国家高技术研究发展计划(2011AA10A208)
- 作品数：45 被引量：457H指数：8
- 相关作者：童光志金宁一鲁会军孙文超仇华吉更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院上海兽医研究所吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗猪免疫试验效果评价被引量：2
- 2016年
- 目的评价欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18猪体免疫效果。方法用鉴定正确的重组腺病毒进行猪免疫试验,通过淋巴细胞亚群检测、细胞因子检测和免疫组化检测分析其免疫效果。结果猪淋巴细胞亚群检测显示重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18刺激CD4+和CD8+表达量在21d、35d、49d分别为PBS组的1.53、1.84、1.90倍和1.41、1.76、1.53倍,差异有统计学意义(P<0.05);ELISA检测pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18免疫猪血清IL-4和IFN-γ水平在14d时的表达量分别是PBS组的1.45和1.46倍(P<0.05),而在35d时分别是PBS组的1.81和1.79倍(P<0.05)。免疫组化检测免疫猪肺、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴组织病毒量相对于野毒组和PBS组显著减少。结论重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18疫苗,具有良好的免疫原性,能提高猪细胞免疫和体液免疫水平。
- 解长占曹亮孙文超张萍韩继成郭海宁肖朋朋温树波崔卓栋南福龙马海彬赵冠宇张赫庄忻雨张金勇鲁会军金宁一
- 关键词：重组腺病毒疫苗
- 两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒检测效果比较被引量：1
- 2014年
- 为研究比较国内市售两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒(ZJ-ELISA、HB-ELISA)的检测效果,以期为猪群PCV2抗体监测选择试剂盒提供参考。首先通过间接免疫荧光方法(IFA)测定44份猪血清的PCV2抗体滴度,并以此为标准,判定猪血清中PCV2抗体的阴阳性,然后利用两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒分别测定上述血清的OD值,并判定PCV2抗体阴阳性。通过计算各种试剂盒检测结果与IFA检测结果的符合率以及配对卡方检验及Kappa检验,判定最优检测试剂盒。结果表明,国内市售两种PCV2抗体检测试剂盒与IFA检测结果的总符合率均为86.36%(38/44),配对卡方检验及Kappa检验表明国产试剂盒与IFA检测结果差异不显著。
- 邢刚邱小伙阮系真金玉兰
- 2015年广西地区PRRSV流行株ORF5和Nsp2基因分子流行病学调查被引量：3
- 2017年
- 目的对广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2和ORF5基因进行分子流行病学调查。方法采集广西地区猪病料样品45份,PCR扩增PRRSV毒株Nsp2和ORF5基因并进行遗传进化分析。结果 RT-PCR检测PRRSV 7份猪病料阳性。7株病毒与VR-2332和LV株的同源性分别为83.5%88.7%和62.1%64.8%。遗传进化分析显示,7株病毒分属于两个亚群,3株属于亚群Ⅳ,4株属于亚群Ⅵ。Nsp2序列分析显示,6株病毒有高致病性PRRSV 1+29aa氨基酸的缺失特征,其中GXBB11-2015在此基础上出现了新的20个氨基酸缺失,缺失碱基数为150个碱基。结论高致病性PRRSV已成为广西地区优势毒株,病毒Nsp2基因新的碱基缺失是PRRSV变异的又一证据。
- 孙文超张萍解长占张金勇曹亮南福龙韩继成温树波肖朋朋张赫庄忻雨靖杰崔卓栋柴丹鲁会军金宁一
- 关键词：ORF5基因
- 欧洲型PRRSV、PCV2二联重组痘苗病毒疫苗猪体免疫实验研究被引量：5
- 2014年
- 目的评价实验室构建的欧洲型PRRSV和PCV2二联重组痘苗病毒猪体免疫效果。方法分别用重组痘苗病毒rVTT-PCV2-ORF2-EU-ORF3-ORF5和rVTT-EU-ORF3-ORF5进行猪体免疫试验,每周采血,分离血清,采用ELISA检测病毒特异性抗体、中和抗体检测及细胞因子水平,评价免疫效果。结果 rVTT-PCV2-ORF2-EU-ORF3-ORF免疫组35d时,猪血清欧洲型PRRSV GP3和GP5及PCV2ORF2特异性抗体,显著高于野毒组(t=6.61,t=9.21,t=10.34,P<0.05);猪血清中和抗体35d时,各免疫组均可产生较高的免疫水平,差异均无统计学意义(t=0.48,P>0.05);重组痘苗病毒疫苗rVV-ORF2-EU-ORF3-ORF5免疫可诱导IL-4和IFN-γ产生,增强猪体细胞免疫应答水平。结论欧洲型PRRSV、PCV2二联重组痘苗病毒疫苗能诱导猪体产生体液和细胞免疫应答,为欧洲型PRRSV、PCV2的新型疫苗研究奠定了实验基础。
