北京市自然科学基金(5091002)
- 作品数：11 被引量：36H指数：4
- 相关作者：倪和民郭勇刘云海邓桂馨陈利平更多>>
- 相关机构：北京农学院全国畜牧总站中国科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 2种化学激活方法制备的小鼠孤雌胚胎早期发育指标比较研究
- 2012年
- 为了寻找一种健康、有效的制备孤雌胚胎的方法,从根本上提高哺乳动物孤雌胚胎、体外受精胚胎及核移植胚胎成活率并减少孤雌胚胎、核移植胚胎出生后发生潜在疾病与缺陷的几率。通过比较2种不同化学激活方法(试验组I:7%乙醇+2mmol/L 6DMAP;试验组II:7%乙醇+2mmol/L 6DMAP+5μg/mL CB)制备的小鼠孤雌胚胎由卵母细胞激活到发育至囊胚的时间、囊胚形态及囊胚细胞数目,初步研究了不同化学方法制备的小鼠孤雌胚胎在形态学及细胞水平上的差异性。结果表明:试验组I与试验组II相比,前者比后者卵裂率稍高,桑葚率、不同时间段的囊胚率稍低,但两组间数据差异不显著(64.9vs73.7,P>0.1;31.7vs28.8,P>0.1;8.7vs5.5,P>0.1)。2种方法所得的孤雌囊胚在形态上相似,但是试验组II囊胚细胞数要比试验组I囊胚细胞数稍少(67vs50,P>0.1);两组囊胚的细胞数与受精囊胚相比没有显著差异(67vs50vs65,P>0.1)。选用的2种化学方法制备的小鼠孤雌胚胎,在由卵母细胞发育至囊胚的时间、囊胚形态及囊胚细胞数目方面没有显著差异。
- 王英罗永尹艳云刘云海盛熙晖邓桂馨郭勇倪和民
- 关键词：小鼠孤雌形态学细胞水平
- 体外成熟培养时间对牛卵母细胞孤雌发育的影响
- 2011年
- 为了探讨牛卵母细胞体外成熟培养时间对孤雌胚胎发育的影响,通过比较18.5h、22h和25.5h等3个不同成熟培养时间下孤雌胚的卵裂率和囊胚率,从而确定较为理想的体外成熟培养时间。试验结果发现,体外不同成熟培养时间下,卵母细胞的孤雌卵裂率之间并无显著差异,虽然体外培养22h卵母细胞的孤雌卵裂率稍稍高于体外培养18.5h和25.5h卵母细胞的孤雌胚卵裂率,但差异不显著;而不同成熟培养时间下卵母细胞的孤雌囊胚率之间存在着显著的差异,体外成熟培养22h卵母细胞的孤雌囊胚率显著高于其他2组。该结果证明,卵母细胞体外培养时间是影响孤雌胚发育的一个重要因素,体外培养时间过长或过短都会对孤雌胚今后的发育产生不利影响。
- 李扬李贺娟朴学娇罗永王稳郭勇倪和民
- 关键词：卵母细胞孤雌发育
- 牛滋养层干细胞样细胞系的建立
- 2011年
- 为了成功建立牛滋养层干细胞样细胞系,探讨牛滋养层干细胞样细胞(Bovine Trophoblastic Stem-like Cells)体外培养条件及相关影响因素,以胎牛子宫成纤维细胞条件培养液作为培养基,胶原铺被培养皿,利用体外受精牛囊胚培养得到牛滋养层干细胞样细胞,并调整培养体系,以探讨其最适生长条件。结果表明:利用添加FBS、β-巯基乙醇、肝素以及胎牛子宫成纤维细胞条件培养液的DMEM/F12,体外培养牛囊胚,可以初步建立牛滋养层干细胞样细胞系。
- 田宇婧鲁文赓张彧林皓倪和民郭勇
- 小鼠电激活孤雌胚胎早期体内、外发育能力的比较
- 探讨小鼠电激活孤雌胚胎的早期体内、外发育能力方法利用不同电脉冲参数和激活液对小鼠卵母细胞进行活化,观察激活后的小鼠孤雌胚体外发育状况和移植后的发育能力。结果非电解质激活液优于电解质液,脉冲强度、脉冲宽度和脉冲次数3个参数...
