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国家自然科学基金(300300160)
作品数:
1
被引量:1
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卢燕雯
林善锬
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丁峰
朱秋毓
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2008
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新型氧化应激标志物AOPPs的体外制备标准化和检测
被引量:1
2008年
目的研究次氯酸氧化的人血清白蛋白(human serum albumin-advanced oxidative protein products,HSA-AOPPs)的制备标准化、次氯酸的清除以及微量HSA-AOPPs的检测。方法于搅拌条件下在HSA(60mg/mL)内滴加次氯酸至终浓度为60mmol/L即制得HSA-AOPPs。透析法或层析法清除次氯酸。碘量法测定次氯酸残留量。微量HSA-AOPPs的测定采用高效凝胶色谱法(HP-SEC),曲线下面积(AUC)用于定量计算。结果恒定的次氯酸加入量对HSA-AOPPs的产量非常关键。当次氯酸和HSA两者克分子浓度之比为1∶66左右时最为理想。过量次氯酸可导致高分子量AOPPs的破坏,大量蛋白碎片产生。层析法清除次氯酸残留优于透析法。色谱法检测AOPPs的灵敏度比分光光度法要高100倍以上。结论AOPPs的标准化制备关键在于恒定次氯酸对HSA的克分子比值。HP-SEC方法可用于微量AOPPs的测定。
卢燕雯
朱秋毓
丁峰
顾勇
林善锬
关键词:
人血清白蛋白
高级氧化蛋白产物
氧化修饰
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