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国家自然科学基金(39870680)

作品数:9 被引量:48H指数:5
相关作者:杭长寿赵秀芹唐青马本江唐青更多>>
相关机构:中国疾病预防控制中心中国预防医学科学院中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
发文基金:国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家科技攻关计划更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生

主题

  • 9篇出血热
  • 8篇新疆出血热
  • 8篇病毒
  • 7篇出血热病毒
  • 6篇新疆出血热病...
  • 3篇蛋白基因
  • 3篇流行病
  • 3篇流行病学
  • 3篇S基因
  • 2篇蛋白
  • 2篇糖蛋白基因
  • 2篇流行病学研究
  • 2篇克里米亚
  • 2篇克隆
  • 2篇分子流
  • 2篇分子流行病学
  • 2篇分子流行病学...
  • 1篇血清
  • 1篇血清流行病学
  • 1篇血清学

机构

  • 4篇中国疾病预防...
  • 4篇中国预防医学...
  • 3篇中国疾病预防...
  • 3篇亚里士多德大...
  • 1篇中国农业大学
  • 1篇新疆自治区疾...

作者

  • 7篇杭长寿
  • 4篇马本江
  • 4篇唐青
  • 4篇赵秀芹
  • 3篇唐青
  • 2篇解燕乡
  • 2篇王世文
  • 2篇韩磊
  • 1篇梁国栋
  • 1篇王环宇
  • 1篇陈化新
  • 1篇于凤刚
  • 1篇赵云
  • 1篇冯崇慧
  • 1篇高佃平
  • 1篇孟祥芝
  • 1篇陶晓霞
  • 1篇陶晓霞
  • 1篇李凡
  • 1篇赵秀芹

