国家自然科学基金(39870788)
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
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- 相关机构：第四军医大学西京医院成都军区昆明总医院成都军区总医院更多>>
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- 豚鼠发育过程前庭上皮细胞增殖和凋亡的关系被引量：2
- 2001年
- 目的 研究豚鼠胚胎正常发育过程中前庭上皮细胞增殖和细胞凋亡的变化 ,探讨两者之间的关系及在前庭终器发育中的作用。方法 选用不同发育期正常豚鼠 2 0只 ,取前庭上皮组织切片 ,用免疫组化法检测增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PCNA) ,以末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物dUTP缺口末端标记技术 (TdT mediateddeoxyuridinetriphosphate biotinnickendlabelling,TUNEL)和透射电镜观察细胞凋亡。结果 PCNA阳性细胞为支持细胞 ,毛细胞无阳性反应 ,随年龄增加 ,阳性细胞数逐渐减少。TUNEL阳性反应可发生于毛细胞和支持细胞 ,随年龄增加 ,阳性细胞数逐渐减少 ;出生后壶腹嵴阳性毛细胞位于其顶部。电镜下胚胎期毛细胞和支持细胞均可发生凋亡。结论 发育过程中 ,豚鼠内耳前庭上皮细胞增殖与细胞凋亡数目均逐渐减少 ,凋亡和增殖同时存在 ,自动调节正常细胞数目 。
- 胡金玮黄维国姜鸿彦邱建华刘顺利王锦玲
- 关键词：前庭发育生物学前庭终器PCNATUNEL
- 佛波酯对体外培养大鼠前庭上皮PKC表达的影响被引量：4
- 2002年
- 目的 观察体外培养条件下蛋白激酶 C(proteinkinase C,PKC)在佛波酯 (phogrbol 12 - myristate 13- acetate,PMA)诱导下大鼠前庭上皮的表达和分布特点 .方法 取新生大鼠椭圆囊 ,建立体外前庭器官培养模型 ,采用免疫组织细胞化学的方法 ,以 PKCβ,γ抗体为标记物 ,检测 PMA诱导后前庭上皮 PKCβ,γ的表达变化和分布特点 .结果 PKCβ,γ在正常培养新生大鼠前庭上皮细胞的细胞膜及细胞质中有弱表达 .PMA作用后 ,其表达逐渐增多 ,PKCβ1 主要位于细胞膜 ,在 30 min时表达最强 ,其后逐渐减少 ,4 5 min仍高于正常(P<0 .0 1) .PKCβ2 不但位于细胞膜 ,而且在纤毛亦明显表达 ;PKCγ在 PMA诱导后胞质表达增加 .在毛细胞层和支持细胞层均有 ,主要位于毛细胞层 .结论 体外前庭器官培养在 PMA诱导后 。
- 孙景豫黄维国王锦玲邱建华姜鸿彦
- 关键词：前庭毛细胞佛波酯听觉神经元前庭损伤
- 慢性庆大霉素损伤后豚鼠前庭感觉上皮蛋白激酶C表达和活性
- 2001年
- 目的 研究庆大霉素慢性损伤后豚鼠前庭终器蛋白激酶 C( PKC)活性的变化及其β ,β ,γ亚型的表达 ,探讨PKC与前庭损伤修复的关系 .方法 采用免疫细胞化学法观察椭圆囊斑、球囊斑和壶腹嵴 PKCβ , ,γ亚型的表达 ;应用γ- 32 P示踪检测前庭终器 PKC活性的变化 .结果 PKCβ , ,γ亚型在前庭感觉上皮细胞均呈阳性表达 ,上皮下结缔组织呈阴性表达 .β ,γ亚型较 β1 亚型表达稍弱 ,不同亚型抗原分布不完全相同 .与对照组相比 ,PKCβ ,γ在停止注射庆大霉素后 1d其表达明显减弱 ,随后其表达逐渐增加 ,至 1wk其表达已高于对照组 ,3 wk仍未恢复 .PKCβ 表达各组变化不明显 .豚鼠前庭终器 PKC活性检测结果与 PKCβ ,γ表达变化规律基本相似 .结论 庆大霉素慢性中毒后豚鼠前庭感觉上皮 PKCβ ,γ亚型表达及 PKC活性均发生变化 ,且不同亚型抗原分布不完全相同 .提示 PKC在前庭感觉上皮损伤修复过程中发挥重要作用 ,不同亚型可能具有不同的作用 .
