国家科技支撑计划(2006BAD27B02-05)
- 作品数：3 被引量：28H指数：3
- 相关作者：雷红涛孙远明庞杰秦毅兰徐振林更多>>
- 相关机构：华南农业大学广州城市职业学院福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 沙丁胺醇单克隆抗体的制备及间接ELISA方法的建立被引量：10
- 2010年
- 制备抗沙丁胺醇单克隆抗体,鉴定其特异性并建立间接竞争ELISA检测方法。以合成的沙丁胺醇完全抗原免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选克隆得到稳定分泌抗沙丁胺醇抗体的单克隆杂交瘤细胞,命名为4E4和3A2。经鉴定,两个抗体亚类都为IgG1,其腹水纯化后效价分别达到2.56×10^5和1.28×10^5。以效价高且特异性较好的4E4细胞株获得的抗体建立间接竞争ELISA方法,经条件优化后得到标准曲线,检测范围为4.76-84.99ng/mL,IC50为20.12ng/mL,检测限为3.25ng/mL,与克伦特罗交叉反应率为253.62%,与其它结构类似物没有明显交叉反应。本研究制备的单克隆抗体和建立的间接ELISA方法,可用于开发同时检测沙丁胺醇和克伦特罗的试剂盒。
- 彭述辉袁利鹏孙远明雷红涛王保玲徐振林庞杰
- 关键词：沙丁胺醇单克隆抗体间接ELISA
- 荧光偏振免疫分析技术研究进展被引量：8
- 2008年
- 荧光偏振免疫分析技术是一种均相荧光免疫分析法,具有快速、灵敏和环保等优点。本文对这一技术的研究进展作了评述,介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理、优越性、示踪物结构设计、制备、及其应用。
- 薛钢雷红涛吴青孙远明徐小燕
- 关键词：荧光偏振免疫分析均相
- 半抗原-载体蛋白偶联物的三种电泳鉴定方法被引量：10
- 2010年
- 【目的】建立一种简单方便的半抗原-载体蛋白偶联物电泳鉴定方法。【方法】选用SDS-PAGE、非变性琼脂糖凝胶电泳、高效毛细管区带电泳3种方法对载体蛋白、偶联剂变性的载体蛋白、半抗原-载体蛋白进行比较鉴定,同时与光谱法结果比较。【结果】对分子量差异较小的载体蛋白和半抗原-载体蛋白偶联物,SDS-PAGE不能有效分辨;但偶联前后载体电荷有变化时,非变性琼脂糖凝胶电泳却能有效分辨游离的载体蛋白和半抗原-载体蛋白偶联物,相对SDS-PAGE表现出更高的分辨灵敏度;毛细管区带电泳能高效分辨载体和半抗原-载体蛋白偶联物,结果直观,但需较贵重的专用仪器。琼脂糖电泳和毛细管电泳法与可见-紫外光谱法鉴定结果一致。【结论】3种电泳方法各有优缺点,非变性凝胶电泳简便、廉价、有效,较适合普通实验室使用。
- 雷红涛庞杰贺丽苹杨金易孙远明秦毅兰梁明标
- 关键词：SDS-PAGE毛细管区带电泳
