国家自然科学基金(30870909)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- RyR2-shRNA重组慢病毒载体的构建及其对离体心肌细胞RyR2基因表达的影响
- 2012年
- 目的构建携带RyR2-shRNA的慢病毒载体,并检测其对小鼠离体心肌细胞中RyR2的基因沉默效果。方法设计并合成针对小鼠RyR2基因的shDNA,克隆入含U6启动子和EGFP报告基因的慢病毒载体psiHIV-U6-eGFP,构建表达RyR2-shRNA的慢病毒载体,通过将慢病毒转移质粒和包装质粒共转染293T细胞,得到重组慢病毒载体颗粒,然后离体感染小鼠心肌细胞,采用Real-timePCR检测RyR2在mRNA水平的沉默效应。结果经测序证实RNAi慢病毒载体构建成功并成功包装。流式细胞仪测得重组慢病毒感染小鼠心肌细胞的阳性率达80%以上。Real-timePCR证实,重组慢病毒Lenti-siRyR2感染的小鼠心肌细胞中RyR2在mRNA水平基因抑制率达90%以上。结论成功构建了表达RyR2-shRNA的重组慢病毒表达载体,并在小鼠心肌细胞中实现有效的基因沉默效应。
- 王前段萍朱涵穆永慧赵伟达王志举章茜
- 关键词：慢病毒载体RNA干扰新生小鼠
- Ryanodine受体通道的分子调控与心脏疾病被引量：1
- 2010年
- Ryanodine受体通道在心肌细胞中具有独特的分子结构、电生理学和药理学特性,在调节心肌细胞收缩耦联中起重要作用,为治疗心力衰竭和心律失常提供了新思路。
- 陈芸章茜
- 关键词：分子特征心脏疾病
