国家自然科学基金(31270061) 作品数:11 被引量:50 H指数:5 相关作者: 蒋冬花 谢祥聪 齐育平 陈璨 孙蕾 更多>> 相关机构: 浙江师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 农业科学 更多>>
色素生物合成相关PigE基因的缺失对紫色红曲霉Mp-21黄色素种类和产量的影响(英文) 被引量:5 2019年 红曲色素(MPs)是红曲霉次生代谢过程中产生的具有多种生物活性的天然色素,广泛应用于食品、化妆品和保健品行业。[目的]本研究从紫色红曲霉Mp-21中克隆了一个红曲色素产生相关PigE基因,并对其功能进行了鉴定。[方法]利用同源重组原理对PigE基因进行敲除,从表型、显微结构、生长速率、红曲色素、桔霉素等方面分析基因缺失前后的生物学特征变化。[结果] PigE基因的缺失主要导致黄色素产量的提高和种类的增多。与野生型Mp-21菌株以产生红色素为主的色素混合物相比,△PigE丧失了产生红色素的能力,并且新产生了至少5种新的黄色素。△PigE液体发酵13 d后,红曲色素的总色价达到了3548.2 U/g,约为野生型Mp-21菌株的4.82倍;而△PigE桔霉素的产量没有显著变化,但产生的时间延迟。[结论] PigE基因的缺失可能阻断了黄色素向橙色素的转化途径,使△PigE更趋向于黄色素的形成。由于红色素的形成需要较复杂的条件,如培养基中的氨基酸和适宜的pH值等,△PigE更倾向于先合成黄色素,丧失了产生红色素的能力。本研究为高产黄色素基因工程红曲霉菌株的构建提供了一种可能的途径。 王嘉琦 张琪 江北 吕梦霞 蒋冬花关键词:红曲霉 红曲色素 基因缺失 黄色素 基于RNA-Seq分析MpigE在红曲霉色素生物合成中的转录调控 被引量:1 2021年 【目的】分析MpigE的缺失在转录水平对红曲色素产生的影响。【方法】对实验室保存的野生型紫色红曲霉(Monascus purpureus)Mp-21和△MpigE菌株进行高通量转录组测序、注释、表达差异基因功能富集分析和基因通路富集分析,在转录水平揭示MpigE缺失后红曲霉色素产量变化的原因。【结果】通过RNA-Seq测序,每个样品获得7.5–8.5 Gb的原始数据,经过拼接后得到7219个转录本(Unigenes),其中成功注释的为5692个。差异基因表达富集分析发现基因缺失菌株△MpigE相较于野生型菌株Mp-21上调差异基因达到199个,下调差异基因为293个。【结论】MpigE的缺失能够促进红曲霉中中央碳代谢和乙酰辅酶A代谢相关基因的表达以此影响色素生物合成。 倪峰 丁允章 马静静 王嘉琦 蒋冬花关键词:红曲霉 红曲色素 基因缺失 代谢调控 BP神经网络和遗传算法在乳酸菌发酵参数优化中的应用 被引量:5 2014年 为提高短乳杆菌L2菌株γ-氨基丁酸(GABA)的产量,建立了一个反映因素与产量之间的非线性关系模型.运用Plackett-Burman设计、中心组合试验设计(CCD)对MRS培养基组成和培养条件进行了优化,筛选出4个影响发酵的关键因素:蛋白胨、葡萄糖、谷氨酸钠、初始pH.在此基础上,采用误差反向传播神经网络(BPN)和遗传算法(GA)确定了4个关键因素的适宜参数:蛋白胨21.185 g/L,葡萄糖3.857 g/L,谷氨酸钠48.948 g/L,初始pH 4.05.最终使短乳杆菌L2菌株的GABA产量达到了27.765 g/L,比原始MRS培养基的13.452 g/L提高了106.4%.研究表明利用BPN-GA方法进行发酵条件优化是一种行之有效的途径. 高爱同 毕珂 齐育平 蒋冬花抗水稻白叶枯病菌植物内生真菌的筛选、鉴定 被引量:3 2013年 从多种植物叶片内分离、纯化出31株植物内生真菌,活性筛选表明分离自健康水稻叶片内生真菌Bo-1菌的乙酸乙酯粗提物对水稻白叶枯病菌具有较强的抑菌活性。当供试浓度为100μg/mL时,Bo-1菌乙酸乙酯粗提物对水稻白叶枯病菌抑菌圈为22.4 mm,与同浓度的氯霉素对水稻白叶枯病菌的抑菌效果相当。通过形态学特征观察和ITS rDNA测序分析,Bo-1菌被鉴定为淡色生赤壳菌(Bionectria ochroleuca)。抗菌谱实验表明,Bo-1菌对多种细菌类病原体具有较强的拮抗能力。 刘琴英 谢祥聪 齐育平 陈璨 蒋冬花关键词:水稻白叶枯病菌 内生真菌 抑菌活性 1株拮抗水稻纹枯病菌鼠乳杆菌的筛选与鉴定 被引量:2 2013年 采用平板对峙法从浙江省金华市水稻田土壤中筛选获得1株拮抗水稻纹枯病菌的细菌QT-0304菌株,最大拮抗带宽达到20 mm。根据形态特征、生理生化特征、16S rRNA基因比对及进化树构树分析,鉴定QT-0304菌株为鼠乳杆菌(Lactobacillus murinus)。