国家自然科学基金(30670571)
- 作品数：12 被引量：51H指数：4
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- 深度烧伤患者四肢关节功能部位的复合皮移植应用被引量：5
- 2007年
- 目的观察异体无细胞真皮基质(ADM)在深度烧伤的四肢关节部位的临床移植效果。方法以11例四肢关节部位深Ⅱ和Ⅲ度烧伤的患者为对象,采用复合皮(CS)移植技术将20块网状ADM(每块150～400cm2)与自体超薄断层皮片(UTSG,厚度0.05cm)重叠,组成CS,一次性移植于患者14处四肢关节区域的切痂或削痂创面上,并在邻近的烧伤部位移植自体断层中厚皮片(STSG,厚度0.15～0.20cm)作为对照。术后10～14d首次换药,定期随访和行移植皮片组织学观察。结果术后2周CS成活率93.7%,STSG成活率为97.2%,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。随访1～3年,CS组未见明显的瘢痕增生和挛缩,所有患者关节屈伸范围正常。组织学观察显示,CS真皮层无皮肤附件,胶原纤维排列有序,仅有少量淋巴细胞浸润。但在烧伤后期感染创面上的CS移植效果(外观质地和组织结构)不及烧伤早期的清洁创面。结论深度烧伤患者关节部位尽早应用ADM能够产生满意的整形效果并满足关节功能需要。
- 姜笃银聂兰军蔡景龙王魏
- 关键词：烧伤皮肤移植无细胞真皮基质复合皮
- 角质细胞生长因子研究进展被引量：25
- 2009年
- 目的综述角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)的研究进展,全面了解KGF基本特性及应用方法,为研制新型KGF药物、改善皮肤替代物的性能奠定基础。方法广泛查阅近年来国内外有关KGF的相关文献,并综合分析。结果KGF由各种来源的间质细胞分泌,受体分布于上皮细胞,特异性地促进上皮细胞增殖、迁移及分化,与器官发育、创面修复、肿瘤发生及免疫重建等多方面关系密切。结论KGF可用于促进创面愈合及改善皮肤替代物性能,但尚需改变结构,去除副作用,并纯化其促上皮生长的作用。
- 宗宪磊蔡景龙姜笃银王魏
- 关键词：角质细胞生长因子器官发育创面修复肿瘤发生
- 烧伤变性脱细胞真皮基质可再生利用的实验研究被引量：12
- 2012年
- 目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质（DADM）作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法（1）取12只Wistar大鼠，其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤（以下称烧伤）创面，分别于伤后1、2、3d（每时相点3只）取创面全厚皮肤，用2．5g／L胰蛋白酶-体积分数0．5％Triton X-100行脱细胞处理制成DADM，相应称为DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d；余下3只大鼠不致伤，同法制备ADM作为对照。对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测（极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系）。（2）另取64只Wistar大鼠，按随机数字表法分为ADM组、DADM．1d组、DADM-2d组、DADM-3d组，每组16只。于各大鼠背部制作-2．0cm×1．8cm大小皮瓣，将前述ADM和DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d切制成1．8cm×1．5cm大小后分别埋植于皮瓣下。术后1、3、5、9周，每组每时相点取4只大鼠，肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化，并对埋植物行组织学观察。对数据行单因素方差分析及t检验。结果（1）新鲜制备的各DADM呈乳白色，质地柔软有弹性，韧性较ADM弱。光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在，DADM胶原纤维增粗程度不均匀，排列紊乱，嗜伊红性增强。各DADM微生物学检测结果均为阴性。DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较，差异均无统计学意义（F值为0．088-3．591，P值均大于0．05）；其中DADM-3d此4项指标值最高，分别为（13．0±2．4）MPa、（61±4）N、（173±7）％、（45．7±2．0）％。ADM此4项指标各为（19．0±2．6）MPa、（95±4）N、（201±5）％、（62．5±2．2）％，与3种DADM两两比较均偏高（t值为6．42±17．125。P值均小于0．01）。（2）埋植术后1周，各组大鼠创面元渗出或红肿，埋植物未收缩或卷曲；创面有炎性细胞浸润并有Fb及�
- 王晓川李川单菲王文婷朱旭国姜笃银
- 关键词：烧伤细胞外基质变性真皮脱细胞真皮基质创面修复
