国家自然科学基金(30870986)
- 作品数：35 被引量：83H指数：6
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- 灯盏细辛活性部位对神经细胞α3尼古丁受体蛋白水平的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物不同活性部位对神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中尼古丁乙酰胆碱能受体（Nicotinic acetylcholine receptor,nAChR）蛋白水平的影响及其对抗β-淀粉样蛋白（Aβ）细胞毒性的作用机制,以探讨其在阿尔茨海默氏病（Alzheimer＇s disease,AD）治疗中的作用。方法选用一定浓度的灯盏细辛不同部位及Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,用比色法测定培养细胞MTT还原率,蛋白质印迹法测定尼古丁受体α3亚单位蛋白水平。结果灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物不同部位中,经凝胶柱分离的第一区段、该区段经反相硅胶柱分离的低极性部位及乙酸乙酯萃取后再以正丁醇获得的萃取物,经凝胶柱分离的第四区段经反相硅胶柱分离出的低极性部位能上调SH-SY5Y细胞中α3nAChR蛋白水平;同时能减弱Aβ25-35的细胞毒性作用。结论灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物分离部位可能是中药灯盏细辛的重要的活性部位,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。
- 闫秀明邓婕齐晓岚黄勇王永林官志忠
- 关键词：灯盏细辛神经母细胞瘤细胞Β-淀粉样蛋白
- α3神经型尼古丁乙酰胆碱能受体在阿尔茨海默病中的抗炎作用
- 2013年
- 目的探讨α3nAChRs在阿尔茨海默病(AD)中的抗炎作用。方法应用Western印迹,ELISA及实时定量PCR检测各组细胞核因子(NF-κBp65)和炎性趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白及mRNA表达情况。结果与对照组比较,淀粉样蛋白(Aβ)处理α3nAChR siRNA SH-SY5Y细胞NF-κBp65、TNF-α蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);MCP-1、MIP-1α表达变化不明显。结论 Aβ引起SH-SY5Yα3nAChR siRNA细胞NF-κBp65、TNF-α蛋白及mRNA表达升高,α3nAChR可能具有一定抗炎作用。
- 廖媛齐晓岚官志忠
- 关键词：阿尔茨海默病Β-淀粉样蛋白
- 灯盏乙素参与线粒体膜通透性转换对抗β淀粉样蛋白毒性的体外实验被引量：4
- 2019年
- 目的观察灯盏乙素(Scu)对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的细胞模型中线粒体通透性转换的几个病理因素的影响,探讨其对抗Aβ毒性损害的作用机制。方法选用神经母细胞瘤细胞分为对照组、Scu处理组、Aβ处理组和Scu+Aβ处理组,用蛋白印迹方法检测各组细胞腺嘌呤核苷酸转位酶2(ANT2)的表达水平;用激光共聚焦显微镜观察各组细胞线粒体膜电位和Ca2+浓度的变化;用生物化学法检测各组细胞活性氧和三磷酸腺苷(ATP)含量;用流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率。结果与对照组和Scu处理组相比,Aβ处理组细胞中ANT2的蛋白表达下调,ATP含量减少,细胞线粒体膜电位下降,活性氧水平升高,胞质内Ca2+浓度及细胞凋亡率升高;Scu+Aβ处理组上述指标的变化与Aβ处理组相比正好相反。结论Scu能够改善ATP代谢和钙超载,调节细胞内活性氧水平和线粒体膜电位异常,上调ANT2的蛋白表达,可能通过介导线粒体膜通透性转换孔的开放来抑制凋亡的发生,减轻Aβ毒性所致的细胞损伤。
- 伍棋王宁慧于燕妮郭莉莉
- 关键词：线粒体通透性转换线粒体膜电位毒性损害灯盏乙素体外实验细胞内活性氧
- 灯盏细辛提取物对痴呆大鼠学习记忆能力和胆碱酯酶活性的影响被引量：6
- 2010年
- 目的探讨灯盏细辛提取物对痴呆大鼠学习记忆能力及胆碱酯酶活性的影响。方法 Wistar大鼠42只,随机分为5组;用双侧脑室注射β淀粉样蛋白联合腹腔注射D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型。采用Morris水迷宫方法检测大鼠学习记忆能力、比色法检测乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE)活性。结果与正常组和假手术组相比,模型组大鼠在定向航行和空间探索中逃避潜伏期时间和穿越平台时间延长,穿越平台次数减少(P<0.05);脑组织中AChE和BuChE活性升高,血浆中AChE和BuChE活性降低(P<0.05),经过灯盏细辛治疗后痴呆大鼠学习记忆能力有所提高,胆碱酯酶活性趋向于正常(P<0.05)。结论灯盏细辛能够提高痴呆大鼠学习记忆能力,促进胆碱酯酶活性趋向于正常。
- 郭莉莉官志忠
- 关键词：灯盏细辛痴呆学习记忆能力胆碱酯酶
- 灯盏乙素对β淀粉样蛋白诱导的SH-SY5Y细胞中Glu/GABA代谢通路的影响
- 目的:观察灯盏乙素(Scutellarin,Scu)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的细胞模型中谷氨酸(Glutamate,Glu)/γ氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)能系统关键递质和蛋白的...
