度、含水量、热皱缩温度、断裂强度和可溶性蛋白含量。结果光氧化处理组主动脉瓣呈淡蓝色,瓣膜质地柔软,弹性大,瓣叶无皱缩。光氧化处理组主动脉瓣瓣膜厚度较戊二醛处理组薄(0.26±0.09mmvs.0.38±0.08mm;P<0.05),组织含水量较戊二醛处理组大(86.30%±4.03%vs.71.10%±3.23%;P<0.05),热皱缩温度低于戊二醛处理组(76.30±0.70℃vs.87.70±0.30℃;P<0.05);瓣膜厚度、组织含水量和热皱缩温度与去细胞对照组比较差异无统计学意义。光氧化处理组断裂强度较去细胞对照组明显增大(17.33±2.65mPavs.9.11±0.95mPa,P<0.05),可溶性蛋白含量较去细胞对照组明显减少(0.039%±0.013%vs.0.107%±0.024%;P<0.05),而与戊二醛处理组比较差异无统计学意义。结论染料介导光氧化处理去细胞猪主动脉瓣有较好的生物学特性。
- 刘洋孙国成刘珊珊谭红梅欧阳辉易定华刘维永
- 关键词：染料介导光氧化去细胞生物瓣膜生物学特性
- 低氧对小鼠骨髓间质干细胞增殖及黏附的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖、黏附及分泌的影响。方法采用细胞增殖实验、细胞黏附实验及Western blot分别观察小鼠MSCs在低氧（6％O2）和常氧（21％O2）的增殖、黏附，及纤连蛋白（FN）和玻璃粘连蛋白（VN）的表达。结果低氧组10d内培养即可扩增到（1．20±0．19）×10^5细胞／孔，明显高于常氧组（0．65±0．08）×10^5细胞／孔（P〈0．05）；低氧组24h细胞黏附率（88．64±1．4）％高于常氧组（60．83±1．6）％（P〈0．05），同时FN和VN的蛋白表达显著增加。结论低氧作为体外的一种可控制因素，调节MSCs的增殖及黏附功能，对于MSCs的组织工程的应用具有一定的意义。
- 彭阳红顾春虎易定华杨剑魏旭峰王进康晓军刘维永
- 关键词：低氧骨髓增殖纤连蛋白
- 新型纳米微球载碱性成纤维细胞生长因子促进新生血管形成的研究被引量：2
- 2008年
- 目的制备载碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）甲基丙烯酸缩水甘油酯修饰葡聚糖纳米凝胶微球，观察其对新生血管生成的诱导和促进作用。方法采用改良乳液聚合法制备载bFGF纳米微球（bFGF-Dex-GMA-NPs），对纳米微球的外形、包封率、体外释药特征进行常规检测，建立兔后肢缺血模型后，分为以下几组（每组6只）：安慰剂治疗组（注射磷酸盐缓冲液）（A组）；bFGF治疗组（B组）；载bFGF纳米微球组（C组），分别于治疗后7、21d用^99mTc标记的sestamibi对后肢血流进行分析，并于21d将动物处死，取局部肌肉组织切片进行免疫组织化学染色，镜下对毛细血管计数。结果合成的纳米微球外形圆整，无相互粘连，包封率高达80．9％，并能较好地控制bFGF的释放，持续释放时间超过25d。后肢缺血模型治疗第7天，B组和C组能量计数分别为（130．95±14．59）、（127．60±11．36），明显高于A组（27．65±6．82）（P〈0．05），但B组和C组间差异无统计学意义（P〉0．05），第21天，C组能量计数增加到（450．69±21．06），明显高于A组（39．89±8，45）和B组（165．34±15，88）（P〈0．05）。免疫组织化学染色结果显示C组毛细血管密度是（99.00±5.44）／mm^2，明显高于其他两组2．00±0.59（A组）、13．00±1.35（B组）（P〈0．05）。结论载bFGF纳米微球可以控制bFGF长时间释放，对缺血组织新生血管形成有优于单纯bFGF的诱导和促进作用。
- 邬晓臣顾春虎王云雅吴红魏旭峰孙国成汪静董小超易定华
- 关键词：血管生成BFGF纳米微球
- 环氧氯丙烷对戊二醛鞣制的猪主动脉瓣防钙化化学改性的实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的探索对戊二醛鞣制猪主动脉瓣改性的新的防钙化处理方法,延长生物瓣使用寿命。方法用环氧氯丙烷对戊二醛鞣制的猪主动脉瓣进行改性处理,新鲜瓣膜组作为空白组,戊二醛处理组作为对照组。将三组猪主动脉瓣埋植于大鼠皮下,分别于2、4、8周后取出,通过原子吸收光谱法测定猪主动脉瓣钙含量和VonKossa钙染色,以评价环氧氯丙烷化学改性对戊二醛鞣制的猪主动脉瓣钙化的影响。结果光镜下显示环氧氯丙烷改性处理组较少炎性细胞浸润,胶原纤维结构保持良好;戊二醛组试片,则有大片状钙盐沉积及较多炎性细胞浸润,胶原纤维结构破坏严重;SD大鼠皮下包埋实验各组瓣膜的钙化程度在第2、4、8周时逐渐增加,在第4、8周时实验组明显低于对照、空白组(P<0.05)。说明环氧氯丙烷对戊二醛鞣制的猪主动脉瓣改性处理,可显著延缓猪主动脉瓣的钙化进程。Von Kossa染色也显示环氧氯丙烷改性处理明显减轻了戊二醛鞣质的生物瓣膜的钙化。结论通过环氧氯丙烷对猪主动脉生物瓣进行进一步的化学改性处理,可显著延缓猪主动脉生物瓣的钙化进程,可望成为一种防止猪主动脉生物瓣钙化和坏死及其功能衰退的有效方法。
- 赵金超易定华魏旭峰顾春虎顾继伟李军朋侯小东王云
- 关键词：生物瓣膜戊二醛环氧氯丙烷
