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bFGF-MAb抑制卵巢癌细胞及其腹腔移植瘤生长的实验研究被引量：4: 2003年; 目的　观察碱性成纤维细胞生长因子的单克隆抗体 b FGF- MAb对人卵巢癌细胞的增殖、卵巢癌腹腔移植瘤裸鼠的生存率和肿瘤血管生成的影响 ,为卵巢癌的临床生物治疗提供实验基础。方法　 1将人卵巢癌细胞株 SKOV3接种于 2 4孔板 ,加入不同浓度的 b FGF- MAb,每日行结晶紫染色、Vector2 - 14 2 0多标记计数仪比色 ,测定 OD4 90 值 ;2将 SKOV3细胞接种于 BAL B/ c裸鼠腹腔形成卵巢癌腹腔移植瘤模型 ,每周 2次将 b FGF- MAb注射于腹腔 ,比较裸鼠生存时间 ;3解剖裸鼠 ,计数肠系膜上种植瘤的个数并称重 ;4对移植瘤组织进行 CD31 的免疫组化染色后测定肿瘤内微血管密度 (MVD)。结果　 1b FGF- MAb在 0～ 15 μg/ ml的范围内 ,其抑制 SKOV3细胞增殖的作用呈浓度依赖性 ,实验第 4 d,15 μg/ m l组能抑制细胞增殖的 2 4 % ;2腹腔注射 b FGF- MAb的裸鼠生存时间较对照组平均延长 10 d;3b FGF- MAb组肠系膜上肿瘤种植灶的数目和重量分别是对照组的 70 .6 %和 6 9.2 % ;4 b FGF- MAb组腹腔移植瘤 MVD是对照组的 6 2 .8%。结论　 b FGF- MAb能明显抑制卵巢癌的生长和肿瘤血管生成。; 林卫彭芝兰王光林毕建红刘珊玲王红静; 关键词：卵巢癌

组织工程化人工神经修复周围神经缺损的实验研究被引量：25: 2002年; 目的　研究雪旺细胞和生物降解支架材料复合后构建成的组织工程化人工神经修复神经缺损的效果。方法　将雪旺细胞制成 1× 1 0 8/ml的ECM (extracellularmatrix,ECM)凝胶 ,与PLA无纺纤维布复合培养 7d ,置入PLA中空纤维管中 ,构建成组织工程化人工神经。建立大鼠坐骨神经缺损 1 0mm的动物模型 ,A组为人工神经组 ;B组为雪旺细胞复合ECM凝胶组 ;C组为单纯ECM凝胶组 ;D组为自体神经移植组。术后 8周、1 2周 ,行神经电生理和组织学检测评价疗效。结果　术后 1 2周A组的再生神经纤维已越过远端缝合口 ,有髓神经纤维数和神经纤维密度稍差于D组 ,但再生神经组织的面积显著高于后者 ;A、D组的髓鞘厚度和dLAT、NCV、AMP、AREA均无显著差别 ,但明显高于B、C组。结论　雪旺细胞、ECM凝胶和PLA多孔材料与PLA中空纤维管组合后构建成的组织工程化人工神经。; 王光林杨志明林卫毕建红李胜富张杰; 关键词：组织工程化人工神经周围神经缺损

