山东省自然科学基金(Q2006C08)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
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- 血管内皮细胞生长因子165基因转染对兔骨缺损修复的影响被引量：7
- 2007年
- 目的构建 pcDNA3.1-血管内皮细胞生长因子(VEGF)165质粒,观察其对兔骨缺损修复的影响。方法构建成重组真核表达质粒 pcDNA3.1-VEGF165;采用30只新西兰大白兔,制备双侧桡骨骨缺损模型,实验组以体积等大的明胶海绵置于创腔,局部直接注射稀释的质粒液200 ng;对照组以同量生理盐水代替质粒液,同法处理。于术后1、2、4、6、8和12周行 X 线照片后获取标本,观察缺损局部组织修复及新生血管并计算微血管密度(MVD)。结果 pcDNA3.1-VEGF165质粒构建成功,测序正确。术后 X 线:1周时两组无明显差别,实验组2周骨痂形成、骨质修复,12周时骨质已正常,对照组表现为修复迟缓;HE 染色:实验组2周大量新生血管形成、通血,4周成骨细胞大量增殖、骨小梁形成,12周骨皮质改建完成,骨髓腔再通;对照组经历过程类似,但相对时间延迟,12周时骨髓腔及皮质改建尚未完成。2周时对照组及实验组 MVD 分别为56.1±6.1、69.1±5.4,均较1周时42.2±6.4、47.0±7.5时增加,组间及组内间差异有统计学意义(t=8.0347,P=0.0000)。结论骨缺损局部直接应用 PcDNA3.1-VEGF165质粒液后,可表达并上调 VEGF165,具有促进局部微血管形成、加快骨缺损修复的作用。
- 赵冬梅杨加峰武士清邱丽萍刘军莉王海斌许复郁蔡景龙
- 关键词：基因转移内皮血管内皮细胞生长因子
- pcDNA3．1-血管内皮生长因子165质粒局部注射对大鼠软组织缺损修复的影响被引量：2
- 2008年
- 背景:目前关于血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在创伤及整形外科领域主要集中在骨折及组织工程化材料等方面,在软组织损伤方面报道不多。目的:构建的pcDNA3.1-VEGF165质粒,直接注射于大鼠软组织缺损局部,探讨其对软组织缺损修复的影响。设计、时间及地点:于2004-09/2006-01在山东大学动物实验中心和分子生物学实验室完成自身对照观察实验。材料:健康SD大鼠30只。方法:Trizol法提取兔组织中总RNA,反转录合成VEGF165cDNA序列,将此基因片段与pMD18-T构建真核表达载体,双酶切,在T4DNA连接酶作用下,再与pcDNA3.1载体构建成重组真核表达质粒pcDNA3.1-VEGF165;采用SD大鼠30只,于脊背后部两侧对称部位制备圆形全层皮肤(直径15mm)、肌肉(切除2mm厚肌肉)软组织缺损,两创缘相距4cm;选择一侧为实验组,直接注射0.2mL(含200ng)质粒液,对侧为对照组,以等量生理盐水同法处理。主要观察指标:创面愈合、血管生成及局部胶原表达。结果:30只均进入结果分析。①经赵冬梅等的方法鉴定,pcDNA3.1-VEGF165质粒构建成功。②质粒液局部注射后实验组创面愈合时间早于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组术后7,14d微血管密度高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。③实验组3d即有Ⅲ型胶原表达,14d达高峰,30d时略有降低。对照组Ⅲ型胶原表达部位和趋势与实验组一致,只是时间延迟。结论:pcDNA3.1-VEGF165质粒局部注射可促进软组织缺损区血管生成和细胞外基质合成,加速创面愈合。
- 杨加峰武士清赵冬梅刘军莉邱丽萍王海斌许复郁
- 关键词：基因转染血管内皮细胞生长因子胶原