- 角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建展示角质细胞生长因子（KGF）噬菌体活性肽，检测其促表皮细胞增殖的作用。方法选择4个KGF序列，设计引物；用反转录．PCR法获得3个KGF序列（Pl、P2和P4），直接合成1个KGF序列（P3）；将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中；用噬菌体展示技术，将KGF基因片段展示于噬菌体表面；用四甲基偶氮唑盐（MTF）法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用，测定其在570nm的吸光度（A）值，用免疫荧光法检测其细胞亲和力。结果获得4种KGF基因，构建在噬菌粒pComb3中；通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面。MTr检测的吸光度（A）值结果显示阴性对照组（0．293±0．017）与KGF对照组（0．520±0．043）及4种KGF噬菌体活性肽组（P1～4）（0．469±0．057、0．441±0．048、0．438±0．035、0．446±0．037）间差异均有统计学意义（均P〈0．01），免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力。结论构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖。
- 宗宪磊姜笃银李国菊蔡景龙
- 关键词：细菌噬菌体肽库角质细胞生长因子表皮细胞
- 皮肤再生中成纤维细胞生长因子的应用及其策略
- 2008年
- 烧伤或慢性难愈性创面等多伴有不同程度的皮肤缺失，治疗中常遇到创面愈合缓慢，自体皮源不足，皮肤附件破坏，以及皮肤替代物的性能较差等问题，导致皮肤创面愈合后质量较差。成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）与皮肤及其附件，以及皮肤创面愈合关系密切，能够促进创面愈合、促进皮肤附件再生、改善皮肤替代物的性能、提高皮肤再生质量。本文对FGF提高皮肤再生质量的应用及其策略作一综述。
- 宗宪磊蔡景龙王魏姜笃银
- 关键词：皮肤再生慢性难愈性创面皮肤替代物皮肤附件皮肤创面愈合
- 角质细胞生长因子活性短肽促进糖尿病大鼠创面愈合的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨角质细胞生长因子(KGF)活性多肽对糖尿病大鼠创面愈合的促进作用。方法选择24只健康雌性SD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素酸(STZ),制备糖尿病大鼠模型。将24只大鼠随机分成4组,即阴性对照组、KGF阳性对照组、KGF活性短肽1组、KGF活性短肽2组,每组6只。分别于大鼠背部制备直径2 cm的圆形创面,并定期对创面局部注射各组药物。伤后14 d进行拍照,记录创面未愈合面积,计算创面愈合率。采用HE染色观察创面愈合情况。结果成功制备糖尿病大鼠慢性创面模型。伤后14 d,KGF阳性对照组、KGF活性短肽1组和KGF活性短肽2组的创面愈合率与阴性对照组比较,显著升高,差异有高度统计学意义(P <0.01);KGF活性短肽1组和KGF活性短肽2组的创面愈合率与KGF阳性对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。阴性对照组创面皮肤全层缺失,毛囊、汗腺和皮脂腺等皮肤附件缺失,组织结构均匀致密、无层次,炎症细胞浸润明显。除阴性对照组外,其余各组均创面上皮化良好,深层组织层次清楚、结构疏松,炎症细胞浸润较少,并可见再生的毛囊、汗腺和皮脂腺等皮肤附件。结论 KGF活性短肽可促进糖尿病大鼠的创面愈合及皮肤附件的再生。
- 宗宪磊曹春艳宋国栋赖晨智余泮熹靳小雷姜笃银
- 关键词：角质细胞生长因子糖尿病大鼠创面愈合
- 转化生长因子β1噬菌体模拟肽抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的实验研究被引量：6
- 2011年
- 目的从噬菌体随机12肽库中筛选获得转化生长因子（TGF）β1噬菌体模拟肽，评估其抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的作用。方法以人TGF—β1单克隆抗体为靶，生物淘选噬菌体模拟肽。噻唑蓝（MTT）比色法定量测定活细胞的数量。Annexin V—FITC／PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测对成纤维细胞的凋亡作用。免疫荧光测定检测模拟肽与成纤维细胞的亲和力。实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞核因子κB（NF—κB），结缔组织生长因子（CTGF）的表达水平。结果共获得10种噬菌体模拟肽，具有与TGF—β1、TGF—β2、TGF—β受体Ⅱ（TβRⅡ）、TGF—β诱导因子、NF—κB或细胞分裂原素活化蛋白激酶（MAPK）相似的序列。MTT比色测定结果显示4种（第7～10组）噬菌体模拟肽组能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖（P〈0．05）。免疫荧光测定显示是噬菌体上的模拟肽，而不是噬菌体本身，能够与瘢痕疙瘩成纤维细胞相结合；凋亡实验显示这4种噬菌体模拟肽能够轻度促使瘢痕疙瘩成纤维细胞发生轻度的晚期凋亡；实时定量PCR的结果显示这4种噬菌体模拟肽NF—κB的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．28、0．26、0．46、0．30倍，4种噬菌体模拟肽CTGF的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．26、0．60、0．34、0．17倍。结论噬菌体模拟肽可能是通过调节NF—κB及CTGF的表达，调节瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖。
