北京市自然科学基金(4132079)
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：中国人民解放军总医院中国科学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Ru-PDT对烧烫伤感染的作用
- 2014年
- 目的：利用铜绿假单胞菌PAO1建立稳定的烧烫伤创面感染模型，通过Ru化合物介导的PDT处理观察PDT对烧烫伤感染创面的作用。
- 吴苏敏王颖顾瑛
- 关键词：烫伤感染烧烫伤创面感染创面PDT
- 光动力疗法治疗真菌感染的研究进展
- 2014年
- 真菌引起的感染是临床上常见的问题，近年来，随着器官移植、肿瘤化疗、免疫抑制剂使用、创伤性医疗操作等的不断增多，真菌感染的发病率和病死率显著上升，尤其对免疫功能低下患者的健康构成了重大威胁。光动力疗法是治疗肿瘤、血管性疾病的一种新的方法。
- 周少娜顾瑛王颖
- 关键词：光动力疗法真菌感染免疫功能低下肿瘤化疗血管性疾病
- 新型亚苄基环烷烃酮类光敏剂介导的光动力疗法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的破坏作用被引量：4
- 2016年
- 目的观察新型亚苄基环烷烃酮类光敏剂(cationic benzylidene cyclopentanone photosensitizers,P2)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜内细菌的灭活作用,并且观察PDT对生物被膜结构和多糖成分的破坏作用。方法采用不同浓度(0、10和25μM)的光敏剂P2对临床菌株MRSA0的生物被膜进行PDT处理,通过XTT法检测生物被膜内细菌的存活率。采用SYTO9、PI荧光探针及FITC-Cona荧光探针结合激光共聚焦显微镜,观察P2光敏剂浓度为10μM时,经PDT处理后生物被膜内细菌杀伤情况、以及对生物被膜的结构及多糖成分的影响。结果 PDT处理后,光敏剂浓度为10μM组和25μM组,经XTT法检测的细菌存活率分别为15.77%和6.25%。激光共聚焦显微镜观察结果显示,PDT组SYTO9探针的绿色荧光较空白对照组明显减弱;PI探针的红色荧光较空白对照组明显增强,说明细菌存活数量明显低于空白对照组。FITC-Cona荧光探针的绿色荧光较空白对照组明显减弱,说明生物被膜内多糖成分遭到明显破坏。结论 P2-PDT对MRSA生物被膜内细菌有杀伤作用,其对生物被膜内细菌杀伤率随光敏剂浓度增大而提高,其机理可能为通过破坏生物被膜内的多糖成分,从而破坏生物被膜的结构。
- 叶祖林王颖郑美玲曾晶周少娜陈德福顾瑛
- 关键词：光动力疗法生物被膜耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 新型光敏剂Ru化合物介导的光动力对铜绿假单胞菌的体外杀伤效应被引量：2
- 2014年
- 目的观察新型光敏剂Ru化合物介导的光动力（Ru complex mediated Photodynamic Therapy，Ru-PDT）对5株离体铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）的杀伤作用，并初步研究PDT杀菌的作用位点。方法分离培养两株标准菌株ATCC27853、PA01（即ATCC15692）和3株临床耐药菌株，制备成-10^8CFU／ml的细菌悬液。实验分为4组：PDT组、单纯光敏剂组、单纯照光组和空白对照组。（1）PDT组：不同浓度Ru光敏剂（终浓度为0．1、0．25、1．0、2．5、10和25μM）与细菌悬液混合后避光孵育30min，用457nln激光照射，照射时间10min，功率密度为40mW／cm2。（2）单纯光敏剂组：50μM光敏剂Ru化合物与细菌悬液避光混合，孵育30min，不予激光照射。（3）单纯照光组：同浓度细菌悬液与PBS混合后，采用波长457nln激光照射，照射时间10min，功率密度为40mW/cm2。（4）空白对照组：将细菌悬液与PBS混合后，不加入光敏剂，不予激光照射。将各组处理后的细菌悬液收集，10倍递增连续稀释后涂板培养24h进行菌落计数。将PDT处理前后的细菌收集固定，制备超薄切片，通过透射电镜观察PDT作用后菌体的形态学变化。结果在本实验的光敏剂浓度范围内，PDT对铜绿假单胞菌的杀伤作用呈光敏剂浓度依赖性，以10μM光敏剂Ru，PDT处理5株菌均能达到有效杀菌。单纯照光或光敏剂孵育对细菌存活无影响。电镜观察发现PDT处理组细菌膜结构破坏严重，细菌内容物外溢。结论Bu-PDT能对多重耐药铜绿假单胞菌有很好的体外杀菌作用；临床耐药菌的膜结构是其产生杀菌作用的重要位点。
