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国家重点基础研究发展计划(2011CB100804)

作品数:33 被引量:127H指数:6
相关作者:李庆章高学军赵圣国卜登攀王加启更多>>
相关机构:东北农业大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所扬州大学更多>>
发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>

文献类型

  • 33篇中文期刊文章

领域

  • 19篇农业科学
  • 12篇生物学
  • 2篇轻工技术与工...
  • 2篇环境科学与工...
  • 1篇化学工程
  • 1篇医药卫生

主题

  • 19篇奶牛
  • 11篇细胞
  • 9篇牛乳
  • 9篇奶牛乳腺
  • 8篇乳腺
  • 8篇乳腺上皮
  • 8篇乳腺上皮细胞
  • 8篇上皮
  • 8篇上皮细胞
  • 6篇瘤胃
  • 5篇牛乳腺上皮细...
  • 5篇腺上皮
  • 5篇腺上皮细胞
  • 5篇奶牛乳腺上皮...
  • 4篇牛瘤胃
  • 4篇微生物
  • 4篇奶牛瘤胃
  • 4篇基因
  • 3篇蛋白
  • 3篇乳品质

机构

  • 20篇东北农业大学
  • 8篇中国农业科学...
  • 2篇哈尔滨师范大...
  • 2篇扬州大学
  • 1篇河北北方学院
  • 1篇东北林业大学
  • 1篇吉林大学
  • 1篇内蒙古民族大...
  • 1篇中国科学院
  • 1篇中华人民共和...

作者

  • 16篇李庆章
  • 13篇高学军
  • 8篇赵圣国
  • 7篇卜登攀
  • 7篇王加启
  • 6篇黄建国
  • 6篇孙鹏
  • 5篇周凌云
  • 4篇骆超超
  • 4篇卢玉飞
  • 3篇赵锋
  • 3篇金迪
  • 3篇刘畅
  • 3篇崔英俊
  • 3篇乔彬
  • 2篇潘洪宝
  • 2篇陆黎敏
  • 2篇毕微微
  • 2篇王丹丹
  • 2篇林叶