- 刘振中姜笃银蔡景龙宗宪磊张基勋单菲王文婷王魏
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞肽库转化生长因子Β1细胞增殖
- 合成角质细胞生长因子活性短肽促进表皮细胞增殖的实验研究被引量：2
- 2016年
- 目的应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用。方法以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序列调整。用免疫荧光法检测KGF活性短肽的表皮细胞亲和力。用CCK-8法检测KGF活性短肽对表皮细胞增殖的影响。用RT-PCR法和Western-blot法检测表皮细胞上特异性受体KGFR的表达水平。结果筛选噬菌体随机7肽库,获得2个与KGF相似的特异性序列,合成获得2个KGF活性短肽,并纯化至98%纯度,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记。免疫荧光检测结果显示,2个KGF活性短肽均能够与表皮细胞相结合。CCK-8检测结果显示,与阴性对照组相比,2个KGF活性短肽能够促进表皮细胞增殖,并呈浓度依赖性。RT-PCR和Western-blot检测结果显示,2个KGF活性短肽组中表皮细胞表达KGFR增强。结论从噬菌体随机7肽库中筛选到2个KGF的关键序列,合成的2个KGF活性短肽能够与KGFR相结合,并增强KGFR的表达,从而促进表皮细胞增殖,有望应用于促进创面愈合。
- 宗宪磊陆海滨祁佐良李国菊宋国栋都乐靳小雷姜笃银
- 关键词：角质细胞生长因子表皮细胞创面愈合
- 表皮细胞表达胚胎性角蛋白与创伤不同修复结局的关系
- 2009年
- 目的探讨特征性细胞角蛋白（CKs）在表皮组织的分布特征和变化规律及其与创伤修复不同结局的关系。方法对人假上皮瘤样增生（PEH）、瘢痕疙瘩（Ke）、增生性瘢痕（HS）和正常皮肤（NS）标本，采用组织病理学和免疫组织化学（IHC）双染色标记技术进行对比研究，观察CKs在表皮组织的分布特征和变化规律，并进行统计学分析。结果NS组表皮不表达CK8＆18和CK17。在活动期PEH、Ke和HS表皮组织中存在数量不等的CK8＆18^＋细胞和CK17^＋细胞，含量高低依次为PEH〉Ke〉HS和HS〉Ke〉PEH（P〈0．05），CK19^＋和CK5＆6^＋细胞有相似的变化趋势，而CK10^＋细胞则呈相反的变化趋势，在局部观察到相应的表皮超常增生、细胞形态改变和表皮下炎症反应。结论活动期PEH、Ke和HS表皮细胞存在程度不同的去分化和终末分化失衡，提示表皮细胞异常增殖和分化与创伤修复不同结局有关。
- 魏欣净姜笃银宗宪磊付小兵盛志勇王魏单菲
- 关键词：细胞角蛋白细胞分化
- 深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律被引量：1
- 2009年
- 目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块。采用免疫组织化学双染色法，观察细胞角蛋白10（CK10）、CK14、CKl9、bcl-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汁腺分泌部上皮细胞中的表达情况。结果正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10，基底层肌上皮细胞做弱表达P63和CK14，CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63。浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中，其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常。深Ⅱ度烧伤后7d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强；伤后8～10d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状七皮化，形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构，并随肉芽组织向创面浅层迁移，经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化。深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30d，超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63。结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖，这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一。
- 姜笃银宗宪磊付小兵王魏单菲
- 关键词：汗腺上皮细胞干细胞转分化
