山东省科技攻关计划(2008GG10002022)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：李艳平肖伟玲唐金宝林志娟梁淑娟更多>>
- 相关机构：潍坊医学院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- ZZ亲和肽在大肠杆菌中的表达及IgG抗体亲和活性测定被引量：2
- 2011年
- 目的:ZZ亲和肽是源于葡萄球菌蛋白A的人工合成序列,能结合IgG抗体Fc段,在免疫学领域具有广泛的应用价值。本研究利用大肠杆菌表达C端带有6×His标签的ZZ亲和肽,并测定其生物学活性。方法:以pEZZ18为模板PCR扩增ZZ亲和肽基因,克隆至pUC18载体的EcoRⅠ/HindⅢ位点构建pUC-ZZ表达载体。利用大肠杆菌表达C端带有6×His的ZZ亲和肽,表达产物经Ni亲和层析纯化,利用竞争ELISA测定其与IgG抗体的亲和活性。结果:成功构建pUC-ZZ表达载体,SDS-PAGE显示ZZ亲和肽的Mr为16×103,与兔IgG抗体相对亲和常数为Ka≌1.45×108L/mol。结论:ZZ亲和肽基因成功在大肠杆菌中表达,具有与IgG抗体结合活性,为ZZ亲和肽的进一步开发利用奠定了基础。
- 李艳平唐金宝林志娟肖伟玲梁淑娟
- 关键词：大肠杆菌活性测定
