教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-0757)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：海南医学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”海南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 小鼠VCAM-1真核表达质粒的构建及表达被引量：1
- 2007年
- 目的:构建小鼠血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)基因真核表达质粒,了解该质粒是否能在真核细胞中有效表达。方法:以小鼠胚肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染CHO细胞,用Western Blot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质。结果:成功扩增了小鼠VCAM-1全长基因cDNA,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,West-ern Blot方法证实该质粒能在CHO真核细胞中正确表达目的蛋白。结论:成功构建了小鼠VCAM-1基因的真核表达质粒载体,为进一步研究VCAM-1的新功能和免疫治疗奠定了基础。
- 谭光宏宿静梅黄风迎王华黄用豪林映莹
- 关键词：血管细胞粘附分子-1真核表达质粒基因工程
- 小鼠IL-5真核表达质粒的构建和体外表达
- 2007年
- 目的构建小鼠白细胞介素-5(IL-5)基因真核表达质粒,了解该质粒在真核细胞COS细胞中有效表达情况。方法以含有小鼠IL-5基因的克隆质粒pORF9-mIL-5为模板,通过PCR扩增小鼠IL-5全段基因,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3·1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-mIL-5,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染COS细胞,用WesternBlot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质。结果成功扩增了小鼠IL-5全长基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA-mIL-5,Westernblot方法证实该质粒能在COS真核细胞中有效表达小鼠IL-5目的蛋白。结论成功构建了小鼠IL-5基因的真核表达质粒载体,为进一步研究IL-5的新功能和免疫基因治疗奠定了基础。
- 谭光宏王才春黄风迎王华黄用豪林映莹宿静梅
- 关键词：白细胞介素-5真核表达质粒