传媒

  • 5篇乳业科学与技...
  • 4篇中国乳品工业
  • 4篇中国农业科学
  • 3篇东北农业大学...
  • 3篇Journa...
  • 2篇中国生物化学...
  • 2篇中国畜牧兽医
  • 2篇Journa...
  • 1篇中国微生态学...
  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇生物学杂志
  • 1篇微生物学通报
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇动物营养学报
  • 1篇电子显微学报
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 2篇2016
  • 3篇2015
  • 4篇2014
  • 6篇2013
  • 13篇2012
  • 5篇2011
33 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
奶牛不同发育时期乳腺组织LAT1和4F2hc的表达被引量:3
2011年
为研究氨基酸转运载体LAT1的表达与奶牛乳腺发育的关系,应用免疫荧光技术和免疫印迹方法,检测奶牛乳腺组织中LAT1及其辅助蛋白4F2hc表达的情况。结果表明,LAT1和4F2hc共表达于乳腺导管或腺泡的基底侧和顶膜侧;且泌乳期LAT1蛋白表达显著高于其他发育时期,4F2hc蛋白表达量在围产前期达到峰值,泌乳期4F2hc蛋白的表达量恢复至妊娠中期水平。结论:LAT1及4F2hc均特异性表达于不同发育时期奶牛乳腺组织中,提示LAT1参与了奶牛乳腺的发育和泌乳的调控。
冯丽丽林叶李庆章
关键词:奶牛乳腺
不同泌乳相关激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响被引量:13
2012年
本研究旨在探讨不同泌乳相关激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响及其与细胞外基质主要成分层黏连蛋白的关系。将正常的荷斯坦泌乳期奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,在未包被或包被层黏连蛋白的条件下,以MTT法检测催乳素(PRL)、牛生长激素(GH)、类胰岛素生长因子-1(IGF-Ⅰ)、类胰岛素生长因子-2(IGF-Ⅱ)对细胞增殖作用的影响。在层黏连蛋白包被条件下,进行血清恢复的同时添加不同泌乳相关激素和生长因子,GH、IGF-Ⅰ有促进细胞增殖的作用(P<0.05),PRL、IGF-Ⅱ有维持细胞存活的作用(P<0.05);无血清时,几种激素和生长因子单独添加均无明显促增殖效应(P>0.05)。无基质条件下,与血清联合使用时,PRL、GH、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ均对细胞生长有不同程度促进作用(P<0.05);无血清时,仅IGF-Ⅰ使细胞增殖速率显著加快(P<0.05)。层黏连蛋白作为培养基质对于体外培养的泌乳乳腺上皮细胞生长速度没有显著促进作用,但有利于PRL和IGF-Ⅱ发挥促存活作用。PRL、GH、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ对细胞增殖和存活有促进作用,但需要与血清中其他成分协同才能充分发挥作用,其中IGF-Ⅰ促增殖能力最强。
刘畅赵锋李庆章
关键词:催乳素牛生长激素层黏连蛋白奶牛乳腺上皮细胞
麦蓝菜对奶牛产奶量及乳成分的影响被引量:2
2012年
选用15头体质量、胎次、产奶量均相近中国荷斯坦奶牛,随机分为A、B、C三组(n=5):A组(对照组)饲喂基础日粮;B组(试验组1)饲喂基础日粮+50 g麦蓝菜种子;C组(试验组2)饲喂基础日粮+150 g麦蓝菜植株。试验周期24 d,每天测定各组奶牛产奶量及乳成分,研究麦蓝菜对奶牛产奶量及乳成分的影响。结果表明:B组较A组产奶量提高了15.56%(P<0.01),牛奶乳蛋白和干物质分别提高了11.9%和5.1%(P<0.01),乳脂率提高了9.4%(P<0.05),A、B两组间乳糖含量差异不显著;C组较A组产奶量提高了3.48%(P<0.01),牛奶乳蛋白和干物质体分别提高了6.3%和4.9%(P<0.01),乳脂率和乳糖分别提高了9.1%和6.6%(P<0.05)。研究表明,基础日粮中添加麦蓝菜植株和种子均可以显著提高奶牛产奶量和乳品质。
袁肖寒顾成波孟海洋张彦东高学军
关键词:产奶量乳成分
小G蛋白Ran对奶牛乳腺上皮细胞mTOR和Jak2/Stat5信号通路的影响被引量:2
2015年
为探讨小G蛋白Ran对β-酪蛋白合成的主要信号通路mTOR和Jak2/Stat5及其增殖的影响,本研究对Ran进行瞬时转染和稳定转染,Western blot检测细胞中mTOR、p-mTOR、Stat5和p-Stat5的表达;高压液相层析仪检测酪蛋白的分泌量;CASY细胞活力分析仪分析细胞活力。结果显示,Ran过表达时,细胞活力显著增加(P<0.01),细胞中mTOR、p-mTOR、Stat5和p-Stat5的表达均也显著增加(P<0.01);表明Ran可能激活细胞中的mTOR通路和Jak2/Stat5通路,对乳腺上皮细胞的泌乳与增殖有正向调节作用。
吴迪骆超超黄建国刘静高学军刘玉芬
关键词:RAN奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白
IGF-Ⅰ在奶牛乳腺的表达及其对乳腺上皮细胞泌乳功能的影响被引量:10
2012年
为研究IGF-Ⅰ表达和奶牛乳腺发育与泌乳之间的关系,采用qRT-PCR检测奶牛乳腺组织中IGF-Ⅰ的表达情况,应用细胞培养、qRT-PCR、MTT法检测IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞的影响。结果显示,在青春期奶牛乳腺组织中IGF-Ⅰ的表达量最高;添加IGF-Ⅰ后,乳腺上皮细胞IGF-ⅠR表达增加,细胞增殖能力提高,β-酪蛋白表达增加。研究结果表明,IGF-Ⅰ可通过促进IGF-ⅠR的表达,从而促进乳腺上皮细胞增殖和提高乳中β-酪蛋白含量。
张童非崔英俊李庆章
关键词:奶牛泌乳
用于双向凝胶电泳分析的奶牛乳清蛋白样品制备方法的比较被引量:4
2011年
为建立适用于双向凝胶电泳分析的奶牛乳清蛋白的制备方法,分别比较了直接裂解法、三氯乙酸-丙酮法,Trizol法和2-D clean up kit法对奶牛乳清蛋白提取效率和双向凝胶电泳图谱的影响.用2-D Quant Kit试剂盒测定蛋白浓度,分别用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向凝胶电泳进行奶牛乳清蛋白的分离.蛋白定量结果表明,2-D clean up kit法产率最高,直接裂解法、三氯乙酸-丙酮法次之,trizol法产率最低;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,2-D clean up kit法提取的蛋白质量最高;双向电泳图谱分析表明,2-D clean up kit法得到的蛋白图谱与另外3种方法相比,检测到的蛋白点最多,图谱背景清晰,分辨率最高.结果提示,2-D clean-up法相对最适合于双向凝胶电泳分析奶牛乳清蛋白样品的制备,尤其对一些低丰度高分子量蛋白的分离效果较为明显.
边艳杰李庆章张岚郭洪波吕英
关键词:奶牛乳清蛋白双向凝胶电泳
14-3-3γ蛋白协同mTOR信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞生理功能被引量:1
2015年
