国家自然科学基金(30870911)
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
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- 相关机构：汕头大学北京大学中国人民解放军总医院第一附属医院更多>>
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- 几种重金属化合物对血管内皮细胞的毒性研究被引量：7
- 2012年
- 目的探讨几种重金属化合物对血管内皮细胞的毒性作用。方法以人脐静脉内皮细胞株CRL-2480为研究对象,与不同浓度(0、0.05、0.1、0.5、1、5、10、20μmol/L)氯化锰(MnCl2)、氯化镉(CdCl2)、乙酸铅[(C2H3O2)2Pb]、氯化镍(NiCl2)、氯化铬(CrCl3)或三氧化铬(CrO3)分别孵育12、24、487、2 h后,MTT法检测细胞活性。此外,荧光法检测氯化镉孵育24 h对内皮细胞骨架F-actin的影响。结果除氯化镍外,其他几种重金属化合物在0.05～20μmol/L的作用浓度下对血管内皮细胞具有不同程度的毒性作用,并呈时间及剂量依赖性;其中以+6价铬(Ⅵ)及镉对细胞毒性最强。氯化镉可引起细胞骨架重排、破坏。结论锰、镉、铅、铬(Ⅲ)及铬(Ⅵ)均对血管内皮细胞具有毒性作用,长期摄入重金属污染的水产品可能与心血管疾病的发生发展有关。
- 林哲绚罗红军李慧张源罗文鸿
- 关键词：重金属内皮细胞毒性细胞骨架
- 氨基脲敏感型胺氧化酶在心肌缺血再灌注损伤中的作用(英文)
- 2009年
- 目的研究抑制氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)是否可缓解心肌缺血再灌注(I-R)损伤。方法SD雄性大鼠随机分为4组,每组10只。假手术组:左冠状动脉(LCA)穿线不结扎;假手术+氨基脲组:结扎前10min给予氨基脲(30mg·kg-1,ip)处理,LCA穿线不结扎;I-R组:LCA结扎致缺血30min,再灌注180min;I-R+氨基脲组:缺血前10min给予氨基脲(30mg·kg-1,ip),随后缺血30min,再灌注180min。采用四氮唑蓝染色法测定心肌梗死范围;吸光度法测定血浆肌酸激酶(CK)和髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)和羟自由基含量;高效液相色谱法测定血浆SSAO酶活性;HE染色法进行心肌组织病理学观察。结果与假手术组比较,假手术+氨基脲组各指标均无明显变化;I-R组血浆MPO和SSAO活性、MDA和羟自由基含量均升高,出现明显心肌梗死。与I-R组比较,I-R+氨基脲组心肌梗死范围明显减小,由(43.2±3.1)%减小到(27.7±3.7)%;血浆MPO活性及MDA和羟自由基含量均降低,分别由(27.5±9.3)μmol.min-1.L-1,(2.6±0.4)mmol·L-1和(628±50)mmol.min-1.L-1降低到(14.2±5.6)μmol.min-1.L-1,(1.7±0.5)mmol·L-1和(503±88)mmo.lmin-1.L-1;组织病理学观察结果表明,心肌组织白细胞聚集减少。结论心肌I-R损伤导致血浆SSAO酶活性升高,抑制SSAO酶活性可缓解心肌I-R损伤。
- 杨伟李慧林哲绚罗文鸿
- 关键词：再灌注损伤心肌活性氧族
- 免疫荧光技术中不同固定剂对细胞p65核移位观察效果的影响被引量：6
- 2012年
- 目的观察免疫荧光技术中不同固定剂以及Triton X-100不同渗透时间对小鼠腹腔巨噬细胞p65蛋白核移位的影响,找出最适合观察p65蛋白移位的固定方法及Triton X-100渗透时间。方法采用免疫荧光的方法观察使用不同固定剂(甲醇,1%～4%甲醛)固定,0.1%Triton X-100渗透3～15min的条件下,观察脂多糖刺激2h后,p65蛋白细胞内定位的情况。结果 p65蛋白在对照细胞主要定位于细胞质,脂多糖(LPS)刺激后p65蛋白移入胞核。甲醇固定后细胞荧光染色显色很弱且核区不明显,染色弥散;1%、2%甲醛固定不良可引起细胞收缩;4%甲醛固定后,核区与胞质p65蛋白荧光染色对比明显。0.1%Triton X-100作用3～5min效果最佳,而作用10～15min对照细胞核内也有较强荧光。结论本实验表明,在免疫荧光技术中采用4%甲醛固定20min,0.1%Triton X-100渗透3～5min可更好的观察LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞p65核移位。
- 林哲绚罗红军李慧张源罗文鸿
- 关键词：免疫荧光测定巨噬细胞
- 石墨炉原子吸收光谱法测定镉中毒小鼠尸体中大头金蝇体内的镉和金属硫蛋白被引量：1
- 2012年