- 吴苏敏王钰铖甄洁王颖顾瑛
- 关键词：铜绿假单胞菌光动力疗法钌化合物透射电镜
- 光动力对铜绿假单胞菌PAO1浮游菌与生物被膜的体外清除作用被引量：2
- 2014年
- 目的分析新型光敏剂钌化合物(Ru complex)介导的光动力治疗(Photodynamic therapy,PDT)对铜绿假单胞菌PAO1浮游菌和生物被膜内细菌活性的影响,观察PDT对其生物被膜的清除作用。方法实验对象为细菌悬液和生物被膜模型,均分为四组。细菌悬液组的光敏剂浓度为0.1、0.25、1、2.5、10和25μM;生物被膜组的光敏剂浓度为1、2.5、10和25μM。(1)PDT组:加入不同浓度的光敏剂后,孵育时间30 min,采用激光照射,功率密度为40 mW/cm2,照射时间10 min。(2)单纯光敏剂组:光敏剂孵育时间30 min,不予激光照射。(3)单纯照光组:仅激光照射,功率密度40 mW/cm2,照射时间10 min。(4)空白对照组:不加入光敏剂,不予激光照射。用稀释平板法和MTT法分别测定各组处理后浮游菌存活率和生物被膜内细菌活性。生物被膜经过冲洗、固定、结晶紫染色后,用光镜观察其结构改变。结果在本实验浓度范围内,PDT杀伤铜绿假单胞菌的作用呈光敏剂浓度依赖性。以10和25μM Ru-PDT处理PAO1浮游菌和生物被膜均能够显著杀伤,浮游菌杀伤分别达到99.99%和99.9999%以上,生物被膜内菌的杀伤分别为60.1%和66.0%,进一步提高光敏剂浓度至50μM,光动力作用没有显著增强。单纯照光或光敏剂孵育对细菌存活无影响。光镜观察PDT处理组生物被膜发现其结构完整性遭到破坏,整体稀疏分散。结论 Ru-PDT在体外对铜绿假单胞菌浮游菌和生物被膜内细菌都具有很好的杀伤作用;浮游菌相比生物被膜内的细菌对PDT作用更加敏感。PDT不仅可以使生物被膜内细菌失去活性,还可以破坏其结构,具有清除作用。
- 吴苏敏王颖顾瑛
- 关键词：光动力疗法铜绿假单胞菌生物被膜钌化合物
- 光动力疗法提高MRSA生物被膜对左氧氟沙星渗透性及对被膜内细菌杀伤效应的研究
- 2016年
- 目的观察新型光敏剂亚苄基环戊酮化合物P2(cationic benzylidene cyclopentanone photosensitizers)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜渗透性的影响,及P2-PDT与左氧氟沙星(Levofloxacin,LVFX)联合应用对生物被膜内细菌的杀伤作用。方法 (1)观察P2-PDT对MRSA生物被膜渗透性的影响。首先建立MRSA生物被膜渗透性检测模型。实验分为空白对照组和PDT组,每组6个样本。PDT组采用P2-PDT处理,P2光敏剂浓度10μM,避光孵育30 min后,采用激光照射,激光波长532nm,功率密度40 mW/cm^2、照射时间10 min,能量密度24 J/cm^2;对照组不进行P2-PDT处理。两组标本处理后,加入浓度为10μg/ml LVFX,6 h后采用高压液相色谱仪测定透过细菌生物被膜的LVFX浓度。(2)观察P2-PDT与LVFX联合应用对生物被膜内细菌的杀伤作用。实验分为空白对照组(A组),即不加入LVFX溶液、不进行PDT照射;单纯LVFX组(B组)即只加入LVFX溶液、不进行PDT照射;单纯PDT组(C组),即只进行PDT照射、不加入LVFX溶液;PDT+LVFX联合组(D组),采用P2-PDT处理后即刻,加入浓度为10μg/ml的LVFX溶液。各组样本在处理后继续培养24 h,采用XTT法检测生物被膜内细菌的存活率。结果 (1)P2-PDT对MRSA生物被膜渗透性的改变,两组透过MRSA生物被膜的LVFX浓度分别为:PDT组(2.02±0.2)μg/ml、空白对照组(1.60±0.2)μg/ml,两组比较差异具有非常显著意义(P<0.01)。(2)P2-PDT与LVFX联合应用对生物被膜内细菌的杀伤作用。四组生物被膜内细菌的存活率分别为:A组(100.0±0.0)%、B组(86.49±3.5)%、C组(57.42±0.9)和D组(0.76±0.6)%,其中D组生物被膜内细菌的存活率显著低于B组和C组,三组比较差异具有非常显著意义(P<0.01)。结论 P2-PDT能够增强MRSA生物被膜对抗生素LVFX的渗透性,P2-PDT与LVFX联合应用对杀伤生物被膜内细菌有协同作用。
- 叶祖林王颖周少娜顾瑛
- 关键词：光动力疗法生物被膜左氧氟沙星渗透性
