教育部留学回国人员科研启动基金(2002SWXSBJBC22)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：殷志敏刘顺谊刘俊红赵宁伟贾晓鹤更多>>
- 相关机构：南京师范大学安徽师范大学更多>>
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 乳糖诱导大肠杆菌中重组谷氨酰胺合成酶的表达被引量：6
- 2006年
- 以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,G lutam ine Synthetase,GS EC 6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7 lac启动子控制的重组目的产物蛋白的表达规律进行了优化研究,分别比较了最佳诱导起始生长量、所需乳糖的浓度、诱导持续时间、补加乳糖和氨苄青霉素及不同培养基等参数对重组产物表达的影响.实验结果表明,对于T7 lac启动子控制的重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到很好的诱导表达效果,诱导产物的表达量、可溶性及酶活与IPTG诱导产物基本接近.本研究结果为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌谷氨酰胺合成酶工业化生产提供了一定的参考依据.
- 刘俊红刘顺谊殷志敏
- 关键词：谷氨酰胺合成酶原核表达乳糖IPTG
- 国产717阴离子树脂对酶法合成L-谷氨酰胺的分离与纯化被引量：2
- 2008年
- 目的:从酶法反应液中分离和纯化谷氨酰胺,并为工业化生产谷氨酰胺提供一定的依据;方法:根据谷氨酸和谷氨酰胺电离常数的差异,采用国产717强碱性阴离子Cl-型拄,经预处理,离交分离,浓缩结晶,75%乙醇洗涤并干燥;结果:反应液中谷氨酰胺总提取收率为60.3%,纯度为97%;结论:此方法能有效地降低纯化的成本,并维持较高得率和纯率。
- 赵宁伟胥俊峰贾晓鹤殷志敏
- 关键词：谷氨酰胺离子交换纯化
- 重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达被引量：2
- 2007年
- 以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.
- 刘顺谊殷志敏
- 关键词：谷氨酰胺合成酶原核表达
