海南省自然科学基金(309035)
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
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- 缺氧诱导因子-1在人乳腺癌细胞系MCF-7中的抗凋亡作用(英文)被引量：2
- 2011年
- 目的研究缺氧诱导因子-1在人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中对凋亡的作用。方法氯化钴(CoCl2)模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。Real-time PCR和Western-blot技术分别检测HIF-1αmRNA和蛋白质水平。Sub-G1测定,AnnexinⅤ荧光标记和DNA ladder检测细胞凋亡。结果缺氧后MCF-7细胞HIF-1α的蛋白质水平表达增加,但缺氧后细胞的凋亡率比正常氧水平时低。实时定量PCR和Western blot结果证实转染短发夹RNA后,MCF-7细胞中HIF-1α基因表达被成功抑制。阿糖胞苷诱导或无凋亡诱导剂时,干扰组凋亡率比未转染组明显增高。结论这项研究证明HIF-1在MCF-7中发挥抗细胞凋亡的作用,为针对HIF-1α的shRNA有效地用于乳腺癌的治疗提供新的思路。
- 王晗符史干董战玲许闽广王杨陈国斌高凌峰
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α短发夹RNA人乳腺癌细胞系
- siRNA沉默HIF-1α对大鼠心肌细胞CT-1表达的影响
- 2013年
- 目的研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在心肌细胞适应低氧环境中作用机制。方法合成针对HIF-1α的siRNA片段,转染大鼠心肌细胞系H9C2。Real-time PCR检测HIF-1α和心肌营养素(CT-1)mRNA水平,Westernblot检测HIF-1α和CT-1蛋白水平。结果低氧环境下,转染针对HIF-1αsiRNA片段后HIF-1αmRNA水平、HIF-1α蛋白质水平、CT-1 mRNA水平和蛋白水平均明显减低(P<0.05)。不进行转染时,CT-1 mRNA水平、HIF-1α蛋白和CT-1蛋白水平在低氧下比常氧下明显增高(P<0.05)。CT-1蛋白由对照组的0.34±0.05增至0.55±0.05(P<0.05)。结论低氧情况下CT-1基因的调控作用有可能是通过低氧激活HIF-1α而诱导产生的,HIF-1α在心肌细胞适应低氧环境中具有重要作用。
- 王晗符史干董战玲许闽广王杨陈国斌高凌峰
- 关键词：低氧诱导因子-1Α心肌营养素-1
- 在模拟低氧环境下心肌细胞HIF-1与CT-1的相互作用
- 2013年
- 目的:研究低氧环境下大鼠心肌细胞系H9C2细胞中HIF-1与CT-1的相互作用。方法:氯化钴(CoCl2)模拟低氧环境。采用CCK-8试剂盒检测心肌细胞存活率。化学合成siRNA片段,并通过li-pofectamine 2 000转染大鼠心肌细胞系H9C2。采用Real-time PCR和Western-blot技术分别检测HIF-1α和CT-1的mRNA和蛋白质水平。结果:低氧处理48h后,干扰组(转染针对HIF-1α的siR-NA的H9C2)中CT-1mRNA和蛋白水平较对照组(转染无义干扰片段的H9C2)明显减少(P<0.05)。低氧3d和4d后,加入CT-1组的心肌细胞存活率较对照组高(P<0.05),HIF-1mRNA表达水平与对照组无显著差异(P>0.05),HIF-1蛋白水平增加。结论:在培养心肌细胞中模拟低氧环境,HIF-1表达减少伴随着CT-1表达减少,加入CT-1后,HIF-1蛋白表达也增加,HIF-1与CT-1相互作用。
- 王晗符史干董战玲许闽广王杨陈国斌高凌峰
- 关键词：缺氧诱导因子-1心肌营养素-1
- 缺氧诱导因子-1在心肌保护中的作用被引量：1
- 2009年
- 缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是一种依赖于氧调控的转录因子,其在维持氧稳态方面发挥重要作用。缺氧时,缺氧诱导因子-1可以稳定地表达,从而调控一系列缺氧相关基因的表达,其诱导表达的基因与能量代谢、细胞生存与增殖、血管新生、红细胞生成、肿瘤生长以及肿瘤多药耐药等相关。许多心脏疾病都有不同程度的缺氧,机体可对其产生一定程度的代偿。HIF-1是在心肌缺氧中起代偿作用的重要因素,其机制可能涉及缺血缺氧时HIF-1能够促进血管内皮生长因子、诱导型一氧化氮合酶、血红素氧合酶-1、内皮素-1和心房钠尿肽等基因的表达,从而发挥心肌保护作用。
- 王晗许闽广
- 关键词：缺氧诱导因子-1心肌缺血缺氧心肌保护
- 缺氧对大鼠心肌细胞系H9C2中HIF-1α、CT-1表达的影响
- 2012年
- 目的观察缺氧对大鼠心肌细胞系H9C2细胞中HIF-1、CT-1的影响。方法采用向培养液中加氯化钴(CoCl2)模拟缺氧。实验分为缺氧组(培养液中加入100μmo1/L的CoCl2)和对照组(培养液中无CoCl2)。通过CCK-8试剂盒检测各组H9C2细胞的存活率。通过Real-time PCR检测HIF-1α和CT-1的mRNA水平,通过West-ern blot技术检测HIF-1α和CT-1的蛋白质水平。结果缺氧3 d和4 d后,缺氧组H9C2细胞的存活率较对照组下降(P<0.05),缺氧后H9C2细胞中HIF-1αmRNA表达无明显改变(P>0.05),而蛋白表达增加(P<0.05)。缺氧后H9C2细胞中CT-1 mRNA和蛋白水平均增加(P均<0.05)。结论缺氧环境下大鼠心肌细胞系H9C2中HIF-1α和CT-1的表达增加。
- 王晗符史干董战玲许闽广王杨陈国斌高凌峰
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α心肌营养素-1缺氧心肌