- 李晓宇
- 关键词：灯盏乙素Γ氨基丁酸神经母细胞瘤细胞
- 文献传递
- 灯盏细辛活性部位对神经细胞α7尼古丁受体表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究灯盏细辛活性部位对SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体(nAChR)亚单位在蛋白质水平的表达以及对抗β-淀粉样蛋白的毒性作用。方法:灯盏细辛经乙醇提取、乙酸乙酯及正丁醇萃取、再以反相硅胶柱分离等方式得到极性部位,选取一定浓度的灯盏细辛提取物处理神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后,用Western blotting方法测定α7 nAChR蛋白水平的变化;再将能明显上调α7 nAChR蛋白水平的灯盏细辛提取物预处理SH-SY5Y细胞后,加入Aβ25-35处理,用比色法测定MTT还原率,观察灯盏细辛活性部位对细胞毒性的影响。结果:灯盏细辛醇提乙酸乙酯及正丁醇部位、以及该部位经反相硅胶柱分离的低极性部位均能显著上调α7 nAChR蛋白水平,并减弱β-淀粉样蛋白引起的细胞损伤。结论:灯盏细辛活性部位具有一定的神经保护作用,其机制之一可能与上调α7 nAChR有关。
- 邓婕闫秀明齐晓岚单可人黄勇王永林官志忠
- 关键词：灯盏细辛Β-淀粉样蛋白
- 灯盏乙素调节APPswe/PS△E9双转基因小鼠模型脑组织中差异蛋白的作用研究被引量：7
- 2017年
- 目的观察灯盏乙素(Scu)对模型小鼠脑组织中差异蛋白表达的影响,为深入研究其治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制奠定基础。方法以3月龄背景品系小鼠作为正常对照组,将3月龄APPswe/PS△E9双转基因阳性小鼠随机分为模型组和治疗组,用灌胃方法对治疗组实施给药处理;用Morris水迷宫行为学方法测试小鼠学习记忆能力;用iTRAQ技术进行蛋白质组学分析。结果 Scu改善了模型小鼠下降的学习记忆能力,发现了药物调控的9条通路和12种靶标蛋白。结论有效筛选出药物产生疗效的β淀粉样蛋白毒性相关的差异蛋白,提供了药物防治AD作用靶点上的新信息。
- 郭莉莉敖俊文于燕妮
- 关键词：灯盏乙素
- 突变型APP基因转染对神经细胞尼古丁受体的影响
- 2010年
- 目的探讨阿尔茨海默病（AD）发病机制中的重要物质淀粉样蛋白前体蛋白（APP）高表达对神经型尼古丁受体（nAChR）的影响。方法将含有瑞典家族性AD双突变的APP670／671基因（APPSWE）转入神经母细胞瘤（SH—SY5Y）细胞和原代培养的大鼠神经细胞，得到体外构建的高表达APPSWE细胞模型；用即时荧光定量PCR和Westernblot方法分别测定APPmRNA、可溶性APP和总APP蛋白表达水平以及nAChRmRNA和蛋白表达水平；用放射性配体[3H]epibatidine进行nAChR配体结合试验。结果转染APPSWE质粒的SH—SY5Y细胞和原代培养的神经细胞中APPmRNA和总APP蛋白表达水平显著升高，在SH—SY5Y细胞的培养液中检测到αAPP分泌量下降；SH-SYSY细胞转染组α7nAChR蛋白和tuRNA表达水平显著升高，而〈x3nAChR蛋白和mRNA表达水平明显下降，并且[3H]epibatidine配体结合位点明显减少；原代培养的神经细胞转染组甜nAChR蛋白水平明显下降，但其mRNA水平无明显变化。结论APP蛋白高表达使体外培养神经细胞中nAChR发生改变，其中α7nAChR表达水平升高，而含α3和讲亚单位的nAChR表达水平降低，表明APP代谢紊乱可对nAChR产生一定的影响，在AD的发病机制中有重要作用。
- 安宇唐智齐晓岚肖雁单可人官志忠
- 关键词：淀粉样Β蛋白前体神经母细胞瘤细胞培养技术
