江苏省农业科技自主创新基金(SCX11)
- 作品数：12 被引量：45H指数：5
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- 相关机构：南京师范大学江苏省农业科学院江苏省水生动物疫病预防控制中心更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- BDV E2蛋白的原核表达及鉴定
- 羊边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原,于2013年在国内首次报道发现,E2蛋白作为该病毒的主要抗原性蛋白,在抗体检测中可作为抗原,对该病毒进行抗体检测。本研究...
- 毛立刘霞李文良杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 关键词：E2蛋白
- 光、肥、水三因素对北沙参生长及生理特性的影响（英文）被引量：1
- 2014年
- [目的]促进药用植物北沙参在华东地区栽培应用。[方法]以北沙参幼苗为试材，正交设置北沙参营养生长期光、肥、水三因素的不同水平处理，检测其生物生长量、叶绿素含量和丙二醛含量等多项指标。[结果]北沙参人工栽培的最适条件与其野外生存环境并不完全一致。轻度遮荫、高肥（21.38～32.08 g）和适当灌水（500～750 ml）条件下北沙参生物量明显增加，叶绿素和胡萝卜素含量增加，丙二醛含量无明显变化；逆境条件栽培的北沙参生物量较小，叶绿素与胡萝卜素含量下降，叶绿素 a含量对光、肥、水等环境因子的变化更为敏感，且逆境栽培的北沙参叶片丙二醛含量显著升高。[结论]轻度遮荫、高肥和适当灌水是北沙参生长的最佳条件。
- 彭英汤兴利莫日江吴群周义峰
- 关键词：北沙参生物量叶绿素丙二醛
- 草鱼出血病病毒vp6核酸疫苗的免疫效果评估被引量：5
- 2012年
- 为了评估草鱼出血病病毒(GCRV)vp6基因核酸疫苗的免疫效果,将vp6基因克隆进pFastBacTMDual载体杆状病毒的多角体蛋白(Ph)启动子下游,同时将团头鲂(Megalobrama amblycephala)β-actin启动子控制的vp6基因克隆进杆状病毒的P10启动子下游,获核酸疫苗载体pFastBac-FA-VP6-ph-VP6。按每尾分别注射疫苗载体10、30、60μg的剂量免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(体长14～20 cm,体质量60～120 g),同设pFastBacTMDual载体(30μg/尾)阴性对照组及空白对照组(0.4 mL/尾无菌水)。于免疫后不同时间通过RT-PCR检测免疫鱼体中vp6基因的表达,并于免疫后第14、21、28、49、70天分别通过间接凝集反应检测血液中的抗体水平,并在免疫第21天感染GCRV评估免疫保护效果。结果显示,核酸疫苗免疫草鱼后,各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第28天达到最高;攻毒后每尾注射疫苗载体10、30、60μg组的死亡率分别为0%、0%、5%,pFastBacTMDual载体对照组和空白对照组分别为30%和100%。表明构建的核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果。
- 刘林徐诗英李婧慧邹勇倪金俤杨鸢劼曹广力薛仁宇陈辉贡成良
- 关键词：草鱼出血病病毒VP6基因核酸疫苗免疫
- 盐丰47沿海滩涂直播高产栽培技术被引量：5
- 2012年
- 合理开发利用沿海滩涂资源，是促进社会经济发展的重要途径之一[1]。江苏有954km海岸线，沿海滩涂面积68．7万hm^2，占全国滩涂面积的四分之一以上。2009年6月10日，国务院批准《江苏沿海地区发展规划》，使得江苏沿海开发正式上升为国家战略，目的是把江苏沿海滩涂地区建设成中国重要的土地后备资源开发区及国家重要的商品粮、农产品生产加工等基地。盐城境内沿海滩涂面积46．7万hm^2，占江苏省滩涂总面积的四分之三，
- 董晓鸣何冲霄
- 关键词：沿海滩涂资源高产栽培技术直播土地后备资源
- 猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立与应用被引量：5
- 2012年
- 采用RT-PCR方法扩增猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠埃希菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白得到成功表达。利用纯化的重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了间接ELISA抗体检测方法。ELISA抗原最适包被浓度为0.5μg/mL(0.05μg/孔),最佳封闭液为5g/L BSA,待检血清最适稀释度为1∶100,作用时间为1h,酶标抗体最适稀释度为1∶2 000,最适作用时间为45min,室温显色10min。用该方法检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清结果均为阴性;批内和批间重复试验变异系数分别<5%和<8%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用△E2-ELISA对350份血清样品进行检测,阳性率为77.71%,高于IDEXX试剂盒检测阳性率(67.14%),与IDEXX试剂盒阳性符合率91.06%,阴性符合率50%,总符合率77.43%。表明本试验建立的间接ELISA方法适于临床CSFV血清抗体的检测。
- 李文良毛立江杰元李彬茅爱华甘源
- 关键词：猪瘟病毒E2原核表达间接ELISA
- BDV E2蛋白的原核表达及鉴定
- 羊边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原,于2013年在国内首次报道发现,E2蛋白作为该病毒的主要抗原性蛋白,在抗体检测中可作为抗原,对该病毒进行抗体检测。本研究...
