上海市科学技术委员会科研基金(06JC14014)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 肺炎链球菌表面黏附素A的原核表达和抗原性分析被引量：3
- 2009年
- 目的应用基因工程技术制备肺炎链球菌表面黏附素A(pneumococcal surface adhesin A,PsaA),并分析其抗原性。方法根据基因库中报道的psaA基因序列,从肺炎链球菌基因组中扩增出psaA基因,连接到原核表达载体pET28a中,构建出重组质粒pET28a-psaA,转化大肠杆菌BL21(DE3),采用镍柱亲和层析法纯化PsaA蛋白,Western-blot分析其抗原性。结果克隆出的psaA基因同基因库中报道的psaA基因序列一致。成功构建出重组质粒pET28a-psaA,基因测序证实重组质粒构建正确。成功表达和纯化出PsaA蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白分子量为37-kDa,最终得到纯度较高的蛋白,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析显示在37-kDa处见到目的蛋白条带。结论利用基因工程技术可以克隆出psaA基因,并成功表达和纯化出PsaA蛋白,其抗原性良好。
- 章德广王正敏徐江红陈兵戴文佳李忠明
- 关键词：中耳炎疫苗