- 刘京威刘云海倪和民李晓燕郭勇
- 关键词：小鼠电激活孤雌胚胎
- 文献传递
- 小鼠电激活孤雌胚胎早期体内外发育能力的比较被引量：2
- 2011年
- 目的探讨小鼠电激活孤雌胚胎的早期体内、外发育能力。方法 利用不同电脉冲参数和激活液对小鼠卵母细胞进行活化,观察激活后的小鼠孤雌胚体外发育状况和移植后的发育能力。结果非电解质激活液优于电解质液,脉冲强度、脉冲宽度和脉冲次数3个参数各自处于某一范围内时,他们之间存在某种相关性,降低其中1个参数可通过升高另外2个参数得到补偿,经筛选较适宜的电脉冲参数为:1.0 kV/cm、40μs、2 p,或者1.5kV/cm、30/μs、2 p,分别为74.65%和71.19%,体外囊胚发育率分别为43.40%和47.62%。电激活孤雌胚体外发育时序比正常胚胎慢,但囊胚细胞数与对照组差异不显著。它们经胚胎移植后,其中的一部分能够着床,但着床率仅为3.6%,极显著低于对照组(67%,P<0.01)。结论电刺激能够较好地模拟正常受精过程激活小鼠卵母细胞,但激活后的多数小鼠孤雌胚胎着床能力较低,不能够顺利着床。
- 刘京威李贺娟尹燕云陈利平李晓燕刘云海倪和民郭勇鲁琳
- 关键词：小鼠电激活孤雌胚胎
- PMSG或FSH同期发情处理对小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体分布的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)和促卵泡激素(folliclestimulating hormone,FSH)同期发情处理的小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体(progesterone receptor,PR)分布的差异。方法 10只8周龄KM系雌鼠,随机分为PMSG和FSH两个组,第一次处理后48 h取其卵巢、输卵管、子宫进行固定,免疫组织化学法观察各组织中PR的分布。结果两组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜中均有PR表达;其中PMSG组初级卵泡、次级卵泡和输卵管的阳性率均显著高于FSH处理组(P<0.05);PMSG组各级卵泡的平均吸光度值均显著高于FSH处理组(P<0.05);PMSG处理组子宫内膜上皮与腺上皮中的阳性率显著高于FSH组(P<0.05),而基质和子宫内膜上皮中的平均吸光度值显著低于FSH组(P<0.05)。结论 PMSG和FSH同期发情处理不同程度影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中PR的表达分布;其中PMSG处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫上皮中PR表达普遍显著高于FSH处理组。
- 林自力倪和民郭勇梁鸿斌尹艳云邓桂馨刘云海
- 关键词：小鼠卵巢输卵管子宫
- PMSG和FSH同期发情处理对小鼠子宫、卵巢和输卵管中雌激素α受体分布的影响被引量：1
- 2010年
- 目的从雌激素α受体(estrogen receptorα,ERα)的角度探讨孕马血清促性腺激素(pregnant mareserum gonadotropin,PMSG)和促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)处理小鼠的卵巢、输卵管和子宫中,ERα分布是否有显著性差异。方法 10只8周龄母鼠,随机分为处理方式不同的两个组:PMSG组和FSH组,两组均在处理第48小时取其卵巢、输卵管和子宫样固定,采用免疫组织化学法分别观察组织中ERα分布情况。结果免疫组化结果显示,两个处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜的细胞中都有ERα表达;PMSG处理组卵巢中的初级卵泡和成熟卵泡上ERα阳性率和平均吸光度均显著高于FSH处理组;FSH处理组的输卵管中ERα阳性率和平均吸光度均高于PMSG处理组;FSH处理组子宫基质和腺上皮细胞中ERα的阳性率显著高于PMSG组,其中PMSG组基质中的平均吸光度显著高于FSH组,而子宫内膜上皮细胞的阳性率和平均吸光度两处理组间差异无显著性。结论 PMSG和FSH同期发情诱导由于其特性可不同程度地影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中ERα的分布,使之在不同组织中产生差异性变化。