- 目的：研究尸食性蝇类大头金蝇体内的镉（Cd）浓度能否反映所寄生尸体生前的Cd投毒量。方法：大头金蝇初产卵接入Cd中毒小鼠尸体,分别于产卵后3 d（幼虫）、7 d（幼虫）、9 d（蛹）收集幼虫（蛹）样本,用微酸量消化处理测Cd,用Cd-血红蛋白饱和法处理测金属硫蛋白（MT）。塞曼效应校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定。结果：方法检出限分别为：Cd0.024μg/L和MT 0.027μg/L。回收率实验分别为Cd 94.3%~105.0%,MT 90.2%~108.0%。大头金蝇幼虫随着生长时间增加Cd蓄积也增加,但蛹期Cd浓度减少,MT表达也表现类似规律,各个生长期的Cd浓度与投毒量呈线性相关。结论：检测昆虫体内的Cd,可用于判断尸体生前摄入的Cd是否达到致死量。
- 林哲绚张源罗红军朱光辉李慧罗文鸿
- 关键词：大头金蝇镉金属硫蛋白石墨炉原子吸收光谱
- 脂肪干细胞促进人表皮角质形成细胞创面模型愈合的研究被引量：8
- 2008年
- 目的探讨脂肪干细胞（ADSCs）促进人表皮角质形成细胞（HEKa）创面模型愈合的可能性。方法体外培养大鼠ADSCs（rADSCs）（n=10）。实验组为rADSCs与HEKa直接共培养组（n=10），对照组为在transwell培养板建立的rADSCs与HEKa间接共培养（间接组，n=8）和单纯HEKa培养组（单纯组，n=8）。刮擦生长融合成片的HEKa细胞制备创面。培养24、48、72h后，计数迁移到创面的HEKa细胞数量并计算创面愈合率，检测HEKa细胞吸收脱氧胸腺嘧啶核苷的放射活性以判定HEKa细胞的增殖活性。结果实验组、间接组、单纯组在伤后24h分别有（9．2±0．2）、（5．0±0．3）、（4．2±0．3）个细胞／高倍视野；48h分别有（58．5±0．4）、（26．5±0．3）、（20．7±0．5）个细胞／高倍视野；72h分别有（125．8±0．4）、（43．0±0．5）、（35．6±0．5）个细胞／高倍视野越过创缘进入创面，实验组均明显优于两对照组（P〈0．05）。三组创面愈合率在伤后72h分别为61．0％±3．0％、35．0％±2．5％、32．0％±2．1％，实验组均明显优于两对照组（P〈0．05）。脱氧胸腺嘧啶核苷掺入培养基法表明三组HEKa细胞的放射性强度为（1440±210）、（1050±280）、（1130±390）cpm／10^5细胞，实验组与两对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论rADSCs通过直接接触促进HEKa细胞的分裂增殖和迁移。
- 袁方雷永红付小兵盛志勇蔡飒孙同柱
- 关键词：脂肪干细胞细胞培养创面愈合
- 氨基脲敏感型胺氧化酶介导的甲胺代谢产物对成纤维细胞的毒性作用
- 2009年
- 目的：研究氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）催化甲胺（MA）产生的代谢产物对大鼠皮肤成纤维细胞（RSFCs）的毒性作用。方法：原代分离培养新生SDRSFCs，用高效液相色谱法检测细胞及培养基酶活性。MTT法检测细胞经过不同浓度MA和不同活性SSAO处理后的细胞活力，β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老。结果：当SSAO为1．02×10^-3u／mL时，成纤维细胞活力随着培养体系中MA浓度的升高（0．2—1．0mmol／L）而降低。当MA为1．0mmol／L时，随着酶活性的增高（0．6×10^-3-1．58×10^-3u／mL），细胞活力逐渐降低。给予SSAO抑制剂氨基脲或肼届嗪可显著抑制细胞活力下降。给予抗氧化剂谷胱苷肽可显著提高细胞活力，并显著降低培养基中甲醛浓度（P〈0．05）；如同时给予过氧化氢酶和谷胱苷肽，则细胞活力升高更明显。此外，0．2mmol／LMA作用3代，可引起肛半乳糖苷酶染色增强。结论：SSAO催化的MA氧化对RSFCs有明显的毒性作用，这种毒性作用由其代谢产物引起；在SSAO催化下低浓度MA可能与细胞衰老有关。
- 匡薇林哲绚李慧罗文鸿
- 关键词：皮肤成纤维细胞毒性衰老
- SSAO抑制剂对LPS诱导的巨噬细胞p65核移位的影响
- 2012年
- 目的研究肼屈嗪(HYD)、氨基脲(SEM)、LJP1207、氨基胍(AMI)及二溴乙胺(BEA)五种不同的氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)抑制剂对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB p65蛋白核移位的影响。方法分离培养Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞,分别加入含0、10、50、100、200、500μm HYD、SEM、LJP1207、AMI或BEA的培养基,同时加入LPS使之终浓度为10μg/m1,作用2 h。免疫荧光法观察几种SSAO抑制剂对LPS诱导的NF-κB p65移位的影响。结果静息状态巨噬细胞p65主要定位于胞浆中,LPS可引起小鼠巨噬细胞p65核移位。HYD、SEM、AMI、BEA、LJP1207均对LPS诱导的p65核移位有不同程度的抑制作用。结论 SSAO抑制剂可抑制LPS诱导的巨噬细胞p65核移位,该作用可能与其抗炎作用有关。
- 林哲绚李慧罗红军罗文鸿
- 关键词：抑制剂脂多糖P65
