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CM-DiI示踪人脐血源基质细胞体内迁移定位的研究被引量：1: 2009年; 目的:课题组前期实验发现人脐血源基质细胞(hUCBDSC)体外具有促进造血细胞集落扩增的能力,文中拟采用CM-DiI荧光标记技术,观察hUCBDSC移植后的归巢、定位和增殖情况。方法:传代培养hUCBDSC,CM-DiI荧光染料预染后经尾静脉输入BALB/c-nu/nu裸鼠体内,分别于移植后1、7、14、21 d取裸鼠骨髓、脾脏、肝脏、肺脏组织,激光共聚焦显微镜观察CM-DiI标记hUCBDSC体内分布情况。结果:传代培养hUCBDSC呈成纤维样,CM-DiI染色后胞膜呈红色。经尾静脉移植至裸鼠体内,移植后1 d,hUCBDSC广泛分布在骨髓、脾脏、肝脏、肺脏等组织中,移植7 d以后,hUCBDSC主要分布在骨髓,在骨髓中增殖、分化;脾脏、肝脏、肺脏等组织中的hUCBDSC明显减少。结论:人脐血源基质细胞经尾静脉输注可"归巢"至骨髓,并在骨髓中增殖、分化,重建受损造血微环境。; 高蕾陈幸华张曦冯一梅高力张诚龚奕梁雪彭贤贵郝磊王庆余; 关键词：人脐血源基质细胞示踪造血微环境

人脐血源基质细胞移植重建造血微环境促进巨核细胞生成的实验研究被引量：1: 2009年; 目的探讨人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)移植重建裸鼠造血微环境对巨核细胞生成的促进作用。方法取63只雌性BALB/c-nu/nu裸鼠,经5.0Gy60Coγ射线照射后,随机分为对照组、人骨髓基质细胞(hBMSCs)组和hUCBDSCs组(n=21),分别输注生理盐水、hBMSCs(1×105/只)和hUCBDSCs(1×105/只),观察移植后1、3、5、7、10、14、21d裸鼠血小板计数(PLT)变化,以及移植后1、7、14、21d的巨核细胞数、类成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)、骨髓象和骨髓病理组织变化。结果3组裸鼠移植后PLT、巨核细胞和CFU-U计数均降低(P<0.05),其中hUCBDSCs组裸鼠以上3个指标降低程度最轻(P<0.05),且恢复速度优于hBMSCs组和对照组(P<0.05)。hUCBDSCs组移植后骨髓抑制程度减轻,所有裸鼠均健康存活。结论hUCBDSCs具备修复造血微环境、促进巨核细胞增殖和血小板生成的作用,输注hUCBDSCs可作为一种安全有效的促进放/化疗或造血干细胞移植后血小板数量和功能恢复的方法。; 高蕾张曦陈幸华张诚高力冯一梅龚奕彭贤贵梁雪郝磊王庆余; 关键词：脐血干细胞移植造血系统巨核细胞

人脐血源基质细胞促进巨核细胞增殖的实验研究被引量：2: 2009年; 目的:探索体外共培养条件下人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)促进巨核细胞系HEL增殖的作用。方法:建立HEL与hUCBDSCs共培养体系,以HEL/人骨髓基质细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)和悬浮培养的HEL细胞为对照。通过光镜、扫描电镜观察共培养条件下HEL细胞与hUCBDSCs的位象关系;并通过CCK8、流式细胞仪等方法检测共培养条件下HEL细胞的生长曲线和增殖率。结果:共培养条件下,HEL细胞可通过伪足黏附/嵌合于hUCBDSCs层,甚至移行到hUCBDSCs层下,包裹于hUCBDSCs层内。与hUCBDSCs共培养的HEL细胞的增殖速度和增殖率均明显高于同期培养的HEL细胞/hBMSCs共培养组和HEL细胞悬浮组。结论:人脐血源基质细胞能够促进巨核细胞增殖,与对照hBMSCs组相比具有明显的优势,有望为造血功能损伤中血小板数量和功能的恢复提供新的治疗思路。; 高蕾陈幸华张曦高力张诚梁雪王庆余; 关键词：基质细胞巨核细胞细胞增殖

SDF-1/CXCR4轴在人脐血源基质细胞促进巨核细胞增殖中的作用: 2009年; 本研究探讨基质细胞衍生因子(stromal cell derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4在人脐血源基质细胞(human umbilical cord blood-derived stromal cells,hUCBSCs)促进巨核细胞增殖中的作用。以巨核细胞系HEL细胞作为研究对象,实验分HEL/hUCBSC共培养组、HEL/骨髓基质细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)共培养组和HEL悬浮培养组。应用ELISA法检测hUCBSC和hBMSC培养上清SDF-1水平,应用激光共聚焦和流式细胞仪检测HEL细胞CXCR4蛋白表达,RT-PCR检测CXCR4 mRNA表达。结果表明:hUCBSC高分泌表达SDF-1,其分泌高峰在培养第8天,稍迟于hBMSCs。与hUCBSCs共培养的HEL细胞,流式细胞仪和激光共聚焦检测均显示其CXCR4蛋白的表达较弱(p<0.05),且可在部分HEL细胞胞浆中发现红色点状荧光。RT-PCR检测结果显示,不同培养条件下HEL细胞CXCR4 mRNA表达无显著性差异(p>0.05)。结论:hUCBSC在分泌SDF-1和调控巨核细胞表达CXCR4方面起重要作用。; 高蕾陈幸华张曦张诚高力彭贤贵龚奕梁雪郝磊王庆余; 关键词：SDF-1 脐血基质细胞巨核细胞

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重庆市自然科学基金(2008BB5293)