- 韩继成任静强孙文超靖杰肖朋朋郭海宁陈兴鲁会军金宁一
- 关键词：免疫研究
- 欧洲型PRRSV重组痘苗病毒候选疫苗猪体免疫效果研究被引量：2
- 2015年
- 目的通过猪体免疫试验,评价欧洲型PRRSV重组痘苗病毒灭活疫苗的免疫效果。方法分别用重组痘苗病毒rVV-EU-ORF3-ORF5和灭活rVV-EU-ORF3-ORF5进行猪体免疫试验,通过检测猪血清特异性抗体中和抗体检测及T淋巴细胞增殖试验分析免疫效果。实验设E3L-VTT野毒免疫组和PBS组作对照。结果免疫后35d,欧洲型PRRSV重组痘苗病毒灭活疫苗免疫组和rVV-EU-ORF3-ORF5免疫组GP3、GP5特异抗体水平均达峰值（A值0.51~0.56）,两组间比较差异无统计学意义（tGP3=1.805,tGP5=0.7998,P〉0.05）,但均高于E3L-VTT野毒免疫组（A值0.33~0.43）,差异显著（tGP3=5.518,tGP5=3.346,P〈0.01）;猪血清中和抗体重组痘苗病毒灭活疫苗组与重组痘苗病毒疫苗组均与免疫后35d达峰值水平（分别为16.38和18.88）,且两组间比较差异无统计学意义（t=0.7005,P〉0.05）;T淋巴细胞增殖试验的SI值两疫苗组差异无统计学意义（t=0.2536,P〉0.05）,但均高于E3L-VTT野毒免疫组（t值分比为6.414和7.222,P〈0.01）。结论欧洲型PRRSV重组痘苗病毒灭活疫苗能诱导猪体产生体液和细胞免疫应答,可为欧洲型PRRSV的新型疫苗的研制提供参考。
- 韩继成靖杰肖朋朋曹亮李一权郭海宁马海彬张萍鲁会军金宁一
- 关键词：免疫研究
- Expression pattern of four PRRS virus receptors in the central nervous system of piglets
- (Objective) The previous researches on porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) and its rece...
- 陈树林莫虹斐周恩民SONG Meng-qiuCAO Yu-fengLIU YangYIN Yu-pengSUN Jian-boLIU LeiZHAO Shan-ting
- 关键词：RECEPTOR
- 文献传递
- 基于BAC系统的表达红色荧光蛋白的HP-PRRSV感染性克隆的构建
- 外源基因在重组病毒中的表达常表现出不稳定性,因此,一个可稳定表达外源荧光蛋白标签的高致病性PRRSV感染性克隆对于研究病毒生物学特性而言将是一个有效工具。在不同的病毒拯救系统中,细菌人工染色体(bacterial art...
- 黄柏成孔宁李琼毅张昂克王承宝周恩民
- 关键词：高致病性PRRSVDSRED细菌人工染色体
- 表达猪白细胞介素-4的重组PRRSV在猪体内的免疫效果评价
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仍旧是危害世界养猪业的重要传染病之一，现有的疫苗不能够提供完全的免疫保护。研究报道称猪白细胞介素-4可以作为免疫佐剂提高PRRSV疫苗的免疫效果。本研究的目的是构建在PRRSV致弱毒株(CH...
- 李治军蔡学辉王承宝周恩民王刚王妍张冲黄柏成李琼毅李亮亮薛碧云丁培阳
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒类似microRNA的病毒小RNA的预测验证及功能分析
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种严重危害世界养猪业的重要病毒性传染病,其主要特征为妊娠母猪流产、死产、弱胎、木乃伊胎等繁殖障碍、各年龄阶段猪的呼吸道症状,对于该病迄今仍无确...
- 李娜肖书奇闫云欢张冲张昂克周恩民
- 用于山羊痘病毒载体的强痘病毒启动子筛选被引量：2
- 2015年
- 为提高重组山羊痘病毒（GPV）中外源基因的表达水平及筛选强转录效力的启动子,本研究选择桑灯蛾昆虫痘病毒42K启动子（42K）、痘病毒合成晚期441启动子（SL441）、痘病毒合成晚期454启动子（SL454）、牛痘病毒（VV）早晚期P7.5启动子（P7.5）、VV晚期P11启动子（P11）、VV H6启动子（H6）、VV合成早晚期启动子（E/L）及人工优化早晚期启动子（LEO）8种启动子,并在其下游插入萤火虫荧光素酶（Fluc）报告基因,分别构建了启动子效力检测重组质粒。并分别将其转染于预感染GPV的DF-1（鸡）、LT（绵羊）、BHK-21（仓鼠）和Vero（猴）4种动物源细胞中,以表达海肾荧光素酶（Rluc）的p RL-TK为内参质粒,24 h后检测荧光素酶活性。结果表明,在LT细胞中,SL441转录效力最强;在DF-1细胞中,LEO转录效力最强,为其他启动子的1.19-14.46倍;在Vero细胞中,H6和SL441的转录效力较强,达到其他启动子的1.21-11.24倍;在BHK-21中,H6启动子的转录效力也显著强于其它启动子。本实验最终确定了GPV在4种动物源细胞中转录效力强的启动子,该研究结果为进一步提高以GPV为载体疫苗的免疫效力奠定了基础。
- 谢梅梅李翠翠张家林王子龙陈伟业步志高
- 关键词：启动子山羊痘病毒荧光素酶
