国家重点基础研究发展计划(2010CB535013)
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
- 相关作者：马依彤杨毅宁刘芬陈邦党李晓梅更多>>
- 相关机构：新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学第六附属医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同血糖水平缺血后适应下心肌缺血再灌注损伤差异及其机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨不同血糖水平对离体心脏缺血后适应下血流动力学、心梗面积的差异及其机制。方法 12周龄C57/BL雄性小鼠,利用Langendorff灌流装置建立小鼠心肌缺血后适应(IPC)模型。K-H缓冲液临用前配制,方案分正常葡萄糖水平组(NBG组):11.1mmol/L和高葡萄糖水平组(HBG组):22.2mmol/L,其他成分两组一致。IPC采用60min全心缺血,再灌注之前给予3次IPC循环,每次10s,再灌注120min。沿左心房置入顶端球囊测压导管进行心脏血流动力学检测;采用三苯基氯化四氮唑染色的方法确定心肌梗死范围;采用Western印迹检测心肌组织RISK信号通路。结果和NBG组比较,HBG组小鼠心脏血流动力学指标左心室收缩压(LVSP)显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),左室舒张末压(LVEDP)差异无统计学意义(P>0.05),心肌梗死范围增加,差异有统计学意义(P<0.01);两组ERK1/2信号通路显著抑制,Akt信号通路表达无明显差异。结论正常水平血糖较高血糖状态下进行缺血后适应处理更能有效地减轻心肌缺血再灌注损伤。
- 陈铀马依彤杨毅宁曹明宇刘芬陈邦党于子翔李晓梅贺春晖沈鑫
- 关键词：血糖缺血后适应再灌注损伤
- FrzA基因转导干预缺血性心力衰竭小鼠心肌Wnt信号通路的研究被引量：3
- 2013年
- 目的:研究重组9型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 9,rAAV9)携带FrzA基因转导干预缺血性心衰小鼠心肌Wnt信号通路的可行性,为基因治疗心力衰竭提供新的思路。方法:选择3月龄雄性C57BL/6J小鼠共130只,随机分为空白组(n=10),心衰组(n=40),心衰+空病毒(rAAV9-GFP)注射组(n=40),心衰+rAAV9-FrzA组(n=40),采用结扎左冠状动脉定量控制心梗面积,于术后2周行心脏超声评各组心功能变化,再经尾静脉注射已稀释好的病毒,28d后处死小鼠取心脏标本,RT-PCR检测心肌目的基因FrzA以及Dvl-1,β-catenin的表达;Western blot检测心肌Wnt信号通路关键分子Dvl-1,GSK3β,p-GSK3β,β-catenin的表达。结果:与空白组相比,成功建立心衰模型后小鼠心功能均不同程度降低(P<0.05);FrzA组与心衰组相比,心功能明显改善(P<0.05);经尾静脉注射可成功将rAAV9-FrzA导入小鼠体内,并且目的基因FrzA在心肌组织中高表达(P<0.05);心衰小鼠心肌中Wnt信号通路关键分子Dvl-1,p-GSK3β,β-catenin的表达显著升高(P<0.05),FrzA转导后小鼠心肌中Wnt信号通路中关键分子Dvl-1,p-GSK3β,β-catenin表达均降低(P<0.05)结论:利用rAAV9-FrzA转导缺血性心衰小鼠可以有效的干预心肌Wnt信号通路,抑制其活性,为基因治疗缺血性心衰提供了新的思路。
- 沈鑫马依彤杨毅宁刘芬于子翔陈邦党陈铀
- 关键词：心力衰竭WNT信号通路
