国家自然科学基金(81071690)
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
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- 胃癌相关下调基因在胃癌及癌前病变中的表达及其意义被引量：10
- 2014年
- 目的观察胃癌相关下调基因(GDDR)在胃癌及癌前病变中的表达变化,探讨GDDR在胃黏膜癌变过程中的作用和意义。方法应用免疫组化SP法测定经胃镜活检和病理确诊的40例正常胃黏膜组织,40例慢性浅表性胃炎,40例慢性萎缩性胃炎,40例胃的肠上皮化生,20例轻度异型增生,20例重度异型增生和40例胃癌中的GDDR蛋白表达情况。结果从正常胃黏膜组织、慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃肠上皮化生、轻度异型增生、重度异型增生、胃癌的发展过程中,GDDR蛋白表达逐渐下调(平均秩次分别为190.70、182.70、146.24、104.40、70.33、47.20和40.20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GDDR表达下调发生在胃癌形成早期,提示GDDR在胃癌的早期诊断和治疗中起重要作用,有望成为胃癌早诊的分子标记物和分子治疗的新靶点。
- 赵占伟方诚王飞双剑博王刚华谨杜建军
- 关键词：胃肿瘤癌前病变免疫组化
- GDDR位点突变载体的构建和稳转细胞系的建立
- 2012年
- 目的构建GDDR位点突变载体,使GDDR翻译蛋白无法通过二硫键与TFF1结合,建立稳定转染GDDR位点突变载体的人胃癌SGC-7901稳转细胞系。方法设计GDDR Cys38位点突变引物,构建GDDR位点突变的真核表达载体;脂质体法转染重组质粒至人胃癌细胞系SGC-7901;G418筛选阳性细胞并扩大培养;实时定量PCR检测突变GDDR mRNA在人胃癌细胞系SGC-7901的表达。结果经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列;实时定量PCR证实突变GDDR在人胃癌SGC-7901稳转细胞系高表达。结论 GDDR定点突变载体构建成功,建立了稳定转染GDDR位点突变载体的SGC-7901细胞系,为进一步研究GDDR的结构和功能提供了条件。
- 方诚双剑博祁胜宾韩亚楠王飞赵占伟杜建军
- 关键词：点突变转染
- GDDR对5-FU诱导下胃癌细胞凋亡的影响
- 2014年
- 目的:通过5-FU诱导人胃癌细胞系SGC-7901凋亡,研究GDDR在胃癌细胞凋亡中的作用。方法:利用已构建成功的SGC-7901-GDDR和SGC-7901-pcDNA3.1稳定转染细胞系,在5-FU诱导下促进其凋亡发生,流式细胞术和Western blot检测以上两种细胞系中凋亡发生率和Caspase-3表达及活化程度。结果:未加药组中SGC-7901-GDDR和SGC-7901-pcDNA3.1凋亡发生率无统计学意义,且两者均未观察到活化型Caspase-3表达。加药组中SGC-7901-GDDR凋亡发生率显著高于SGC-7901-pcDNA3.1,且活化型Caspase-3表达前者显著高于后者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:GDDR可通过上调活化型Caspase-3的表达促进SGC-7901细胞凋亡,提示凋亡可能也是GDDR抑癌途径之一,并因此可能在胃肠道肿瘤治疗中发挥作用。
- 王飞方诚赵占伟王刚双剑博华瑾杜建军
- 关键词：细胞凋亡CASPASE-3胃癌
- 腹腔镜下胃癌淋巴结清扫及重建162例研究被引量：5
- 2013年
- 目的探索与研究胃癌腹腔镜下清扫及重建技术。方法回顾性分析2009年7月至2012年11月收治的162例腹腔镜下D2清扫及重建患者的临床资料,统计分析其手术时间、手术出血量、淋巴结清扫个数及并发症发生率等多项指标。结果本组162例患者中160例成功实施胃癌腹腔镜下D2清扫及重建,2例中转开腹,其中73例行远端胃切除,89例全胃切除,无术中死亡发生。平均手术时间284(115～610)min,平均术中出血量235(80～1400)ml,平均淋巴结清扫28.3(6～57)枚;术后随访1～42个月(平均17.5个月),术后并发症率10.5%(17/162),其中主要并发症6例(3.7%),次要并发症11例(6.8%)。所有术后并发症均通过积极妥善处理后痊愈。结论胃癌腹腔镜下清扫及重建手术,有可能是胃癌患者外科治疗的一种选择。
- 王飞华瑾郑建勇李纪鹏赵青川方诚双剑博杜建军
- 关键词：胃肿瘤腹腔镜检查胃切除术胃肠吻合术
- 胃肠道特异性GDDR单克隆抗体的制备及鉴定
- 2012年
- 目的制备鼠源性GDDR单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法利用SEAL对GDDR氨基酸序列表位行参数评分,结合人、鼠蛋白序列同源性,设计并合成重组GDDR蛋白,并以所获得蛋白免疫BALB/c小鼠制备鼠单克隆抗体,运用ELISA法检测抗体效价,免疫印迹分析和免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果经常规细胞融合和筛选获得两株稳定分泌抗GDDR抗体骨髓瘤细胞株,ELISA检测腹水效价达1100000,Western-blot证实抗体可以和GDDR蛋白特异性结合,免疫组织化学结果显示正常胃黏膜组织GDDR表达明显高于胃癌组织。结论成功制备出两株抗GDDR单克隆抗体mAb,为进一步研究GDDR的生物学功能提供良好的工具。
- 方诚双剑博赵占伟王飞艾克热木玉苏甫华瑾杜建军
- 关键词：杂交瘤
