山西省青年科技研究基金(2007021052)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：杨涛乔振华杨林花叶芳朱镭更多>>
- 相关机构：山西医科大学第二医院山西省儿童医院更多>>
- 发文基金：山西省青年科技研究基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 协同刺激因子在移植物抗宿主病发生中作用的初步研究
- 2010年
- 目的 探讨协同刺激因子（CM）在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）相关移植物抗宿主病（GVHD）中的作用.方法根据预处理方案不同,将21例行 allo-HSCT的血液病和实体瘤患者分为A组（NST组）和B组（清髓性HSCT组）;所有患者在移植前后不同时间,应用流式细胞术（FCM）检测外周血CD＋4T细胞表面CM（CD28、CD80、CD152）的表达;用短串联重复序列聚合酶链反应（STR-PCR）方法检测微卫星嵌合体形成.结果21例患者移植后均获得造血功能重建,经STR-PCR检测均转为混合嵌合体（MC）或完全嵌合体（CC）;不同预处理方案GVHD发生率差异无统计学意义（x2=3.711,P=0.144）;COX回归分析结果显示：CD4＋;CD152＋能明显影响GVHD发生（x2=13.128,P＜0.0001）;术后,外周血T细胞表面CD4＋;CD28＋、CD4＋;CD80＋表达逐渐增高,GVHD时达高峰,经过治疗和控制GVHD后,逐渐下降;而T细胞表面CD4＋CD152＋表达则逐渐降低,GVHD时最低,经治疗和控制GVHD后,又逐渐上升.结论清髓性HSCT和NST的GVHD发生率无差别;T细胞表面CM的表达与GVHD发生有关,并且在清髓性HSCT和NST的表达不同;B7-CD28/CD152共刺激途径在GVHD发生中起重要作用.
- 叶芳乔振华杨涛朱镭杨林花
- 关键词：造血干细胞移植协同刺激因子移植物抗宿主病
- 间充质干细胞对活化T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：4
- 2008年
- 本研究的目的是探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对活化T淋巴细胞的免疫调节作用及其在allo-HSCT相关GVHD防治中的作用。用终浓度为10μg/ml的PHA于不同时间作用T淋巴细胞,以3H-TdR掺入法检测T细胞增殖功能;以不同数量的MSC分别与活化T淋巴细胞作用,根据MSC数量不同实验分为A组(对照组,不加MSC)、B组(MSC 2×104)、C组(MSC 4×104)、D组(MSC 8×104),用3H-TdR掺入法检测作用前后T细胞功能,FCM检测细胞免疫表型。结果显示,在终浓度为10μg/ml PHA作用下,T淋巴细胞的增殖能力随培养时间的延长而增强,48小时达高峰。FCM检测MSC细胞表型表明:CD44、CD105、CD29、FIK1表达阳性,不表达CD33、CD34、CD45、HLA-DR。随着MSC数量增加,与共培养前相比,T细胞的SI值逐渐降低(p<0.05),但C组和D组间比较无差异(p>0.05)。在低数量MSC作用下,CD3+CD4+表达低于对照组(p<0.05),CD4+CD25+、CD4+CD152+高于对照组(p<0.05);C组和D组与对照组相比,CD3+CD4+表达明显降低(p<0.01),CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD4+CD152+明显增高(p<0.01)。结论:丝裂原PHA可以使T细胞活化;骨髓MSC在体外可以使活化T细胞功能和细胞免疫表型发生改变,下调CD3+CD4+的表达,上调CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD4+CD152+的表达。
- 叶芳乔振华朱镭杨涛杨林花
- 关键词：间充质干细胞T淋巴细胞CD4^+CD25^+T细胞
- 人类Survivin基因真核表达载体的构建及其在K562细胞中的表达
- 2009年
- 目的 构建带有绿色荧光蛋白的Survivin基因真核表达载体pIRES2-EGFP／Survivin，并转染K562细胞。方法 以 pDNR／Survivin质粒为模板，PCR扩增Survivin基因，T-A 克隆，亚克隆至pIRES2-EGFP上，并对重组表达载体进行酶切、测序鉴定。采用Superfect转染试剂转染K562细胞。提取细胞RNA，RT-PCR检测Survivin基因mRNA表达。结果 经限制性酶切鉴定及测序分析证实pIRES2-EGFP／Survivin载体序列正确；荧光显微镜下可见转染的K562细胞有绿色荧光蛋白的表达，RT-PCR证实转染细胞中存在Survivin基因mRNA的表达。结论 pIRES2-EGFP／Survivin表达载体构建成功，并在K562细胞内成功表达。
- 叶芳张岚杨涛乔振华杨林花
- 关键词：SURVIVIN基因真核表达载体转染K562细胞