- 脂肪干细胞的分离培养及成心肌诱导被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨脂肪干细胞的分离培养以及成心肌细胞分化的可能性,为脂肪干细胞治疗缺血性心脏病的应用提供理论依据。方法自SD大鼠提取脂肪组织,用酶消化法分离脂肪干细胞,培养于a-MEM培养基中。显微镜下观察细胞生长情况及形态特征,流式细胞仪检测脂肪干细胞表面分子的表达情况。用5-氮胞苷对脂肪干细胞进行诱导,显微镜下观察细胞生长情况及形态变化,免疫组织化学方法检测心肌特异性抗体-αActin的表达。结果分离培养的脂肪干细胞形态近似梭形,流式细胞仪检测结果显示CD90及CD105高表达,而CD34及CD45极低表达。经5-氮胞苷诱导后的脂肪干细胞呈类似心肌细胞的形态学特征,免疫组织化学检测结果见心肌特异性标志物-αActin表达阳性。结论脂肪干细胞具有较强的分化为心肌样细胞的能力,可以应用于缺血性心脏病细胞治疗的研究。
- 纪伟宁杨毅宁马依彤王宝珠刘芬陈邦党
- 关键词：脂肪干细胞心肌细胞诱导分化
- ERK1/2在缺血后适应减轻糖尿病小鼠心肌再灌注损伤中作用被引量：1
- 2011年
- 目的 研究缺血后适应对糖尿病小鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用及细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在缺血后适应心肌保护中的作用。方法将C57/BL小鼠随机分为6组:(1)空白对照组(N组);(2)缺血再灌注组(I/R组);(3)缺血后适应组(Post组);(4)糖尿病小鼠空白组(DN组);(5)糖尿病小鼠缺血再灌注组(D I/R组);(6)糖尿病小鼠后适应组(D post组)。观察后适应对心脏血流动力学、梗死心肌范围的影响及与ERK1/2表达水平的关系。结果与I/R组比较,左室舒张末期压力(LVDP)、左心室压力变化最大速率和最小速率(+dp/dtmax和-dp/dtmax)恢复率明显增加(P<0.05)。而D Post组与DI/R组比较上述变化均不明显(P>0.05)。Post组心肌梗死范围较I/R组显著减小(P<0.01),D Post与DI/R组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组小鼠体重、心重指数无明显差异。各组体外心脏组织中ERK1/2总蛋白表达无明显差异(P>0.05)。但与I/R组比较,Post组心肌磷酸化ERK1/2水平明显增加(P<0.01)。D Post组的心肌磷酸化ERK1/2水平与DI/R组比较未见明显增加(P>0.05)。结论缺血后适应能有效地减轻离体小鼠心肌再灌注损伤,改善心功能,而在糖尿病小鼠中,这种保护作用并不明显。糖尿病小鼠缺血后适应保护作用减弱可能与其不能明显激活ERK1/2有关。
- 刘芬杨毅宁马依彤陈邦党李晓梅向阳黄莺谢翔
- 关键词：缺血后适应小鼠心肌再灌注损伤
- 缺血后适应对压力超负荷肥厚心肌缺血再灌注损伤的影响
- 2011年
- 目的 探讨缺血后适应(IPost)在离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注(I/R)损伤中的保护作用及可能的作用机制。方法 12周龄C57/BL小鼠通过主动脉弓缩窄4周建立心肌肥厚模型,利用Langendorff灌流装置建立小鼠肥厚心肌I/R模型,稳定灌流10 min后分为3组,空白组(SH组,给予灌流液持续灌流150 min)、缺血再灌注组(I/R组,予30 min全心缺血随后再灌注120 min)、缺血后适应组(IPost组,予30 min全心缺血后,采取缺血10 s及再灌注10 s的3次IPost周期,再灌注120 min)。使用微球囊进行心脏血流动力学检测,采用三苯基氯化四氮唑染色的方法确定梗死心肌面积及生化法测定心肌酶、检测心肌细胞超微结构,TUNEL法检测心肌细胞的凋亡。结果与SH组I、/R组比较,IPost组小鼠心脏血流动力学指标LVSP、dp/dtmax显著改善,心肌梗死范围减小,心肌酶释放减少,调亡指数显著降低(P均<0.05)。与I/R组比较,IPost组透视电镜下心肌细胞线粒体损伤明显减轻。结论 IPost能通过减少心肌梗死范围、减少线粒体损伤、抗心肌凋亡而有效地减轻离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注损伤。