在基质材料中生长的许旺细胞:存活、黏附、三维生长和迁移特性: 2007年; 目的:将许旺细胞与细胞外基质凝胶、聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝复合培养,观察许旺细胞的存活、黏附、三维生长和迁移等生物学行为。方法:实验于2005-02/2006-03在四川大学完成。①实验材料:3～6月龄SD大鼠40只。16～24周流产胎儿由四川大学华西二医院计划生育科提供,产妇及其家属均签署知情同意书,实验经医学伦理委员会批准。聚乳酸-羟基乙酸共聚物(中国科学院成都分院化学所提供);细胞外基质凝胶(Sigma)。②实验方法:将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解,旋转抽丝法制成直径为20～40μm的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝。无菌条件下取胎儿坐骨神经,去除神经外膜,胰酶消化+差速贴壁法去除成纤维细胞,达80%融合时行BrdU标记。③实验评估:将许旺细胞离心制成0.1～0.2mm3的微粒,接种在细胞外基质凝胶中,观察许旺细胞在凝胶中的存活、生长和移行。将许旺细胞制成1×1010L-1的30%细胞外基质凝胶后,分别滴加在经过胶原、细胞外基质凝胶预处理的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝的一端,观察许旺细胞在纤维丝上的黏附、生长和迁移。将BrdU标记的许旺细胞复合细胞外基质凝胶后,置入聚乳酸纤维管用以修复大鼠坐骨神经缺损,术后3,6周取材,BrdU免疫组化染色观察许旺细胞的存活情况。结果:①许旺细胞在无血清状态下能在细胞外基质凝胶中存活,并分裂、增殖,相互移行形成类似Bungner带状的许旺细胞柱状结构。②许旺细胞能贴附在聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝上生长并沿纤维丝移行,形成多层排列的类似Bungner带状的许旺细胞柱,细胞外基质凝胶能显著增加贴附和移行细胞数量,而胶原作用不显著。③许旺细胞和细胞外基质凝胶复合移植,6周后BrdU阳性细胞数明显低于第3周(t=3.71,P<0.01),成活细胞能在细胞外基质凝胶中移行。结论:许旺细胞与细胞外基质凝胶、聚乳; 王光林裴福兴杨志明林卫毕建红高伟强; 关键词：许旺细胞神经损伤生物材料

Experimental study on the adhesion, migration and three-dimensional growth of Schwann cells on absorbable biological materials被引量：5: 2003年; OBJECTIVE: To study the adhesion, migration and three-dimentional growth of Schwann cells on PLA (polylactic acid) nonspinning fibre cloth and polyglycolic/polylactic acid (PLGA) fibres. METHODS: Schwann cells/ECM gel solution and PLA nonspinning fibre cloth and PLGA fibres pretreated by collagen, polylysine and ECM were co-cultured. Then the migration and three-dimensional growth of Schwann cells on the fibres were observed under phase contrast microscope and laser scanning confocal microscope. RESULTS: Schwann cell/ECM solution was compounded with PLA nonspinning fibre cloth. With formation of gel, most Schwann cells resided in the fibre net holes, and adhered to the fibres to form a multiplayer-arranged Schwann cell column like Bungner band. Schwann cells could adhere to PLGA fibres and grew and migrated along the fibres. ECM gel could significantly increase the adhering and migrating cell number. CONCLUSIONS: ECM gel can facilitate the adhesion, growth and migration of Schwann cells on the seteroframe. It is a good integrating material for tissue engineering bioartificial nerve.; 王光林林卫杨志明裴福兴刘雷

bFGF单克隆抗体对卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用被引量：15: 2005年; 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在卵巢上皮性肿瘤中的表达强度与肿瘤血管生成之间的关系,及其单克隆抗体bFGFMAb对人卵巢癌移植瘤血管生成和肿瘤生长的影响。方法:(1)应用免疫组化法和图像分析系统研究bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达部位和强度;以及bFGF的表达强度与肿瘤新生血管的关系;(2)利用卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,每周2次将不同浓度的bFGFMAb注射于瘤体周围,连续8周,每周测量肿瘤体积,绘制移植瘤生长曲线;对移植瘤组织行Ⅷ因子的免疫组化染色,测定肿瘤内微血管密度(MVD)。结果:(1)bFGF主要在卵巢上皮性肿瘤细胞浆内表达,在交界性和恶性肿瘤中,部分细胞同时存在核表达;bFGF在正常卵巢组织,良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达强度逐步增强,同时MVD逐步增高,二者呈正相关(P<0.001);(2)30、20、10μgbFGFMAb组移植瘤体积分别是对照组的31.34%、49.20%和71.25%,MVD分别是对照组的27.80%、52.37%和81.86%(P<0.05),其作用呈浓度依赖性。结论:bFGFMAb能明显抑制卵巢癌的血管生成和肿瘤生长,有望成为卵巢癌生物治疗的新方法。; 林卫杨延林彭芝兰黄仲英王光林; 关键词：卵巢肿瘤碱性成纤维细胞生长因子血管生成抑制剂

