国家自然科学基金(30771755)
- 作品数：9 被引量：221H指数：7
- 相关作者：夏涛高丽萍高可君刘亚军房江育更多>>
- 相关机构：安徽农业大学黄山学院中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 茶叶二氢黄酮醇还原酶/无色花青素还原酶反应产物的快速检测方法研究被引量：3
- 2008年
- 利用薄层层析方法对儿茶素合成途径中的二氢黄酮醇还原酶/无色花青素还原酶促反应产物儿茶素C进行初步分离,用香草醛显色法进一步定量。以建立该酶促反应产物的快速检测方法。采用薄层层析方法,对薄层层析展开剂配方、及薄层分离产物均进行了研究。该方法检测波长为500nm,展开剂最优配方甲醇:乙酸乙酯:甲酸=8:8:1.5,层析分离所得显色产物为儿茶素C。以儿茶素C为标样,线性范围为50～500μg/ml,加标回收率为91.0%～93.0%之间,RSD为3.39%。建立了薄层层析与香草醛比色法结合检测儿茶素C含量的体系,该体系能够快速测定茶叶中DFR/LAR酶反应产物的含量。
- 高可君夏涛高丽萍刘亚军
- 关键词：茶叶薄层层析儿茶素香草醛
- 茶树实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择被引量：99
- 2010年
- 选择合适的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析(qRT-PCR)准确性的先决条件。该文以茶树(Camellia sinensis)芽、叶、幼根、嫩茎、花瓣、种子和愈伤组织为材料,应用实时荧光定量PCR技术,分析了18S rRNA、GAPDH、β-actin和α-tubulin4个常用内参基因在茶树不同器官组织中的表达情况。经GeNorm和NormFinder软件分析发现,当利用荧光定量PCR分析比较茶树不同器官组织中的基因表达差异时,可选择β-actin作为校正内参基因;而比较不同成熟度的叶片和愈伤组织时,可以选择GAPDH作为校正内参基因。
- 孙美莲王云生杨冬青韦朝领高丽萍夏涛单育骆洋
- 关键词：茶树实时荧光定量PCR内参基因
- 水培与土培栀子显微结构及生理指标的比较被引量：8
- 2011年
- 当年生栀子枝条插入水中诱导出不定根,分别进行溶液静止培养和土壤培养。60 d后测定生物量和相关生理指标,并对根、茎、叶横切面进行显微观察。结果表明,水培栀子生物量低于土培栀子的,含水量增加。与土培叶片较厚、较长相比,水培叶片变薄、变短、变宽;水培叶片表皮细胞大于土培叶片;与土培叶片柱状细胞整齐排列的栅栏组织相比,水培叶片缺乏柱状细胞,代之以球状小细胞无规则排列,且有较大的细胞间隙;水培叶片叶绿素b质量分数显著低于土培叶片的,表明水环境下植物对光能吸收有所下降。叶绿素a质量分数、过氧化物酶活性以及硝酸还原酶活性在2种条件培养叶片中差异不显著。水培栀子茎维管较土培栀子稍粗。2种培养条件下植物根系形态结构和生理指标差异显著:水培栀子白色或淡绿色根系比土培栀子褐色多毛的根系长1/3以上,有二级根和少量三级根,缺乏根毛;水培栀子根皮层细胞排列较疏松,部分细胞解体形成通气组织,而土培栀子根皮层细胞排列较致密,没有通气组织;水培栀子根系硝酸还原酶活性高于土培,呼吸强度则低于土培,表明栀子适应水生低氧环境所表现的分解代谢下降和氮代谢增强。
- 马雪泷吴杰邹鹏飞居明亮房江育
- 关键词：栀子水培显微结构生理指标
- 茶悬浮培养细胞玻璃化超低温保存研究被引量：8
- 2009年
- 为保存具有稳定代谢能力的优良茶细胞系,本文对茶叶悬浮培养细胞玻璃化法超低温保存进行了初步研究。结果表明:预培养以4d最佳,60%PVS2冰浴装载以20min最好,100%PVS2冰浴脱水处理60min最优,40℃复温解冻细胞存活率最高,采用这些参数进行完整试验的细胞存活率达到76%,初步建立了茶悬浮培养细胞玻璃化超低温保存的冷冻程序。
