安徽省人才开发资金资助项目(2005Z040)
- 作品数：18 被引量：86H指数：6
- 相关作者：沈佐君何晓东李明陶绍能董林更多>>
- 相关机构：安徽医科大学附属省立医院安徽省立医院安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省人才开发资金资助项目安徽省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氨甲蝶呤多聚谷氨酸的检测及其临床应用价值被引量：4
- 2008年
- 氨甲蝶呤多聚谷氨酸(methotrexate polyglutamate,MTXPG)为氨甲蝶呤(methotrexate,MTX)在细胞内的代谢产物,其蓄积程度决定着MTX的细胞毒性和治疗效果。MTXPG的检测有利于监测其在细胞内的浓度,指导临床用药和预后判断。本文就MTXPG在细胞内的代谢过程、检测方法及其在临床疾病治疗中的应用价值做一综述。
- 李明沈佐君
- 高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质被引量：8
- 2007年
- 目的建立测定大鼠海马组织和人脑脊液中氨基酸类神经递质的高效毛细管电泳分析方法。方法用高效毛细管电泳技术,选用总长60 cm、有效长度50.5 cm、直径75μm熔融石英毛细管,在20 kV电压下快速分离4种氨基酸。以100 mmol/L硼酸-三羟甲基氨基甲烷（Tris）（1∶1,含1%异丙醇）为电泳缓冲液（pH值为10.35）,激光诱导荧光检测器进行检测,并对此方法进行方法学评价。同时检测45例患者脑脊液的氨基酸含量。结果谷氨酸（GLU）、天冬氨酸（ASP）、γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸（GLY）4种氨基酸能在15 min内分离,线性范围为1.0~100.0μmol/L,GLU、ASP、GABA、GLY最低检出限分别为10、23、18、15 nmol/L,4种氨基酸的批内精密度范围4.44%~9.72%,批间精密度范围6.96%~10.50%。4种氨基酸的回收率不低于88.1%。全面性大发作癫痫患者GLU、GLY、ASP含量显著高于对照组（P〈0.05）,而GABA较对照组差异无统计学意义;复杂部分性发作癫痫患者4种氨基酸含量较对照组显著增加（P〈0.05）。结论高效毛细管电泳具有快速、灵敏、准确的特点,为临床和科研提供了一种有效的方法。
- 宣柳沈佐君何晓东伊茂礼金鑫鲁明傅先明
- 关键词：神经递质高效毛细管电泳
- 叶酰多聚谷氨酸合成酶与肿瘤耐药被引量：2
- 2010年
- 叶酰多聚谷氨酸合成酶(folyl-polyglutamate synthetase,FPGS)是近几年来研究比较多的肿瘤耐药靶酶之一。随着人们对其在基因组学和蛋白组学研究的逐渐深入,涉及FPGS(分胞浆型cFPGS和线粒体型mFPGS两种异构体)与肿瘤耐药的研究也越来越多。本文就FPGS结构、功能、生化特点及其与肿瘤耐药关系作一综述,并探讨其在临床的应用前景和意义。
- 孙利沈佐君
- 关键词：肿瘤抗药性
- 氨甲蝶呤对映体获得性耐药A549细胞株二氢叶酸还原酶基因表达分析被引量：5
- 2011年
- 目的研究氨甲蝶呤(MTX)对映体[L-(+)-MTX和D-(-)-MTX]耐药与二氢叶酸还原酶(DHFR)基因表达的关系。方法用浓度递增结合低剂量持续诱导法获得A549细胞对不同构型及不同浓度的MTX对映体的耐药细胞株,荧光定量PCR检测耐药细胞株中DHFR基因的相对含量。结果对两种不同对映体的获得性耐药存在差异,D型耐药细胞耐药指数高于L型;对映体各浓度耐药细胞间耐药指数也有差异。15μmol/L L型、D型MTX首次诱导耐药细胞的DHFR相对含量低于亲本细胞,对该浓度对映体耐药的各细胞组间没有差别(P>0.05)。35～45μmol/L浓度耐药细胞的DHFR相对含量增加,45μmol/L D型耐药细胞DHFR相对含量高于对应浓度L型耐药细胞,差异有显著性(P<0.05)。结论首次诱导MTX耐药以抑制DHFR基因为主。DHFR基因表达具有手性差异。DHFR基因的检测有望作为肿瘤治疗监测的指标。
- 李道静何晓东孙余婕凡任芝许维东孙利张永娟张白银沈佐君
- 关键词：二氢叶酸还原酶氨甲蝶呤对映体耐药
- DNA甲基化与肿瘤的侵袭和转移被引量：2
- 2009年
- 肿瘤的侵袭和转移是肿瘤的重要特性,也是肿瘤致死的主要原因。近年来对肿瘤侵袭和转移的机制作了大量的研究,发现DNA的甲基化在肿瘤侵袭和转移中发挥重要的作用。DNA甲基化是表观遗传学分子机制之一,参与基因表达的调控。在肿瘤侵袭和转移过程中,DNA甲基化可以通过调节肿瘤转移相关基因的表达从而影响肿瘤的侵袭和转移。
- 董林沈佐君
- 关键词：DNA甲基化肿瘤侵润肿瘤转移基因肿瘤抑制
- 淫羊藿苷逆转耐甲氨蝶呤肺癌A549细胞转移表型被引量：17
- 2009年