- 毛立刘霞李文良杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 关键词：E2蛋白
- 文献传递
- 草鱼呼肠孤病毒VP7基因核酸疫苗的构建及免疫效果被引量：11
- 2011年
- 将草鱼呼肠孤病毒(GCRV)外衣壳蛋白VP7双基因(约0.9 kb)及团头鲂的β-肌动蛋白启动子(约0.56 kp)经扩增并鉴定正确后,克隆至基因转移载体pFastBacTM Dual中,获得重组质粒pFastBac-β-VP71-VP72,以此研究草鱼免疫实验及免疫效果。重组质粒按10、30、60μg分为3组,同时设30μg空载体组及对照组。于免疫后第14、21、28、49天通过RT-PCR检测VP7的转录水平、间接凝集反应测定抗体水平及攻毒试验检测免疫保护效果。结果显示,pFastBac-β-VP71-VP72导入鱼体后,VP7基因在β-肌动蛋白启动子的驱动下持续表达,至第49天仍能检测到目的基因的转录;各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第21天达到最高,攻毒后10、30、60μg核酸疫苗免疫组死亡率分别为0%、0%、5%,而空载体组和对照组分别为30%和100%,表明pFastBac-β-VP71-VP72作为核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果。研究结果为草鱼呼肠孤病毒核酸疫苗的研发与生产应用奠定了基础。
- 徐诗英刘林李婧慧邹勇倪金俤杨鸢劼贡成良曹广力薛仁宇陈辉
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒VP7核酸疫苗
- 车辆瞬态响应试验中转向机器人混杂控制研究被引量：1
- 2012年
- 在自主设计转向机器人的基础上,结合其在车辆瞬态响应试验中的具体应用,研究其驱动单元(直流无刷电机)的控制算法.采用混杂切换控制,根据目标转角曲线的斜率切换电机的工况及对应的控制方法、换向时序.在Matlab/Simulink中建立转向机器人模型,结合CarSim模拟转向机器人,进行车辆瞬态响应试验.仿真结果表明:所采用的控制算法具有较好的控制效果,转向机器人能够完成满足试验标准要求的道路车辆瞬态响应试验.
- 罗石杨钢朱长顺赵永升沈成
- 关键词：混杂控制MATLABSIMULINKCARSIM
- 草鱼出血病病毒VP6蛋白的原核表达、纯化及免疫效果被引量：9
- 2012年
- 为了探讨草鱼出血病病毒(GCRV)VP6亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用,将vp6基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),构建了重组质粒pET28a(+)-VP6。SDS-PAGE和Western-blotting显示,重组VP6蛋白的分子量约为43 ku,主要以包涵体形式存在,重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右;Ni2+柱纯化后的重组蛋白,以每尾500μg肌肉注射免疫草鱼(14～20 cm,60～120 g),并在第14、21、28、49、70天通过间接凝集反应检测抗体水平,结果显示,免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体,第21天达到最高峰,第70天仍可检测到抗体的存在;免疫注射第21天人工接种GCRV,免疫后的草鱼对出血病的保护力达100%。
- 刘林徐诗英李婧慧邹勇倪金俤杨鸢劼曹广力薛仁宇陈辉贡成良
- 关键词：草鱼出血病病毒原核表达纯化免疫
- 猪圆环病毒2型Rep蛋白基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 采用PCR方法扩增猪圆环病毒2型(PCV-2)Rep蛋白基因,克隆入原核表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE检测目的蛋白得到成功表达,采用His标签单抗和PCV-2阳性猪血清进行Western blot鉴定表明重组蛋白具有良好的抗原性。利用纯化的重组蛋白rRep作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了间接ELISA抗体检测方法。抗原最适包被质量浓度为1mg/L(0.1μg/孔),待检血清最适稀释度为1∶100,作用时间为1h,酶标抗体最适稀释度为1∶3 000。用该方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清,结果均为阴性;批内和批间重复试验变异系数分别为<5%和<10%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用rRep-ELISA对113份血清样品进行检测,与rCap-ELISA结果比较,rRep-ELISA检测阳性率为50.44%(57/113),略低于后者的54.87%(62/113),2种方法检测符合率为88.5%(100/113),具有较好的一致性。这为PCV-2感染的流行病学调查和新型ELISA诊断试剂盒的研制奠定基础。
- 李文良毛立张纹纹王小敏茅爱华甘源江杰元
- 关键词：PCV-2REP蛋白原核表达