传媒

  • 3篇中华微生物学...
  • 2篇中华实验和临...
  • 2篇中华流行病学...
  • 1篇病毒学报
  • 1篇医学研究杂志

年份

  • 1篇2006
  • 1篇2005
  • 5篇2002
  • 2篇2001
9 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
新疆出血热病毒糖蛋白基因的克隆与表达被引量:1
2002年
On the basis of sequencing and analyzing of the whole M genes(encoding viral membrane antigen glycoprotein) of three Crimean Congo hemorrhagic fever viruses(CCHFV),the Chinese isolates(Xinjiang hemorrhagic fever virus,XHFV),we first expressed the glycoprotein (GP) gene of the prototype human origin XHFV strain BA66019 in eukaryotic cells and investigated the expression profiles.Three eukaryotic expression plasmids were constructed starting from ATG 78 (the first start codon of the deduced entire XHFv GP precursor gene positioned between the 78 th ~80 th nucleotides),ATG 93 and ATG 3084 (the potential start codon for G1 precursor gene).The constructs were transfected to COS-7 cells and the expressed products were characterized as membrane-bound proteins which could induce cell fusion This was much more apparent for recombinant plasmid with ATG 3084 A recombinant baculovirus was further created harboring full length GP gene(starting from ATG 78 ) and the expression could also result in the membrane fusion as well as swelling of the infected Sf9 cells The insect cell expressed G1 was smaller in M W than natural G1 (approximately 67kD) on SDS-PAGE and no recombinant G2 band was detectable Western-blot only detected the native G1,while there was no specific corresponding band of recombinant G1 These data suggested that G1 was structurally and functionally important in XHFV and the glycosylation may have great influence on M W as well as antigenicity This study provides a foundation for the future study of viral pathogenesis ,antigenicity and immunity,that are the theoretical and experimental backgrounds for vaccine
马本江杭长寿赵云王世文解燕乡
关键词:新疆出血热病毒糖蛋白基因克隆
新疆出血热病毒核蛋白基因的高效表达及其在诊断中的初步应用被引量:5
2002年
目的 克隆并测定了克里米亚 刚果出血热病毒 (CCHFV)中国分离株 (新疆出血热病毒 ,XHFV)BA8816 6株核蛋白 (NP)基因的序列并实现其在细菌中的高效表达与临床诊断的应用。方法 病毒RNA经RT PCR扩增出完整的NP基因。将扩增产物进行序列分析并克隆至融合表达载体pET32a ,使重组质粒在大肠杆菌BL 2 1中高效表达。将融合蛋白经初步纯化后包被ELISA板用于抗体检测。结果 XHFVBA8816 6株NP基因序列以及推导的氨基酸序列与其它XHFV的NP基因和蛋白序列同源性较高 ,在进化树上形成独立的分支。BA8816 6株NP基因编码 4 82个氨基酸的核蛋白 ,推测的相对分子质量 (Mr)约为 5 4× 10 3。在细菌中表达的融合蛋白经印迹试验证明具有良好的抗原性。以所建立的ELISA方法检测疫区人和动物血清的结果与IFA一致 ,并与临床诊断有很好的符合率。结论 BA8816 6株与其它XHFVBA6 6 0 19、BA84 0 2的NP基因在进化上关系密切 ,综合M基因的序列分析结果 ,人源分离株BA8816 6可能是来自蜱的BA84 0 2变异株。表达于细菌中的核蛋白可作为安全的诊断性抗原用于临床检测及流行病学调查 ,所建立的方法准确、特异、简便。
马本江杭长寿解燕乡王世文
关键词:出血热病毒克里米亚-刚果出血热核蛋白
新疆出血热病毒分子特征研究及诊断方法建立被引量:4
2006年
唐青杭长寿冯崇慧赵秀芹司马义巴吾东张玉贞李凡陈化新
关键词:新疆出血热病毒分子生物学研究虫媒病毒病病原学研究克里米亚
三株克里米亚刚果出血热病毒中国分离株糖蛋白基因的全序列测定与比较分析被引量:12
2001年