- 马晓莉姜鸿彦黄维国邱建华王锦玲刘顺利
- 关键词：庆大霉素前庭感觉上皮蛋白激酶C
- 豚鼠发育过程中前庭上皮IGF-1及IGF-1R的表达变化
- 2001年
- 目的检测胰岛素样生长因子－ｌ（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－１，ＩＧＦ－ｌ）及其受体（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＩＣＦ－１Ｒ）在豚鼠发育过程中前庭上皮的表达和分布特点，并探讨其生物学特性及意义。方法 利用免疫组织化学的方法，以ＩＧＦ－１和ＩＣＦ－１Ｒ抗体为标记物，检测发育期豚鼠前庭器中的表达情况及分布特点，以增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）检测细胞增殖变化。结果ＩＧＦ－１及ＩＣＦ－１Ｒ可在豚鼠前庭上皮细胞中表达，随年龄增加而逐渐减少；ＰＣＮＡ表达于支持细胞，随年龄增加，阳性细胞数逐渐减少。结论 豚鼠正常发育过程中前庭上皮中有ＩＣＦ－ｌ及ＩＧＦ－１Ｒ的表达，为内源性的ＩＣＦ－ｌ通过旁分泌和自分泌方式在局部发挥其功能，壶腹嵴感觉上皮ＩＧＦ－１及ＩＧＦ－１Ｒ表达与细胞增殖相同步，ＩＧＦ－１在发育早期是强烈的有丝分裂原，促进细胞增殖、分化。
- 胡金玮王锦玲黄维国姜鸿彦邱建华乔莉
- 关键词：胰岛素样生长因子-1胰岛素样生长因子-1受体
- 庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮自发修复的分子机制研究被引量：1
- 2002年
- 目的观察庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮自发修复期细胞增殖和胞外信号调控蛋白激酶1/2(extracellularsignalreg-ulatedkinase1/2,ERK1/2)的表达和分布特点,探讨其生物学特性和意义。方法采用免疫组织细胞化学方法,以ERK1/2抗体为标记物,检测庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮修复期ERK1/2的表达变化和分布特点;采用Brdu体内标记和抗Brdu抗体免疫组化染色,检测庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮修复期细胞增殖情况。结果ERK1/2在正常对照组前庭上皮细胞中有低水平表达。庆大霉素损伤后,其表达渐增。在损伤后1d时ERK1/2表达明显增多,7d时表达最强,其后逐渐减少。在正常对照组前庭上皮中无Brdu阳性细胞。各实验组均观察到Brdu阳性细胞,7d时最多。结论庆大霉素损伤后,豚鼠前庭上皮ERK1/2表达增强,其时程变化与细胞增殖活动一致。ERK1/2在豚鼠前庭上皮损伤后的自发修复中可能起重要信号转导作用。
- 盛宏申黄维国王锦铃姜鸿彦邱建华
- 关键词：前庭上皮庆大霉素分子学机制
- 慢性庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮细胞的凋亡和再生观察被引量：3
- 2002年