许旺细胞在支架材料中的三维生长与迁移的研究被引量：8: 2003年; 目的　研究许旺细胞在聚乳酸 (PLA)无纺纤维布及聚羟基乙酸 (PLGA)纤维丝上的粘附、三维生长及迁移情况。　方法　将许旺细胞 /ECM凝胶悬液与PLA无纺纤维布及经胶原、多聚赖氨酸和ECM预处理的PLGA纤维丝复合培养 ,相差和激光扫描共聚焦显微镜观察许旺细胞在纤维丝中的三维生长和迁移。　结果　许旺细胞 /ECM悬液 ,与PLA无纺纤维布复合 ,随着凝胶的形成 ,大部份许旺细胞滞留在纤维网孔中 ,多数细胞和纤维丝贴附 ,形成多层排列的类似B櫣ｎｇｎｅｒ带状的许旺细胞柱硗赴芴皆赑LGA纤维丝上生长并沿纤维丝移行 ,ECM凝胶能显著增加贴附和移行细胞数量。　结论　ECM凝胶能促进许旺细胞在支架中的黏附、生长与迁移 ,是构建组织工程化人工神经的良好整合材料。; 王光林林卫杨志明毕建红李胜富张杰; 关键词：许旺细胞聚乳酸聚羟基乙酸

雪旺细胞复合细胞外基质凝胶移植对神经元逆行性死亡保护作用的研究被引量：12: 2002年; 目的　雪旺细胞 (SC)和细胞外基质 (ECM)凝胶复合 ,修复周围神经缺损 ,研究 SC的成活和对背根神经节内神经元逆行性死亡的保护作用。　方法　 1将 SC制成 1× 10 8/ ml的 ECM凝胶后 ,置入 PL A中空纤维管中 ,修复大鼠 10 mm坐骨神经缺损 ,以单纯 ECM凝胶组和生理盐水组作为对照。术后 8、 12周 ,组织学检测 ,评价其效果。 2将Brd U标记的 SC复合 ECM凝胶后 ,置入 PL A中空纤维管中 ,修复大鼠坐骨神经缺损 ,术后 3、6周取材 ,Brd U免疫组织化学染色 ,观察 SC存活情况。　结果　 1SC和 ECM凝胶复合移植 ,多数细胞可存活至 3周 ,部分细胞可存活至 6周。2 SC和 ECM凝胶复合组、ECM凝胶组 ,L5背根神经节内成活的神经元数量分别是健侧的 83.5 %和 81.3% ,显著高于单纯生理盐水组的 72 .9% (P<0 .0 5 )。　结论　 SC和 ECM凝胶复合移植 ,多数细胞能成活并能使背根神经节内 83.5; 王光林杨志明林卫毕建红李胜富张杰; 关键词：雪旺细胞细胞外基质神经元周围神经损伤神经再生

碱性成纤维细胞生长因子与卵巢癌的关系被引量：6: 2003年; 目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor,b FGF)对卵巢癌细胞增殖、浸润和肿瘤血管生成的影响 ,及 b FGF单克隆抗体 (b FGF monoclonal antibody,b FGF- MAb)的治疗作用。　方法　将人卵巢癌细胞株 SKOV3接种于 2 4孔板 ,加入不同浓度的 b FGF,每日行结晶紫染色后测定光密度 (D4 90 )值 ,绘制细胞生长曲线 ;将 SKOV3细胞团接种于铺设有细胞外基质凝胶的 4孔板 ,每日测定癌细胞在凝胶中的浸润距离 ;建立 SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤模型 ,每周两次分别将 b FGF、b FGF-MAb和生理盐水注射于移植瘤周围 ,8周后测量肿瘤体积 ;对移植瘤组织切片行因子的免疫组化染色、测定肿瘤内微血管密度 (microvessel density,MVD)。　结果　 b FGF能促进 SKOV3细胞增殖并呈浓度依赖 ,实验第 5天 ,5 ng/ml、10 ng/ml组细胞 D4 90 值是对照组的 1.0 9倍和 1.2 1倍 ;b FGF能促进 SKOV3细胞浸润并呈浓度依赖 (P<0 .0 5 ) ,第 7天 ,5 ng/ml、10 ng/ml组细胞浸润距离分别是对照组的 1.5 3倍和2 .4 5倍 ;b FGF组移植瘤体积和 MVD分别是对照组的 1.80倍和 1.4 6倍 (P<0 .0 5 ) ,b FGF- MAb组移植瘤体积和 MVD分别是对照组的 6 3.7%和 6 2 .8% (P<0 .0 5 )。　结论　b FGF能明显促进卵巢癌细胞的增殖、?; 林卫彭芝兰郑艾毕建虹黄仲英; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子卵巢癌肿瘤细胞增殖肿瘤浸润肿瘤血管生成

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国家自然科学基金(30100190)

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