14-3-3γ作为蛋白质与蛋白质之间的"桥梁蛋白",广泛参与细胞凋亡、细胞分裂、信号转导和蛋白质合成等生物体所有的重要生命活动的调节。以体外培养的荷斯坦奶牛(Vaccas)乳腺上皮细胞(dairy cow mammary gland epithelial cells,DCMECs)为模型,研究14-3-3γ对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂合成的影响。瞬时和稳定转染p GCMV/IRES/EGFP/14-3-3γ即14-3-3γ过表达的奶牛乳腺上皮细胞,应用CASY细胞活力分析仪分析细胞活力的变化,测定细胞中甘油三脂(triglyceride,TG)和β-酪蛋白(β-Casein,CSN2)的合成,并且通过Western blot检测DCMECs中m TOR(mammalian target of rapamycin,m TOR)和p-m TOR的表达量,探究14-3-3γ影响奶牛乳腺上皮细胞生理功能的机制。结果显示,瞬时和稳定转染p GCMV/IRES/EGFP/14-3-3γ的奶牛乳腺上皮细胞相对正常培养的奶牛乳腺上皮细胞,细胞活力极显著增强(P<0.01),CSN2和TG表达量极显著增加(P<0.01),同时m TOR和p-m TOR的表达量也显著增加(P<0.01)。研究结果表明14-3-3γ参与泌乳关键信号通路即m TOR信号通路,能够增强乳腺上皮细胞活力,促进奶牛乳腺上皮细胞CSN2和TG的合成,丰富了奶牛泌乳信号通路,为乳品质研究提供了新的理论依据。
刘静骆超超黄建国吴迪高学军刘玉芬
关键词:奶牛乳腺上皮细胞MTOR信号通路
高赖氨酸蛋白基因Cflr在枯草芽孢杆菌中表达被引量:2
2013年
赖氨酸作为家畜限制性必需氨基酸,其饲料含量直接影响到家畜蛋白质合成。试验利用基因工程方法,从辣椒花药中克隆出高Lys蛋白基因(Cflr),与载体pHT43构建成重组表达质粒,将其转入枯草芽孢杆菌中,IPTG诱导表达,基因在mRNA水平有表达,SDS-PAGE中出现一条明显的蛋白条带,大小为24 ku;经HPLC检测赖氨酸含量,重组菌赖氨酸含量比野生型菌株提高16.05%。该重组菌为以后其作为饲料添加剂进一步应用提供技术基础。
武彩霞高学军李庆章骆超超毕微微史琳琳张莉
关键词:枯草芽孢杆菌
奶牛乳腺组织RPS6KB1基因启动子甲基化分析被引量:4
2013年
DNA甲基化是目前生命科学领域的研究热点之一,DNA甲基化在维持细胞功能、遗传印记、个体生长发育中起着重要作用.本研究采用亚硫酸氢盐测序(BSP)技术检测了不同发育时期奶牛乳腺组织及不同乳品质泌乳期奶牛乳腺组织RPS6KB1启动子的甲基化特征,实时荧光定量PCR检测RPS6KB1基因mRNA差异表达.实验结果显示,在RPS6KB1基因启动子内存在CpG及非CpG的甲基化模式,其中泌乳期奶牛之间甲基化水平相似,妊娠期奶牛甲基化程度高于泌乳期奶牛.荧光定量结果显示不同发育时期,RPS6KB1基因mRNA水平表达差异显著(P<0.05),而两组泌乳期奶牛之间差异不显著(P>0.05).说明RPS6KB1的表达受到其启动子甲基化的调控,非CpG甲基化模式可能具有与CpG甲基化模式相似的生物学功能,参与RPS6KB1的表达调控.
郑宜文王春梅高学军王小艳李庆章
关键词:DNA甲基化
Proteomic Analysis of Nuclear Phosphorylated Proteins in Dairy Cow Mammary Epithelial Cells Treated with Prolactin
2013年
Prolactin (PRL) is a versatile signaling molecule and regulates a variety of physiological processes, including mammary gland growth and differentiation and the synthesis of milk proteins. While PRL is known to be necessary for high levels of milk protein expression, the mechanism by which the synthesis of milk proteins is stimulated at the transcript level is less known. A major modification in the transcript level is protein phosphorylation. To gain additional insights into the molecular mechanisms at the transcript level underlying PRL action on the dairy cow mammary epithelial cells (DCMECs), nuclear phosphoproteins whose expression distinguishes proliferating regulated by PRL in DCMECs were identified. A phosphoprotein-enriched fraction from nuclear proteins was obtained by affinity chromatography, and a two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and matrix assisted laser desorption/ionization time of matrix-assisted laser desorption/ionization/time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) were used to identify the changes of nuclear phosphoproteins in DCMECs treated with prolactin. Seven proteins displaying~〉2-fold difference in abundance upon PRL treatment in DCMECs were identified by MALDI-TOF MS. The protein-GARS (GlyRS), which belonged to the class-II aminoacyl-tRNA synthetase family, played a global role in the milk protein synthesis. SERPINH1 (Heat shock protein 47), which was the first heat shock protein found to be a member of the serpin superfamily, regulated physiologic functions, such as complement activation, programmed cell death, and inflammatory processes. PRDX3, which belonged to a family of antioxidant enzymes, played an important role in scavenging intracellular reactive oxygen species (ROS). ACTR1A, belonged to the actin family, which was associated with transport of p53 to the nucleus. Annexin A2, a Ca2+-dependent phospholipid-binding protein, maintained the viability and cell cycle regulation of DCMECs. PSMB2 and PSMD10, which belonged to ubiquitin-prot
Huang Jian-guoLu Li-minQiao BinLiu RongWang Jia-liPan Hong-baoLi Qing-zhangGao Xue-jun
关键词:PROLACTIN2-DE
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