陕西省教育厅省级重点实验室科研与建设计划项目(12JS105)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 发文基金：陕西省教育厅省级重点实验室科研与建设计划项目国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>
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- 转mgfp-5基因烟草的愈伤诱导及培养被引量：2
- 2017年
- 海洋软体动物贻贝(Mytilidae)足丝腺分泌的贻贝粘蛋白(mussel adhesive protein,MAP)即贻贝足丝蛋白(mussel foot protein,Mfp),不仅有水中高粘性及耐腐蚀性,而且无毒、无免疫原性,生物相容性好,其中Mfp-5粘性最强。现用的贻贝粘蛋白主要是天然获取,但是其含量低易固化难获得,基因工程重组贻贝粘蛋白的研究刚刚开始。前期我们在烟草中表达了地中海贻贝蛋白(mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)基因,得到转mgfp-5基因烟草种子。本实验将转基因T1代种子无菌苗进行愈伤组织诱导,在附加不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA的MS培养基上,诱导率≥90.0%,其中2,4-D 1.0 mg/L、6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L时诱导率为100%;愈伤组织固/液培养过程中均以"S"型曲线生长,固体培养时12~27 d鲜质量增长率为3.73%,液体培养时间缩短6 d,在6~15 d时间内鲜质量会增加8.56~8.63倍;固/液培养的继代愈伤组织,PCR、RT-PCR及Western blotting分别检测到预期大小的电泳条带,显示了外源mgfp-5基因及Mgfp-5蛋白稳定表达。稳定表达Mgfp-5蛋白的愈伤组织,可以为获得重组蛋白Mgfp-5的原材料提供新途径,为研究植物表达贻贝粘蛋白提供参考。
- 王英娟王睿劼吕亚维张雨靖杨泽熵
- 关键词：转基因烟草
- 贻贝粘蛋白Mgfp-5基因在烟草中的转化被引量：4
- 2016年
- 贻贝(Mytilus galloprovincialis)足腺分泌的粘蛋白Mgfp-5,是一种粘合强度高、生物相容性好的生物粘合剂,可以广泛应用于医学、化学表面以及海洋工程等领域。天然获取Mgfp-5时易固化且含量低,难获得、成本高制约了其应用,所以更多学者尝试基因工程方法获得粘蛋白Mgfp-5,其中鲜见借助植物基因工程表达Mgfp-5的报道。本研究构建携带Mgfp-5基因的植物表达载体p RI101-Mgfp,以秦烟95烟草叶片为受体,通过根癌农杆菌LBA4404介导方法,遗传转化外植体,历经转染、抗性筛选及分子生物学鉴定,获得转基因烟草植株。研究表明正确构建的植物表达载体p RI101-Mgfp,可以在外植体预培养3 d,农杆菌菌液OD600=0.6,侵染10 min,共培养3 d,20 mg/L卡那霉素抗性筛选培养的条件下,携带外源Mgfp-5基因,顺利转化进入烟草小苗,经过PCR、RT-PCR检测目标基因Mgfp-5在转化小苗基因组中可以整合及表达,得到转Mgfp-5基因烟草植株,生根后移栽成活。本研究为粘合蛋白Mgfp-5的表达、提取纯化及功能等深入研究提供参考,也是优质粘合剂粘合蛋白材料获得的一条新途径。
- 吕玉伟张雨靖吕亚维王睿劼杨泽熵王英娟
- 关键词：根癌农杆菌烟草
- 一种培养产油微藻的新型气升式光生物反应器设计被引量：5
- 2013年
- 通过对光生物反应器原理的研究,结合微藻的生境需求,改进已有气升式光生物反应器为一种高能效的新型气升式光生物反应器。新型气升式光生物反应器具有高效利用光能和二氧化碳、利用余热节约能源、易工程放大实现规模培养的特点。适用于大规模藻类细胞培养和藻类生物柴油的生产。
- 杨泽熵李鑫王英娟
- 关键词：气升式光生物反应器