- 目的 观察慢性庆大霉素中毒后豚鼠前庭上皮的损伤和修复过程 ,探讨前庭毛细胞凋亡和再生的关系。方法 采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (terminaldeoxyuncleotidyltransferase -mediateddeoxyuridinetriphosphatenickendlabeling ,TUNEL)法 ,观察前庭感觉上皮细胞的凋亡 ,采用 5’ -溴 - 2 -脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,Brdu)免疫细胞化学法观察前庭上皮的再生过程。 结果 对照组没有观察到TUNEL和Brdu阳性细胞。停止庆大霉素注射 1天至 3周均可观察到TUNEL阳性细胞 ,但 1天组阳性细胞数量最多 ,3周仍有阳性细胞存在 ,阳性细胞主要位于毛细胞层。停止庆大霉素注射后 1天组支持细胞层和毛细胞层均有Brdu标记阳性细胞 ,3d组支持细胞层阳性细胞显著增多 ,1周组毛细胞层也出现较多阳性细胞 ,2周组Brdu标记阳性细胞主要位于毛细胞层 ,3周仍可观察到Brdu标记阳性细胞。结论 慢性庆大霉素耳中毒后豚鼠前庭上皮细胞凋亡增加 ,凋亡与增殖伴随存在 ,前庭毛细胞的损伤可能是其增殖的触发因素。增殖过程表现为支持细胞增生向毛细胞增生移行的趋势 ,支持细胞增殖并转化成毛细胞可能是前庭上皮细胞损伤修复机理之一。
- 马晓莉黄维国王锦玲姜鸿彦刘顺利邱建华
- 关键词：细胞凋亡庆大霉素耳毒性
- 庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮STAT3 mRNA的表达变化及意义被引量：1
- 2007年
- 目的:观察庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮修复期细胞增殖和STAT3 mRNA的表达变化情况,探讨其生物学特性和意义。方法:采用原位杂交组织化学方法,检测庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮STAT3 mRNA的表达变化;采用Brdu体内标记和抗Brdu抗体免疫组化染色,检测庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮修复期细胞增殖情况。结果:在正常成年豚鼠前庭上皮中,STAT3 mRNA有低水平表达。庆大霉素损伤后1 d组,STAT3 mRNA杂交信号最强,其后逐渐减少,21d组与正常对照组无显著差异。在正常对照组前庭上皮中无Brdu阳性细胞。各实验组均观察到Brdu阳性细胞,7 d组最多。结论:庆大霉素损伤后,豚鼠前庭上皮STAT3 mRNA表达增强,其时程变化与细胞增殖活动密切相关。STAT3在豚鼠前庭上皮损伤后的自发修复中可能起重要信号转导作用。
- 盛宏申徐光孙景豫何跃王锦玲
- 关键词：STAT3前庭上皮细胞增殖庆大霉素
- 豚鼠前庭上皮胰岛素样生长因子1及其受体与细胞外信号调节激酶1/2表达在庆大霉素损伤后的变化(英文)被引量：1
- 2007年
- 背景:在内耳毛细胞发育中,胰岛素样生长因子1是重要的促有丝分裂因子,也是不可缺少的调节因子。细胞外信号调节激酶1/2在哺乳动物前庭器官也有表达。目的:观察庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮胰岛素样生长因子1及其受体、细胞外信号调节激酶1/2的表达和分布变化。设计:随机对照实验。单位:解放军成都军区总医院耳鼻喉科。材料:选用健康成年豚鼠20只,体质量300～350g,由解放军第四军医大学实验动物中心提供。按随机数字表法分为对照组(n=4)和实验组(n=16),实验组又按停药后1,7,14,21d4个时间点进行观察,每个时间点4只。方法:实验于2002-01/2002-05在解放军第四军医大学西京医院耳鼻喉科实验室完成。