- 刘亚军高丽萍夏涛高可君
- 关键词：悬浮培养细胞玻璃化法超低温保存
- 茶树新梢中非酯型儿茶素及其合成酶的变化规律被引量：14
- 2009年
- 对不同季节茶树新梢不同部位鲜叶中儿茶素组分和非酯型儿茶素合成酶的变化规律进行了研究。结果表明,在茶树新梢上,从芽到第四叶,四种非酯型儿茶素中除了GC外,C、EC和EGC含量均逐步增加;两种非酯型儿茶素合成酶中,DFR/LAR活性呈下降趋势,而ANR在第三叶中达到最高。相关分析进一步表明,不同部位鲜叶中儿茶素的总量变化与DFR/LAR活性变化呈显著正相关,而与ANR变化相关性不大。
- 张宪林高丽萍夏涛刘亚军高可君
- 关键词：茶树生物合成
- 类黄酮及茶儿茶素生物合成途径及其调控研究进展被引量：83
- 2009年
- 类黄酮化合物是植物的次生代谢产物,广泛分布于植物界且具有较强的生物活性。儿茶素是主要的类黄酮化合物之一,其含量占茶树鲜叶干重的12%～25%。作为茶叶的主要风味物质,儿茶素还具有抗氧化、抗诱变与防癌、抗心血管疾病、抗紫外线辐射等功能。本文从类黄酮及茶儿茶素的生物合成途径、组织化学定位、合成调控措施等方面,综述有关茶树儿茶素的生物合成代谢及其调控的研究进展,旨在为茶儿茶素生物合成的基因调控、代谢工程提供新的思路。
- 夏涛高丽萍
- 关键词：类黄酮儿茶素生物合成途径
- 纸层析-分光光度法检测茶氨酸被引量：8
- 2012年
- 为了满足普通实验室对茶中茶氨酸测定的需要,研究了茶氨酸的纸层析-分光光度检测方法。结果表明,用茚三酮-乙醇水溶液做展层剂,对茶苗根、芽叶和茶叶的水浸提液进行纸层析,能够有效地将茶氨酸与其它氨基酸分离,紫色色斑清晰而均匀。用乙醇溶液洗脱色斑后用分光光度计在570nm比色,在20～70μL茶氨酸溶液点样量范围内其含量与吸光度呈线性关系。本方法检出限为0·0057mg·mL-1,测定下限为0·0191mg·mL-1,平均回收率90·28%～115·38%,平均相对标准差1·51%,具有安全、药品种类少和操作步骤简单等特点。
- 马雪泷邹鹏飞王荡强曹顺利房江育王昶
- 关键词：茶氨酸茚三酮乙醇纸层析分光光度法
- 茶树叶片蛋白的SDS-PAGE分析被引量：1
- 2010年
- 以茶树鲜叶为材料,对4种常用的蛋白提取方法(TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法、TCA-丙酮沉淀法、Tris-丙酮沉淀法)、SDS-PAGE条件及影响蛋白定量的因素进行了比较研究。确定了一套优化的适用于茶树叶片蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳和染色的方法。利用这一优化方法对茶树鲜叶蛋白和不同蔗糖浓度处理的愈伤组织蛋白进行了研究,找出了差异条带。
- 张立明王云生高丽萍夏涛
- 关键词：茶叶蛋白质提取SDS-PAGE
- 茶中游离氨基酸测定标样的选择被引量：8
- 2012年
- 茶中游离氨基酸测定中,国家标准没有对标准样品谷氨酸和茶氨酸加以区别,造成这一指标测定结果的混乱。运用统计学成对比较t检验方法,将2种标样的2个吸光度、按2种标样算出的样品的2种氨基酸含量以及文献中2种标样下游离氨基酸的2种含量分别一一配对,进行样本差数方差分析,结果表明,谷氨酸的吸光度高于茶氨酸,达到极显著水平,且差异随着氨基酸量的增加而增大;样品游离氨基酸含量谷氨酸标样测定结果普遍低于茶氨酸测定结果,差异达到极显著或显著水平。根据茶中各种氨基酸各自的含量和分子量,用加权法计算出混合氨基酸的相对平均分子量为147~150u,与谷氨酸分子量147.1u接近,偏离茶氨酸分子量174.2u;此外,谷氨酸吸光值高,测定更加灵敏。为此,认为茶中游离氨基酸测定的国家标准应该保留谷氨酸做标样,取消茶氨酸作标样。
- 马雪泷邹鹏飞王荡强曹顺利房江育王昶
- 关键词：氨基酸国标标样谷氨酸