目的 测定克里米亚 刚果出血热病毒 (CCHFV)中国分离株 (即新疆出血热病毒 ,XH FV)BA6 6 0 19、BA840 2及BA8816 6糖蛋白 (M)基因的全部序列并分析各毒株之间的相互关系。方法 病毒RNA在只与其保守末端互补的特异引物PCM Tag和随机引物的共同引发下逆转录成cDNA ,以单一PCM Tag和高保真DNA聚合酶扩增出完整的M基因。扩增产物纯化后作为模板进行序列测定 ,并将所得序列经计算机辅助分析其种系发生与编码策略。结果 XHFV代表株BA6 0 19的M基因与国际原型株IbAr10 2 0 0的M基因比较多 5个碱基 ,为 5 36 5bp ;比BA840 2、BA8816 6多 4个碱基 ,即5 36 4bp。 3株XHFV长ORF起始于M基因的第 78位碱基 ,比IbAr10 2 0 0株提前 15bp。编码的前体蛋白共 16 89个氨基酸 ,比IbAr10 2 0 0株多 6个。 4株病毒之间核苷酸序列的同源性分别为 :80 9%(IbAr10 2 0 0 BA6 6 0 19) ,80 2 % (IbAr10 2 0 0 BA840 2 ) ,80 2 % (IbAr10 2 0 0 BA8816 6 ) ,83 7% (BA6 6 0 19 BA840 2 ) ,83 6 % (BA6 6 0 19 BA8816 6 ) ,99 0 % (BA840 2 BA8816 6 ) ;对应的氨基酸序列的同源性分别为85 1% ,86 3 % ,86 6 % ,87 8% ,88 0 % ,98 8%。它们与Dugbe病毒在核苷酸和氨基酸的同源性较低 ,大约是 5 5 %和 37 7%。
马本江杭长寿Papa Anna唐青Antoniadis Antonis
关键词:出血热病毒聚合酶链反应种系发生
5株新疆出血热病毒分子流行病学研究被引量:14
2002年
目的 从分子水平揭示中国新疆出血热 (XHF)病毒基因结构与功能的关系 ,寻找传播途径及流行原因。方法 对分离自新疆的 5株XHF病毒进行S基因片段的克隆和测序 ,与其他克里米亚 刚果出血热 (CCHF)的S基因序列进行比较和分析。结果  5株病毒S基因全长均为 16 72个核苷酸 ,开放阅读框均为 14 4 9个核苷酸 ,编码一个含 4 82个氨基酸的蛋白。新疆分离毒株的S基因核苷酸序列同源性 (93.0 %~ 99.5 % )明显高于其他国家分离毒株的S基因核苷酸序列。系统发生树状图显示新疆毒株在一个分支之下形成独立的群体 ,明显区别于来自其他地区的CCHF病毒并且又进一步分为三组。结论 不同毒株的S基因序列差异不完全取决于病毒分离的宿主、地域和时间。
唐青高佃平赵秀芹韩磊杭长寿
关键词:新疆出血热分子流行病学基因序列分析
新疆出血热病毒分子流行病学研究被引量:11
2005年
目的研究新疆出血热病毒(XHF)分子流行病学,揭示其与相关病毒之间关系,分析XHF的流行来源和分布特点。方法RTPCR检测20012002年XHF患者和蜱标本中XHF病毒S基因,阳性标本直接进行核苷酸序列测定。计算机软件进行S基因部分片段和S全基因序列同源性比较和S基因、M基因的种系发生树分析。结果不同年份人和蜱来源的病毒S基因部分片段核苷酸序列均显示较高同源性(97.3%~100%)。S基因进化树分析将病毒分成了欧洲、非洲和亚洲3组,其中亚洲毒株由中亚分离株和中国分离株组成,中国所有的XHF病毒S基因(同源性93.0%~99.5%)均集中在一个分枝下形成独立的一组,明显区别于世界上其他地区分离株(同源性81.40%~96.4%)。M基因进化树分析表明序列间差异不完全与病毒分离的地理区域相关。结论S基因分析显示XHF病毒蜱分离株与人分离株遗传背景接近,我国XHF病毒有共同的进化途径和基因结构特点,并具明显的地域性。
唐青赵秀芹王环宇司马义巴吾东张玉贞Masayuki SaijoShigeru Morikawa梁国栋Ichiro Kurane
以单引物同时扩增新疆出血热病毒M和S基因
2001年
马本江杭长寿孟祥芝Papa Anna唐青
关键词:新疆出血热病毒M基因S基因扩增
巴楚县2001年新疆出血热疫情的血清学证实被引量:16
2002年
目的 以血清流行病学方法调查新疆出血热 (XHF)病人、易感人群和主要宿主动物中疾病的感染情况。方法 分别收集 2 0 0 1年 4~ 6月新疆巴楚县临床诊断为XHF的病人血清、易感人群血清和主要宿主动物的血清 ,用研制的诊断试剂以酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测XHF特异性IgG和IgM抗体 ;用抗原捕获ELISA检测XHF病毒抗原。 结果 病人血清IgG抗体阳性率为39 .6 2 % (2 1/ 5 3) ,IgM抗体阳性率为2 0 .75 % (11/ 5 3) ,抗原捕获ELISA有 1份血清为XHF抗原阳性 ;易感人群血清IgG抗体阳性率为 2 1.0 5 % (4/ 19) ,IgM抗体检测和抗原捕获ELISA全部为阴性 ;羊血清IgG抗体阳性率为 70 % (5 6 / 80 )。 结论 血清流行病学研究证实该次疫情确系XHF ,流行地区人畜均有较高水平的隐性感染。
韩磊唐青赵秀芹西条政幸陶晓霞
关键词:新疆出血热血清流行病学
新疆出血热病毒S基因在真核系统的克隆和表达被引量:1
2002年
目的 在真核系统表达XHFVS基因片段 ,制备安全、特异、便于操作的S蛋白。方法设计引物 ,扩增得到S基因编码片段 ,用杆状病毒表达载体pFastBacHTb克隆S基因 ,并在昆虫细胞中表达S基因。结果 地高辛探针杂交和PCR扩增结果表明成功地构建了含XHFVS基因片段的pBac Sxhf质粒。SDS PAGE分析表达产物在相对分子质量 (Mr)为 6 6× 10 3 下方出现 1条明显的蛋白条带 ,Westernblot发现该蛋白带可以与抗XHF病毒核蛋白单克隆抗体发生反应。结论 构建的含XHFVS基因的重组杆状病毒可以在昆虫细胞表达S蛋白 。
唐青于凤刚赵秀芹陶晓霞Anna PapaA Antoniadis杭长寿
关键词:新疆出血热杆状病毒S基因质粒表达蛋白克隆
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