实验组豚鼠每天腹腔注射庆大霉素80mg/kg,对照组动物每天腹腔注射生理盐水1mL,连续10d。豚鼠出现步态不稳或眼震认为造模成功。每天观察豚鼠的步态、眼震及进食量。分别于停药后1,7,14,21d将实验组动物腹腔注射戊巴比妥50mg/kg过度麻醉后,取出并剪开双侧听泡,去除镫骨底板,固定、脱钙、包埋。取与蜗轴平行方向连续切片。对照组动物于停止注射生理盐水后1d采取相同措施。苏木精-伊红染色观察前庭上皮形态改变,免疫组织化学法观察胰岛素样生长因子1及其受体和细胞外信号调节激酶1/2的表达及分布变化。主要观察指标:①各组动物庆大霉素损伤后行为学和前庭上皮形态学的变化。②胰岛素样生长因子1及其受体、细胞外信号调节激酶1/2的表达及分布变化。结果:纳入的20只豚鼠全部进入结果分析。①庆大霉素注射期间,所有豚鼠的前庭功能均受损,停药后未经任何治疗,其前庭功能均部分恢复。②注射庆大霉素后,前庭上皮形态学改变明显,但停止注射庆大霉素1周后明显改善。③对照组豚鼠胰岛素样生长因子1及其受体有低水平表达,庆大霉素损伤后停�
- 盛宏申何跃徐光孙景豫王锦玲
- 关键词：胰岛素样生长因子1胰岛素样生长因子1受体细胞外信号调节激酶1/2前庭上皮庆大霉素
- 豚鼠内耳前庭上皮发育过程IGF-1及ERK的表达及其意义被引量：2
- 2001年
- 目的 检测胰岛素样生长因子 1(insulin likegrowthfactor 1,IGF 1)及其受体 (insulin likegrowthfactor 1receptor ,IGF 1R)在豚鼠前庭上皮发育过程的表达和分布特点 ,胞外信号调控激酶 1及 2 (extracellularsig nalregulatedkinase ,ERK1and 2 )的活性变化 ,并探讨其生物学特性及意义。 方法 利用免疫组织化学方法 ,以IGF 1和IGF 1R抗体为标记物 ,检测发育期豚鼠前庭器中的表达情况及分布特点 ;利用Westernblot方法检测ERK1及ERK2的活性变化。结果 IGF 1及其受体可在豚鼠前庭上皮细胞中表达 ,随年龄增加而逐渐减少。ERK1及ERK2的活性随年龄的增长而逐渐降低 ,且ERK2的活性高于ERK1。结论 豚鼠正常发育过程内耳前庭上皮中有IGF 1及其受体的表达 ,为内源性的IGF 1,可能通过旁分泌和自分泌方式在局部发挥其功能。壶腹嵴感觉上皮IGF 1及其受体表达、ERK1及ERK2的活性变化与细胞增殖相同步。
- 王锦玲胡金玮姜鸿彦
- 关键词：胰岛素样生长因子-1
- 胚胎期豚鼠前庭终器细胞凋亡的检测被引量：3
- 2002年
- 目的 研究豚鼠胚胎正常发育期前庭终器形态变化及细胞凋亡 ,探讨细胞凋亡在前庭终器发育中的作用 .方法 选用胚胎 40和 50 d正常豚鼠 ,光镜观察其前庭终器发育形态变化 ,末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物 d UTP缺口末端标记技术 (TUNEL)测定毛细胞和支持细胞凋亡 ,并以电镜观察凋亡细胞胞核变化 .结果 胚胎 40 d,豚鼠前庭壶腹、椭圆囊斑及球囊斑已分化 ,前庭上皮出现一层毛细胞及多层支持细胞 ;胚胎 50 d,支持细胞层数减少 ,毛细胞数目增加 ,伴有神经纤维出现 . TUNEL检测提示大量毛细胞和支持细胞发生凋亡 .电镜下前庭上皮细胞发生分化 ,凋亡的毛细胞和支持细胞胞核染色质浓缩边集 .凋亡细胞与新生细胞相邻 .结论 细胞凋亡是豚鼠内耳前庭终发育的必然现象 。
- 胡金玮黄维国姜鸿彦王锦玲刘顺利邱建华
- 关键词：胚胎期前庭终器细胞凋亡胚胎发育
