江苏省高校自然科学研究项目(08KJB320001)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- CD40 siRNA阻断CD40-CD40L轴对HUVEC增殖及迁移的影响
- 2010年
- 目的探讨小干扰RNA(si RNA)阻断CD40-CD40配体轴对体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及迁移的影响。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法培养人脐静脉内皮细胞,以3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)、3H-亮氨酸(3H-Leu)掺入法分别测定HUVEC增殖,采用琼脂糖凝胶刮取法,倒置显微镜观察HUVEC迁移。结果 CD40配体能明显促进HUVEC3H-TdR、3H-Leu的掺入并显著增加HUVEC迁移率,CD40si RNA能明显抑制上述效应,且呈浓度依赖效应,而最佳预处理细胞时间在48h。结论 CD40siRNA能明显抑制CD40-CD40L相互作用引起的HUVEC增殖和迁移。
- 严金川王标徐良洁杨萍王翠平
- 关键词：CD40配体内皮细胞小干扰RNA
- CD40-RNAi阻断CD40-CD40L轴对ApoE^(-/-)小鼠血小板功能的影响
- 2011年
- 目的:观察CD40-RNAi抑制CD40-CD40L相互作用对ApoE-/-小鼠血小板功能的影响。方法:将ApoE-/-小鼠分为anti-CD40L抗体组、CD40-RNAi组及对照组,应用流式细胞术分别检测血小板膜上表达P-选择素(CD62P)水平及血小板-单核细胞聚集率。结果:ApoE-/-小鼠anti-CD40L抗体组(15.6±3.3,MFI)及CD40-RNAi组(10.7±2.7,MFI)血小板膜表达CD62P水平明显较对照组低(21.8±3.6,MFI);同时发现血小板-单核细胞聚集率anti-CD40L抗体组(11.2±2.3)%及CD40-RNAi组(6.2±2.7)%较对照组低(19.3±2.6)%。ApoE-/-小鼠CD40-RNAi干预前血小板表达CD40水平(67.3±11.3,MFI)明显高于干预后(6.5±1.9,MFI)。结论:CD40-RNAi通过阻断CD40-CD40L相互作用抑制血小板活化功能。
- 严金川杨萍徐良洁王标
- 关键词：动脉粥样硬化CD40血小板RNA干扰
- SiRNA阻断CD40-CD40L对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨阻断CD40-CD40L相互作用对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法:采用ApoE-/-小鼠颈动脉硅胶圈植入法快速制作斑块模型,分别应用特异性CD40L抗体及高效siRNACD40慢病毒基因片段干预小鼠,4周后观察斑块形成(HE染色法)。结果:CD40L抗体100μg/100μl PBS注射ApoE-/-小鼠组颈动脉斑块面积较对照组减少48.3%,siRNACD40慢病毒基因片段组小鼠颈动脉斑块面积减少58.6%。结论:高效siRNACD40基因片段能通过阻断CD40-CD40L抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成。
- 严金川杨萍徐良洁王标袁伟
- 关键词：CD40动脉粥样硬化小鼠
- 高效小鼠CD40siRNA基因片段的筛选及对淋巴细胞CD40基因表达的影响
- 2010年
- 目的:应用RNA干扰技术筛选高效小鼠CD40siRNA基因序列片段。方法:体外化学合成小鼠CD40基因为靶标的siRNA3对(siCD40-1、siCD40-2、siCD40-3),通过脂质体瞬时转染小鼠脾淋巴细胞(实验组),并分别以转染无关siRNA片段及未转染细胞作为对照(对照组)。分别采用流式细胞术、实时荧光定量PCR检测转染24 h细胞表面CD40抗原、CD40 mRNA表达,蛋白质印迹检测转染48 h蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,实验组CD40抗原表达、CD40 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.01);3对实验组siRNA能明显抑制CD40基因表达,抑制率分别为69%、78%和41%,差异有统计学意义(P<0.05)。而各对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:siRNA可抑制小鼠淋巴细胞表达CD40,并具有良好的特异性,其中siRNA-2为最高效干扰片段。
- 严金川杨萍龚杰王标徐良洁
- 关键词：淋巴细胞CD40
