引进国际先进农业科技计划(2010-S04)
- 作品数：7 被引量：67H指数：3
- 相关作者：罗建勋殷宏任巧云刘爱红关贵全更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 我国部分地区蜱体内伯氏疏螺旋体流行病学调查
- 本研究应用基于伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OspA)基因和编码鞭毛蛋白(F1a)基因的两种套式PCR方法,对野外采集的543份蜱的基因组进行检测。敏感性结果显示:基于OspA基因的引物对3个基因型标准菌株DNA检出的敏感性均...
- 杨吉飞殷宏李有全
- 关键词：伯氏疏螺旋体聚合酶链式反应
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒环介导恒温扩增快速检测技术的建立及应用被引量：18
- 2011年
- 本研究基于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)vp72基因设计引物,建立了能够快速检测非洲猪瘟病毒的环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。将LAMP与OIE参考的PCR检测方法进行比较,并且应用LAMP对非洲猪瘟参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组以及国内收集的50份猪的基因组、30份蜱的基因组进行检测。结果显示,本研究设计的引物具有良好的特异性和敏感性,所建立的LAMP能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组,而野外收集的猪和蜱的基因组检测均为阴性。因此,本研究所建立的方法能够用于非洲猪瘟的快速诊断以及防控。
- 杨吉飞关贵全刘志杰汪月凤李有全马米玲刘爱红任巧云苟惠天杜鹏飞罗建勋殷宏
- 关键词：聚合酶链式反应非洲猪瘟
- 绵羊体表脓包病原的分离·鉴定及药敏试验被引量：1
- 2014年
- [目的]对分离自湖北省大悟县的患病山羊体表脓包中的致病菌进行分析和鉴定,以确定脓包中细菌的分子分类学地位及药物敏感性。[方法]通过对分离株16S rRNA基因序列分析,结合细菌菌落形态和细菌生化特性分析进行细菌分离和鉴定,并对已鉴定的菌株进行药物敏感性试验,筛选出脓包细菌敏感性药物。[结果]从脓包分离的细菌分别为葡萄球菌属、大肠埃希氏杆菌属、不动杆菌属以及绿脓杆菌;药物敏感试验表明这些细菌对药物的敏感性不同,其中对头孢类、喹诺酮类、氨基糖苷类以及氯霉素等敏感。[结论]该研究可为该地区该病流行病学的研究与防治药物的研发提供参考。
- 张晓刘志杰杨吉飞陈泽关贵全刘爱红任巧云罗建勋殷宏李有全
- 关键词：山羊RRNA药物敏感性
- 非洲猪瘟的生物媒介被引量：31
- 2011年
- 非洲猪瘟(ASF)存在多种传播途径,但其生物媒介——钝缘蜱是ASF病毒在疫源地传播、长期保存甚至发生变异的关键因素,也是ASF在很多地区和国家久控不绝的重要原因。为此作者将从钝缘蜱的生物学特性和生态学特性、与ASF的相互关系、该类蜱的防控及其在中国的分布现状等角度进行论述,为非洲猪瘟的有效防控奠定基础。
- 陈泽罗建勋殷宏
- 关键词：非洲猪瘟生物媒介
- 一种用于非洲猪瘟病毒检测的PCR方法被引量：19
- 2011年
- 基于非洲猪瘟病毒(ASFV)VP72基因设计引物,建立一种检测非洲猪瘟病毒的PCR方法。应用本研究所建立的方法与OIE参考的方法进行比较,并对参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组以及本实验室收集的野外样品进行检测。结果显示:本研究设计的引物具有良好的特异性,与猪的其他病原没有交叉反应;其敏感性与OIE参考的方法相当;所建立的PCR方法能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组,野外样品检测均为阴性。根据上述研究结果,本研究所建立的方法具有很好的应用性,能够用于非洲猪瘟疫病的诊断以及防控。
- 杨吉飞关贵全刘志杰汪月凤李有全马米玲刘爱红任巧云陈泽苟惠天杜鹏飞罗建勋殷宏
- 关键词：聚合酶链式反应非洲猪瘟
- 蜱的系统分类研究进展
- 随着分子生物学技术在蜱类研究领域的广泛应用,人们逐渐从分子角度并结合形态学特征进行蜱的系统分类学研究。已对蜱类很多类群的分类地位及系统进化关系进行了修订,但仍有一些类群的分类地位存在争议。本文将从蜱的传统系统分类、现代系...
