国家自然科学基金(81200213)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：唐跃崔永春刘晓鹏张宏孟宪敏更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同阶段泡沫细胞模型的建立与鉴定被引量：4
- 2014年
- 目的建立不同阶段的泡沫细胞,并对其生物特性进行鉴定。方法体外培养人THP-1来源的巨噬细胞(THP-M),由ox-LDL诱导其转化为不同阶段泡沫细胞,ELISA方法检测不同阶段泡沫细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量;透射电镜和油红O染色光镜观察细胞内脂质,噻唑蓝染色法测定不同阶段泡沫细胞的活性变化规律。Western blot方法测定II型微管相关蛋白1轻链3(LC3II)蛋白表达水平。结果 24h开始,THP-M细胞质内出现大量的红染颗粒或脂质空泡,总胆固醇和胆固醇酯均较对照组增加,细胞胆固醇酯含量大于总胆固醇的50%,泡沫细胞已经形成。噻唑蓝染色结果显示,自48h开始少量泡沫细胞出现死亡现象(存活率93.21±3.66%),60h和72h细胞存活率率分别为72.15±2.23%和63.06±1.83%。电镜扫描结果发现,24h细胞内脂滴聚集,24h内细胞浆自噬小体逐渐增多。36h、48h细胞内脂滴大小和形态各异,可见吞噬脂滴后尚未消化完全的自噬溶酶体,部分细胞膜破裂;60h和72h,细胞内自噬小体数量明显减少,细胞大量崩解。Western blot检测结果表明自噬标志性蛋白LC3II表达水平变化规律与电镜观察自噬小体结果一致。结论利用oxLDL诱导THP-M24h、36h-48h、60h-72h后,细胞形态和细胞内脂含量分别符合早期、中期和晚期泡沫细胞的生物特征,成功建立了早、中、晚期泡沫细胞模型,其中细胞活力变化可能与II型凋亡(自噬性死亡)相关。为不同病程AS研究提供支持。
- 崔永春刘晓鹏张宏李凯孟宪敏唐跃
- 关键词：氧化型低密度脂蛋白THP-1细胞泡沫细胞动脉粥样硬化
- 心血管疾病研究者对动物实验伦理认知度调查与分析被引量：1
- 2013年
- 目的了解不同层次心血管疾病研究者对于现有实验动物福利保护和动物伦理知识的认知,为动物实验伦理培训提供新策略,为进一步完善实验动物福利保护措施和伦理规制提供依据。方法选择从2009年1月1日至2012年6月30日在中国医学科学院阜外心血管病医院动物实验中心开展动物实验的197名研究者开展问卷调查,根据《北京市实验动物福利伦理审查指南》自行设计调查问卷,并对结果进行分析。结果对动物福利与伦理知识的认知得分,54.3%良好,35.5%合格,10.2%不合格,不合格者均为年龄20～30岁之间无动物实验科研经历的研究生。结论研究者对动物福利与伦理认知度参差不齐,有必要加强实验动物伦理培训,尤其是对有动物实验需求的新入学的研究生。
- 崔永春田忠唐跃孙嘉康吴爱丽刘晓鹏罗富良
- 关键词：心血管疾病影响因素