- β-细辛醚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织中差异蛋白表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察β-细辛醚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织中差异蛋白表达的调节作用,探讨其对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的治疗作用机制。方法实验动物分为正常对照组(C57BL/6J小鼠)、模型组(APPswe/PS1dE9小鼠)和β-细辛醚治疗组(APPswe/PS1dE9小鼠),每组10只。β-细辛醚治疗组用灌胃方法给药,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,历时90d。用Morris水迷宫行为学方法测试小鼠学习记忆能力,用免疫组织化学方法检测小鼠脑组织中β-淀粉样前体蛋白(APP)的表达。用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对小鼠脑组织进行蛋白质组学分析,用蛋白质印迹法鉴定差异蛋白H2A、H2B的表达。结果与模型组小鼠比较,经β-细辛醚治疗后,小鼠的逃避潜伏期和第1次穿越平台时间缩短(P<0.05),平台穿越次数增多(P<0.05),APP的表达减少(P<0.05),差异蛋白组蛋白H2A1-H、H2B2-E和H2B1-F/J/L的表达水平下降(P<0.05)。结论β-细辛醚能够介入到组蛋白的修饰过程而起到治疗作用,这可能是其改善β-淀粉样肽毒性所致学习记忆能力下降的机制之一。
- 郭莉莉王豫君敖俊文郭艳丽
- 关键词：阿尔茨海默病Β-细辛醚组蛋白类
- 核转录因子及炎性趋化因子在阿尔茨海默病患者脑组织中的改变被引量：5
- 2011年
- 目的 探讨核转录因子（NF） -κBp65、炎性趋化因子单核细胞趋化蛋白1（MCP-1/CCL-2）、巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1 α/CCL-3）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）等在阿尔茨海默病（AD）发病中的改变。方法 选择尸体解剖后的10例AD患者及8例对照脑组织，用免疫组织化学EnVision方法检测海马、大脑额叶及颞叶皮质中NF-κBp65、MCP-1、MIP-1α、GFAP和Aβ1-42的表达。结果 与对照组相比，AD患者脑组织海马、额叶和颞叶皮质等部位均显示神经细胞中NF-κBp65[每高倍视野（×400）阳性细胞数分别为3.6±1.5、2.2±1.2和2.2±1.2]表达较对照组（每高倍视野阳性细胞数分别为0.31±0.20、0.25±0.20和0.25±0.20）明显增高（P＜0.05）；MCP-1及MIP-1α在海马、额叶和颞叶皮质等部位神经细胞中（每高倍视野阳性细胞数分别为8.0±1.3、8.8±1.0、9.3±1.4；及8.1±1.5、12.5±1.1、6.4±1.1）表达均较对照组（每高倍视野阳性细胞数分别为4.5±0.9、4.5±0.6、4.0±1.8；及5.0±1.9、6.3±2.2、3.8±1.5）明显增多（P＜0.05）；GFAP显示的星形胶质细胞数增多（P＜0.05），并大量聚集在老年斑周围。相关系数分析表明，在AD脑组织中MCP-1、MIP-1α蛋白水平与NF-κBp65的改变有关。结论 AD脑组织中核转录因子及炎性趋化因子表达升高，NF-κBp65可能调节MCP-1和MIP-1α的表达，其机制可能与Aβ引起的炎性作用有关。
- 廖媛官志忠Rivka Ravid
- 关键词：阿尔茨海默病NF-ΚB趋化因子CCL2