- 陈泽罗建勋殷宏
- 文献传递
- 西尼罗病毒诊断的研究进展被引量：2
- 2011年
- 西尼罗病毒（WestNileVirus，WNV）首次于1937年12月在乌干达西尼罗地区的一名发热成年女性血液标本分离到，属黄病毒科（Flavivirdae）黄病毒属（Flavivirus）的乙型脑炎病毒血清群。可导致人类西尼罗热（westNileFever）或西尼罗脑炎（WestNileEncephalitis）。发病者常常出现发烧、头痛、皮疹、淋巴结肿大等症状，严重时表现为无菌性脑膜炎，甚至死亡。
- 付钰广任巧云罗建勋殷宏
- 关键词：西尼罗病毒乙型脑炎病毒无菌性脑膜炎淋巴结肿大标本分离成年女性
- 莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myo A和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备
- 2013年
- 【目的】克隆和表达莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白GAP45(gliding associated protein 45,GAP45)、GAP50(gliding associated protein 50,GAP50)、肌球蛋白A(Myosin A,Myo A)和肌球蛋白轻链(myosin lightchain,MLC)基因及制备兔源性多克隆抗体。【方法】利用末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术从莫氏巴贝斯虫裂殖子cDNA中扩增gap45、gap50、myo A及mlc基因,将获得的全长或基因的部分序列构建pGEX-4T-1原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)pLys中用IPTG诱导表达;融合蛋白经纯化后免疫家兔,制备多克隆抗体,并用ELISA测定抗体的效价及反应性。【结果】获得了gap45、gap50、myo A和mlc基因的全长分别为664、1391、773和2 538 bp,开放阅读框长度分别为567、1194、606和2 514 bp,制备的多克隆抗体具有较好的特异性,效价高于1:25 600。【结论】克隆了滑动体组件蛋白gap45、gap50、myo A和mlc基因的全长,并制备了多克隆抗体,为筛选巴贝斯虫疫苗和诊断用抗原和药物靶位、研究其生物学入侵机制奠定了基础。
- 王锦明刘爱红任巧云马米玲刘志杰李安岩李有全赵帅阳张浩浩殷宏罗建勋关贵全
- 关键词：RACE滑动体多克隆抗体
- 莫氏巴贝斯虫裂殖子cDNA表达文库的构建及免疫学筛选
- 2012年
- 为了构建莫氏巴贝斯虫(Babesia motasi)裂殖子cDNA表达文库,从中筛选和鉴定功能基因,利用差速离心法从莫氏巴贝斯虫感染的红细胞中纯化裂殖子,提取总RNA并纯化mRNA。在合成的双链cDNA两端加上含EcoRⅠ和HindⅢ定向接头后连接到λSCREEN载体上。通过体外包装形成完整的噬菌体颗粒,并用之转染ER1647,构建莫氏巴贝斯虫裂殖子的cDNA表达文库。用莫氏巴贝斯虫阳性血清筛选cDNA文库,获得的阳性克隆,经过测序和Blast软件分析鉴定,然后利用末端快速扩增技术(RACE)对筛选到的功能基因片段进行全长扩增。结果表明构建的cDNA表达文库其初级库容量约为1.0×106 PFU,扩增文库为3.5×109 PFU;通过免疫学筛选,获得50个阳性克隆。测序和Blast分析后,鉴定出10个莫氏巴贝斯虫基因片段,RACE扩增获得了其中8个基因的全长。本试验构建的莫氏巴贝斯虫裂殖子的cDNA表达文库和筛选到的10个结构和功能基因,为研究巴贝斯虫生物学特性、筛选疫苗与诊断用抗原及药物靶位奠定了基础。
- 王锦明刘军龙刘爱红马米玲牛庆丽任巧云杨吉飞刘志杰李有全罗建勋殷宏关贵全
- 关键词：CDNA表达文库免疫筛选RACE