- 林自力高雅邓桂馨梁鸿斌张鸿波刘云海倪和民郭勇王志刚
- 关键词：小鼠卵巢输卵管子宫
- 3个品种绵羊超数排卵处理后卵巢上促黄体素受体表达差异的研究被引量：6
- 2011年
- 本研究旨在探讨在具有不同超数排卵效果的绵羊品种中,在进行超排处理后其卵巢上的促黄体素受体(LH receptor,LHR)分布情况,为进一步研究二者的相关性以及据此为改进超排效果奠定基础。根据超数排卵效果的优劣依次选择3个我国地方绵羊品种:小尾寒羊、白滩羊和乌珠穆沁羊。在常规超排最后一次注射FSH后的8、16和24h分别各取3只绵羊的卵巢,采用免疫组织化学法观察3个品种绵羊卵巢上LHR的分布情况。结果表明:LHR存在于3个地方品种绵羊卵巢有腔卵泡的颗粒细胞和膜细胞上,但在早期卵泡上不表达;各品种绵羊的近成熟卵泡上LHR阳性细胞率都显著高于相应的次级卵泡(P<0.05);3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率存在显著差异,从高到低依次为小尾寒羊>白滩羊>乌珠穆沁羊(P<0.05)。籍此可以得出以下结论:LH对绵羊早期卵泡发育的诱导可能不需要通过其特异性受体起作用;3品种绵羊近成熟卵泡中LHR的阳性变化率与超排效果是一致的,表明超数排卵的效果可能与绵羊卵巢上的LH受体分布存在一定的联系。
- 倪和民张鸿波刘云海邓桂馨芦天罡郭勇
- 关键词：绵羊超数排卵免疫组织化学染色
- Wnt3a在小鼠孤雌胚胎及正常胚胎早期着床部位的表达变化被引量：3
- 2010年
- 目的研究小鼠孤雌激活胚胎和体内正常发育胚胎在子宫中发生着床过程时,在早期着床部位上Wnt3a信号分子的表达变化。方法运用免疫组织化学染色法比较受体子宫中的孤雌胚胎着床位点和体内正常发育胚胎着床位点上Wnt3a的表达状况。结果免疫组织化学染色结果发现:(1)在着床期怀孕第5.5天和6.5天,受体子宫中孤雌胚胎的着床位点处和体内正常发育胚胎的着床位点处,Wnt3a在两种子宫上的表达情况相似,而在两种胚胎上的表达情况不同;(2)Wnt3a信号在空怀假孕母鼠子宫上表达情况与相同怀孕期有正常胚胎着床的子宫上的表达情况相似。结论胚胎着床与否及胚胎正常与否均不影响Wnt3a在小鼠早期着床期子宫上的表达,但在怀孕第5.5天和6.5天时孤雌激活胚胎和体内正常发育胚胎上Wnt3a的表达有差异。
- 王灏李贺娟尹燕云陈利平刘云海郭勇倪和民
- 关键词：小鼠孤雌激活胚胎WNT3A
- 经程序化冷冻的小鼠休眠胚胎的基因表达谱差异分析被引量：6
- 2012年
- 目的探讨小鼠休眠胚胎经程序化冷冻后基因表达谱的变化及相关信号通路的改变趋势。方法采用Affymetrix基因芯片检测小鼠正常休眠胚胎和经程序化冷冻后的休眠胚胎的差异表达基因;采用GO分析和Pathway分析等生物信息学方法进一步了解相关信号通路的改变。结果经程序化冷冻后的小鼠休眠胚胎与正常休眠胚胎相比,存在228个差异表达基因,其中50个基因表达上调,178个基因表达下调。Pathway分析显示黏着斑通路、细胞外基质受体相互作用通路、肌动蛋白细胞骨架调节通路、细胞凋亡通路、细胞通讯通路、泛素介导的蛋白质水解通路、甘油磷脂代谢通路、小细胞肺癌通路、TGF-β信号通路、MAPK信号通路等基因差异表达变化趋势明显。结论小鼠休眠胚胎经程序化冷冻后会导致一系列基因调控变化,并可能影响多条信号通路的协同变化。
- 张劭俣刘云海倪和民王灏顾美超阎芃杨菲郭勇
- 关键词：小鼠
