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天津市科技支撑计划重点项目(09ZCKFSH00900)
作品数:
1
被引量:4
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段静静
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2012
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柱前衍生化高效液相色谱法测定酶法拆分的DL半-胱氨酸含量
被引量:4
2012年
建立了以1-氟-2,4-二硝基苯基-5-L-丙氨酰胺(FDAA)为手性衍生化剂、高效液相色谱法测定半胱氨酸对映异构体含量的方法.采用Inertex-C18色谱柱,以乙腈-水(含0.1%TFA)为流动相进行梯度洗脱,L-半胱氨酸、D-半胱氨酸分别在(2.50~20)mmol/L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.998 3和0.998 4);其平均回收率分别为100.1%(RSD=0.67%)和99.6%(RSD=0.92%).利用上述方法对重组表达的L-半胱氨酸脱巯基酶拆分DL-半胱氨酸外消旋体混合物进行考察和优化,最终得到纯度为99.5%的D-半胱氨酸,回收率为55.54%.
段静静
彭佳敏
曹美荣
李鸣
侯洁
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柱前衍生化
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