- 李晓梅安尼瓦尔.阿不里孜马依彤杨毅宁陈邦党刘芬张健发
- 关键词：缺血后适应心肌缺血再灌注损伤左室肥厚
- 重组9型腺相关病毒介导R65核酶基因转导对小鼠急性心肌梗塞后Wnt信号通路的影响
- 2011年
- 目的 探讨重组9型腺相关病毒(rAAV-9)介导R65核酶基因转导对小鼠急性心肌梗塞(AMI)后Wnt信号通路的影响。方法将3个月龄雄性C57/BL小鼠60只随机分为2组:AMI+R65组每日尾静脉注射携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)报告基因及R65核酶基因的rAAV9转染小鼠。AMI组每日按同等剂量注射rAAV9-eGFP,21d后结扎左冠状动脉,建立小鼠AMI模型。所有小鼠按心梗时间分3、7、14 d组,比较R65核酶干预后p65、糖原合成激酶(GSK)-3β总水平及磷酸化水平变化,β-联接蛋白(catenin)及缝隙通道连接蛋白(connexin)43表达。结果与AMI组相比,R65组p65表达降低,GSK-3β磷酸化比值3 d时降低,7 d及14 d时升高(P值均为0.000);AMI+R65组-βcatenin表达3 d时低于AMI组,7 d时高于AMI组(P值均为0.000);AMI+R65组connexin43表达明显低于AMI组,差异有统计学意义(P=0.000)。结论通过R65核酶过表达抑制NF-κB活性后Wnt信号通路相关蛋白活性发生变化,说明急性心肌梗塞后NF-κB信号通路与Wnt信号通路之间也存在"crosstalk"。
- 黄莺安尼瓦尔.阿不里孜马依彤杨毅宁刘芬陈邦党李晓梅
- 关键词：NF-ΚB信号通路WNT信号通路
- 不同年龄小鼠缺血性心力衰竭后心室重塑程度的比较被引量：4
- 2013年
- 目的:研究不同年龄小鼠缺血性心衰后心室重塑程度的变化。方法:选择3月龄和18月龄的雄性C57BL/6J小鼠共100只,每个月龄组50只,在2组中分别随机选取40只,结扎左冠状动脉定量控制心梗面积,建立稳定缺血性心衰模型,每组其余10只作为假手术组,于术后8周行心脏超声评价各组心功能变化;称量全心脏及左心室重量并计算左心室质量指数(LVMI);免疫组化检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,Masson染色检测心肌纤维化的程度并计算心肌间质胶原分数(CVF)。结果:与低龄组相比,老龄组心脏破裂率(18%vs 10%)和心力衰竭死亡率(22%vs 10%)均高于低龄组(P<0.05);老龄组心室腔明显增大,心率较快,左室短轴收缩功能障碍更明显(P<0.05);老龄组LVMI明显增加(P<0.05);老龄组CVF、Ⅰ型胶原的表达以及Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值显著高于低龄组(P<0.05)。结论:老龄小鼠缺血性心衰后心肌胶原分布异常,心室重塑程度更重,心功能降低更明显。
- 沈鑫马依彤杨毅宁刘芬于子翔陈邦党陈铀黄莺
- 关键词：心力衰竭心室重塑年龄胶原
- 原代乳鼠心肌细胞培养方法的改进被引量：20
- 2014年
- 目的通过对传统乳鼠心肌细胞体外培养的条件、方法进行改进，得到纯度高、活力好、结构功能完整的心肌细胞。方法改进心室肌组织剪切方法，分别用胰酶、Ⅱ型胶原酶依次消化分离心肌组织，严格要求所需溶液pH值，差速贴壁法和化学抑制法相结合纯化心肌细胞。结果心肌细胞12h后开始贴壁生长，24h出现单个细胞自发性搏动，48h部分心肌细胞间形成交联，72h心肌细胞黏合成簇，96h后细胞伪足相互接触交织成密集的网，形成放射状排列的细胞簇，可见岛屿样搏动。细胞存活率、纯度均达98％以上。结论此种方法培养的心肌细胞纯度高、活力好、结构及功能完整，是一种可靠的原代乳鼠心肌细胞培养方法。
- 陶静马依彤李晓梅杨毅宁马翔陈邦党刘芬陈小翠盖敏涛
- 关键词：肌细胞心脏细胞培养技术