- 目的:研究中药淫羊藿苷(icariin,ICA)作用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)耐药肺癌A549细胞后对细胞转移表型的影响,初步探讨ICA逆转A549/MTX耐药细胞转移表型的作用机制及对肺癌的治疗价值。方法:采用MTT法检测ICA对A549/MTX耐药细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)。采用双层软琼脂克隆形成实验检测A549/MTX组和A549/MTX+ICA组细胞的克隆形成率,并观察其集落形态。细胞划痕实验检测A549/MTX组和A549/MTX+ICA组细胞的迁移能力。Transwell小室实验检测细胞侵袭能力的变化。结果:MTT结果显示,无毒剂量的ICA与MTX联合应用后A549/MTX细胞的IC50值为35.50±1.85μmol/L,比单独应用MTX(同等剂量)后A549/MTX细胞的IC50值(52.17±2.25μmol/L)有了一定程度的下降。软琼脂实验发现,A549/MTX+ICA组细胞克隆形成率为0.94±0.09,小于A549/MTX组细胞的1.56±1.07(P<0.05)。划痕实验显示,72 h后A549/MTX组细胞的迁移能力大于A549/MTX+ICA组细胞(P<0.05)。Transwell实验显示,A549/MTX组细胞的穿膜细胞数明显多于A549/MTX+ICA组细胞(P<0.05),说明A549/MTX+ICA组细胞的侵袭浸润能力小于A549/MTX组细胞。结论:中药ICA具有逆转A549/MTX耐药细胞转移表型的作用。
- 吴剑锋何晓东许卫东李道静孙利沈佐君
- 关键词：淫羊藿苷甲氨蝶呤肿瘤转移
- 表皮生长因子受体介导的信号转导与肿瘤侵袭、转移的关系研究进展被引量：8
- 2008年
- 表皮生长因子受体(EGFR)属受体酪氨酸蛋白激酶,在多种肿瘤中表达或高表达。与配体结合后传递信号至细胞核内,调节基因的表达。参与生长、分化、增殖、血管发生和凋亡等多种细胞功能的调节。肿瘤的侵袭、转移是一个复杂的过程,也是导致肿瘤患者死亡的主要原因。本文就EGFR的结构、信号转导及其在肿瘤的侵袭和转移中的作用作一综述,为肿瘤的靶向治疗提供新思路。
- 陶绍能沈佐君
- 关键词：信号传导肿瘤侵润肿瘤转移
- 二氢叶酸还原酶与肿瘤耐药被引量：2
- 2010年
- 二氢叶酸还原酶是核酸代谢中的关键酶之一,是肿瘤化疗药物的主要靶酶。随着人们对其在基因水平研究的逐渐深入,发现氨甲蝶呤的靶酶二氢叶酸还原酶是引起耐药的主要原因。本文就二氢叶酸还原酶结构、功能及其与肿瘤耐药关系作一综述,并探讨其在临床的应用前景和意义。
- 李道静沈佐君
- 关键词：二氢叶酸还原酶肿瘤氨甲蝶呤抗药性
- 氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株的建立及其生物学特征被引量：11
- 2009年
- 目的诱导并建立耐氨甲蝶呤对映体的A549细胞株并观察耐药细胞系(L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549)的生物学特性。方法以MTX对映体为诱导剂,采用浓度递增结合低剂量持续诱导方法诱导A549细胞株,建立MTX不同对映体耐药细胞系;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法绘制细胞生长曲线;MTT法检测耐药细胞株的耐药指数;流式细胞仪检测细胞周期和细胞的分裂增殖能力。结果L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为6.0的和20.2。倒置相差显微镜观察细胞形态发生了改变;细胞生长曲线显示D-(-)-MTX/A549的增殖略慢于亲本细胞,而L-(+)-MTX/A549的增殖最慢;流式细胞仪检测细胞周期结果显示L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药细胞株S期细胞数量减少(P<0.05),G0/G1期细胞增多(P<0.05);CFSE检测A549、L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549的MFI分别为(6.08±0.55)、(7.72±0.30)、(6.90±0.18)。两对映体细胞株间有明显手性差异。结论本研究建立了MTX两种对映体耐药细胞株,为进一步研究其耐药机制提供了一种实验模型。
- 陶绍能何晓东董林李明朱园园孙自敏沈佐君
- 关键词：氨甲蝶呤A549细胞对映体
- 柱上样本堆积毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤及其六种代谢产物被引量：1
- 2011年
- 目的建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤(MTX)及其6种代谢产物氨甲蝶呤多聚谷氨酸链(MTXPG)的方法。方法采用高效毛细管电泳技术,以75 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH值7.40)作为分离介质,用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本的方法进行柱上样本堆积,0.5 psi压力进样,进样时间50 s,在分离电压28 kV、检测波长300 nm条件下对MTX和MTXPG进行分离。在此基础上,检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG的含量。结果通过不断改变分离缓冲液中异丙醇(5%、8%、10%,V/V)和羟丙基-β-环糊精(hp-β-CD)浓度(20、25、30 mmol/L),发现在含8%异丙醇、25 mmol/L hp-β-CD的缓冲液条件下,30 min内实现7种组分的完全分离。用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本进行柱上样本堆积的方法可使检测灵敏度提高10倍。结论建立柱上样本堆积高效毛细管电泳法可同时检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG。该方法具有高效、快速、简便、高灵敏度的特点。
- 李道静何晓东李明孙利许维东沈佐君
- 关键词：氨甲蝶呤毛细管电泳法
