国家高技术研究发展计划(2002AA216031)
- 作品数：3 被引量：21H指数：1
- 相关作者：郑从义陈红波徐新平屈三甫李睿更多>>
- 相关机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 丙型肝炎病毒功能基因在CHO细胞中的表达研究
- 2007年
- 丙型肝炎病毒(HCV)与宿主细胞因子的相互作用已经成为国内外研究的热点和难点。近期研究已经证实HCV的感染对宿主多种途径中基因的转录均能产生影响。为了进一步研究究竟是HCV中的哪些功能基因在与特定细胞因子的相互作用中起主导作用,构建了分别含有HCV Core、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B基因的真核表达质粒,分别转入宿主细胞CHO-K1中,在G418的选择压力下筛选获得稳定表达HCV单个蛋白的细胞系(10株)。PCR和RT-PCR可分别从稳定细胞系中检测到相应的HCV基因的DNA和mRNA,冻存和复苏不会造成HCV基因的丢失。Western-blot检测到稳定细胞系中表达E1,E2和NS5B蛋白,说明HCV基因在CHO-K1中已经形成稳定表达。薄层层析(TLC)结果显示,含有不同HCV基因的稳定传代细胞系中,UDP-葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)活性均发生了不同程度的变化,其中E2和p7的表达使胞内UGCG的活性提高了约1倍,NS2和NS5A则使UGCG的酶活提高了约0.6倍。该稳定细胞系的建立为研究病毒与宿主因子的相互作用及药物筛选奠定了基础。
- 郭佳鄢然徐国东郑从义
- 关键词：丙型肝炎病毒真核表达稳定细胞系
- 丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响被引量：1
- 2004年
- 采用荧光探针染色法,琼脂糖凝胶电泳分析方法,流式细胞仪技术研究丝裂霉素诱导CHO K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响.结果显示,丝裂霉素处理CHO K1细胞后,细胞核质收缩凝集,核碎裂及出现凋亡小体;琼脂糖电泳呈现典型的DNA梯带;流式细胞仪检测到典型的细胞凋亡峰(亚G1峰),分别用10,15,20,25mg/L丝裂霉素处理CHO K1细胞,其细胞凋亡率分别为4.76%,9.20%,14.51%,37.46%,且凋亡率随药物浓度的升高而升高,显示两者的正相关性;作用浓度相同而改变处理时间时,发现细胞凋亡率随处理时间的延长而呈上升趋势;流式细胞仪细胞周期分析,显示随着丝裂霉素浓度提高或作用时间延长,G1 S期细胞百分比降低,G2/M期细胞百分比升高,Ap峰与G1 S期负相关,与G2/M期正相关.
- 李睿熊义陈虹颖郑从义屈三甫
- 关键词：丝裂霉素细胞凋亡细胞周期中国仓鼠卵巢细胞抗肿瘤抗生素
- 树鼩在医学生物学中的应用被引量：20
- 2005年
- 目的树鼩是一种新型实验动物,由于它的许多分子与细胞结构近似于人类,已成功建立了多种人类病毒感染的动物模型,并在神经生物学、生殖生物学、免疫学和社会心理学等方面有相当广泛和深入的应用和研究。
- 徐新平陈红波贲昆龙
- 关键词：病毒