抗菌谱实验结果表明:QT-0304菌株对苹果腐烂病菌(Valsa mali)和杨树溃疡病病菌(Botryosphaeria dothidea)均有较好的抑制作用,拮抗带宽分别达到34.5 mm和23.0 mm。 齐育平 陈丹凤 黄樟阳 陈露 蒋冬花关键词:纹枯病菌 一株高效聚磷菌解角质素微杆菌的分离、鉴定及其除磷条件优化 被引量:2 2015年 利用蓝白斑法从金华市市郊池塘的水体样品中分离筛选得到1株高效聚磷MK-6菌株。经鉴定,MK-6菌株为解角质素微杆菌(Microbacterium keratanolyticum)。对MK-6菌株的培养条件和合成污水培养基配方进行综合优化,结果表明,该菌株的适宜除磷条件为:初始p H值6.0,装液量40.0 m L,温度30℃,转速220 r/min,接种量10%,醋酸钠浓度600 mg/L,且适宜浓度的铜离子、铅离子和钾离子对该菌株的除磷起着促进作用。经优化,该菌株对改良后合成污水(PO43--P浓度为14.9 mg/L)的去磷率达到了70.81%。该菌株的获得,对于扩大聚磷菌菌种库、防治富营养化具有实际意义。 谢祥聪 吴巧玉 冯青青 蒋冬花关键词:聚磷菌 高产色素红曲霉菌株的筛选、鉴定和固体发酵条件优化 被引量:14 2015年 从全国各地民间收集的红曲米中分离筛选到1株高产红曲色素的红曲霉Mp-41菌株,依据形态和ITS序列鉴定该菌株为紫色红曲霉(Monascus purpureus)。对Mp-41菌株的固体发酵基质和发酵条件进行响应面优化。结果表明,Mp-41菌株产生红曲色素的适宜条件为:以籼米为固体发酵基质,初始含水量44.81%,初始p H 6.0,培养温度32℃,接种量为2.65 m L·30g-1,发酵时间为10.19 d。在此条件下,Mp-41菌株发酵生产红曲米色价最高,可达5 340.4 U·g-1,为市售红曲米色价的2~3倍。 蒋冬花 孙蕾 陈璨 谢祥聪 嵇豪关键词:红曲霉 红曲色素 固体发酵 棒曲霉转化子库的构建和产孢相关flbA基因的克隆及功能分析 棒曲霉(Aspergillus clavatus)是一种常见的土壤真菌,广泛分布于气候较暖的土壤中,它也广泛地分布在一些食物中,为小型丝状真菌,属于曲霉属的真菌。棒曲霉在室内的环境中其实并不常见,然而,它经常与酿酒业联系... 吕梦霞关键词:基因功能 淡色生赤壳菌Bo-1菌株拮抗物质的分离纯化、解析及活性分析 被引量:8 2014年 从浙江省金华市郊水稻内生菌中筛选到1株拮抗水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)P6生理小种的淡色生赤壳菌Bionectria ochroleuca Bo-1菌株。该菌株的菌体和发酵液对Xoo P6生理小种均表现出较强的拮抗能力。以P6生理小种作为指示菌进行活性跟踪,通过分步萃取、硅胶柱层析、高效液相色谱等,分离纯化获得拮抗活性物质结晶;对所获得的结晶物进行核磁共振氢谱分析和质谱分析,通过解析与比对,该物质分子量为344.0835,分子式为C_(18)H_(16)O_7,鉴定为松萝酸(usnic acil)。将纯化的松萝酸以20%叶枯唑(bismerthiazol)和3%中生菌素(zhongshengmycin)为对照,采用96孔板法测定对Xoo P6生理小种的抑菌活性,最低抑制浓度为200μg/mL,表明松萝酸具有较强的抑菌活性,但较中生菌素弱,与20%叶枯唑效果相近。 刘琴英 蒋冬花 齐育平 陈璨 谢祥聪 孙蕾关键词:水稻白叶枯病菌 分离纯化 松萝酸 淡色生赤壳菌(Bionectria ochroleuca)Bo-1菌株产生抗菌物质的发酵条件优化 被引量:5 2014年 以淡色生赤壳菌(Bionectria ochroleuca)Bo-1菌株发酵液乙酸乙酯粗提物对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)抑菌活性为检测指标,采用单因素试验优化Bo-1菌株产生抗菌物质培养所需的碳源、氮源、无机盐;通过正交试验优化培养基配方和摇瓶发酵条件。研究结果表明,Bo-1菌株产生抗菌物质适宜的碳源、氮源和无机盐分别为淀粉、蛋白胨、MgSO4·7H2O;优化的培养基配方为:淀粉30 g/L,蛋白胨2 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L;适宜的发酵条件为:温度30℃,转速150 r/min,装液量80 mL/250 mL,pH 6.5。 刘琴英 蒋冬花 齐育平 孙蕾 陈璨 谢祥聪关键词:正交试验 发酵 抑菌活性