国家自然科学基金(81060351H2810)
- 作品数：8 被引量：36H指数：5
- 相关作者：刘永琦王倩颜春鲁李屹舍雅莉更多>>
- 相关机构：甘肃中医药大学教育部兰州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氯化镉对小鼠骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响被引量：6
- 2012年
- 背景:氯化镉对骨髓间充质干细胞遗传方面影响的研究暂无报道。目的:观察化学毒性物质氯化镉对骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响。方法:贴壁培养小鼠骨髓间充质干细胞细胞株,显微镜下观察空白对照组及氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞的形态学变化,微核实验检测两组微核率,染色体分析检测两组染色体畸变率。结果与结论:显微镜下观察,空白对照组细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,胞体透亮,折光性强;氯化镉诱导组细胞呈凸起回缩,细胞变小、变圆,贴壁不牢,悬浮细胞增多。与空白对照组比较,氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞微核发生率和染色体畸变率均显著增加(P<0.05)。提示氯化镉可引起小鼠骨髓间充质干细胞遗传物质的损伤。
- 刘永琦达瑞窦娟娟苏菊萍颜春鲁
- 关键词：骨髓间充质干细胞氯化镉微核率染色体畸变率干细胞
- 不同补肾法在脑梗死大鼠体内促骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨不同补肾法在脑梗死大鼠体内对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的影响。方法用线栓法制备大鼠大脑中动脉梗塞(MCAO)模型,随机分为空白诱导组、左归丸诱导组、地黄饮子诱导组、右归丸诱导组、维甲酸(RA)诱导组、左归丸联合RA诱导组、右归丸联合RA诱导组、地黄饮子联合RA诱导组,不同补肾法代表方药含药血清孵育BMSCs,移植后7、14 d进行移植细胞神经标志蛋白的检测。结果诱导BMSCs经静脉移植入大鼠体内后,阳性表达神经细胞的相关蛋白神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Nestin及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论不同补肾法在脑梗死大鼠体内能够促BMSCs向神经元样细胞分化,且补阴类代表方左归丸和阴阳双补类代表方地黄饮子在体内诱导分化的效果优于补阳类代表方右归丸。
- 刘永琦王倩颜春鲁苏韫张毅范萍吴晓晶董介正
- 关键词：脑梗死神经元样细胞细胞分化
- 红芪小分子提取物对MSCs体外增殖与染色体的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨红芪小分子提取物对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖及染色体的影响。方法利用水提法结合超滤法提取红芪中小分子物质,并筛选其促进MSCs增殖的最佳浓度。设单独培养的MSCs为对照组,红芪最佳浓度(20 mg/L)培养72 h后MSCs为实验组,于倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学的改变;采用MTT法检测各组细胞生长曲线;流式细胞术检测细胞周期;染色体显色与计数分析细胞染色体;Western印迹检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平的变化。结果红芪浓度20 mg/L为最佳促进MSCs增殖浓度(P<0.05)。倒置相差显微镜下观察对照组细胞呈成纤维细胞样;红芪组细胞呈长梭形,形态类似于对照组。与对照组比较,红芪组细胞生长速度显著增快(P<0.05);细胞周期G0/G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,但差异无统计学意义(P>0.05);染色体及MMP-2、MMP-9蛋白表达水平无异常改变(P>0.05)。结论红芪小分子提取物20 mg/L体外培养MSCs 72 h后,对其增殖有明显促进作用,且维持其遗传物质染色体的稳定性,其作用机制可能与调控MSCs的MMP-2、MMP-9等相关蛋白表达有关。
- 王倩岳卫东刘永琦
- 关键词：红芪骨髓间充质干细胞增殖染色体基质金属蛋白酶
- 黄芪、红芪小分子提取物对间充质干细胞体外增殖与遗传稳定性的考察被引量：6
- 2015年
- 目的:探讨黄芪、红芪小分子提取物对骨髓间充质干细胞(mesenehymal stem cells,MSCs)体外增殖的影响。方法:利用水提法结合超滤法提取黄芪、红芪中小分子物质,并筛选其促进MSCs增殖的最佳浓度。设单独培养的MSCs为对照组,黄芪、红芪最佳浓度分别培养72 h后MSCs为实验组,于倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学的改变;采用四唑蓝(MTT)法检测各组细胞生长曲线;流式细胞术检测细胞周期;染色体显色、计数与原子力显微镜法(atomic force microscope,AFM)分析细胞染色体。结果:黄芪质量浓度60 mg·L-1、红芪质量浓度20 mg·L-1为最佳促进MSCs增殖质量浓度(P<0.05)。倒置相差显微镜下观察对照组细胞呈成纤维细胞样;黄芪组、红芪组细胞呈长梭形,形态类似于对照组。与对照组比较,黄芪组、红芪组细胞生长速度均显著增快(P<0.05);细胞周期G0/G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,但差异无统计学意义(P>0.05);染色体无异常改变(P>0.05)。结论:黄芪、红芪小分子提取物分别为60,20 mg·L-1体外培养MSCs 72 h后,对其增殖有明显促进作用,且维持其遗传物质染色体的稳定性。
- 王倩贾旭东刘永琦
- 关键词：红芪骨髓间充质干细胞增殖染色体AFM
- 不同补肾法诱导的骨髓间充质干细胞对脑梗死大鼠神经功能恢复的促进作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨不同补肾法诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响。方法用线栓法制备大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)模型,随机分为假手术组、模型组、单纯BMSCs移植组及左归丸、右归丸、地黄饮子、维甲酸诱导BMSCs移植组。移植后3、7、14 d进行大鼠神经功能综合测评,于移植后7、14 d处死大鼠,采用TTC染色法测定脑梗死面积,并采用免疫组化方法检测脑组织神经突触素(syn)的表达。结果与模型组比较,各移植组7、14 d的神经功能评分均显著增高(P<0.05),脑梗死面积均显著缩小(P<0.05),syn阳性细胞数均明显增加(P<0.05)。结论不同补肾法诱导BMSCs能够促进脑梗死大鼠神经功能的恢复,且补阴和阴阳双补方药诱导BMSCs组的作用优于补阳类方药。
- 颜春鲁刘永琦苏韫张毅聂蕾薛娜杨玥
- 关键词：补肾法骨髓间充质干细胞脑梗死神经功能
- CdCl_2诱导大鼠BMSCs凋亡和DNA损伤的研究被引量：7
- 2012年
- 目的研究化学毒性物质氯化镉（cadmium chloride,CdCl2）对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs）形态学、MTT检测结果、细胞凋亡及DNA稳定性的影响。方法用MTT法筛选CdCl2对BMSCs抑制作用的最佳浓度;将BMSCs（F3）分为对照组及CdCl2最佳浓度（200μmol/L）干预组,培养24 h后用MTT法检测BMSCs的生存情况,用流式细胞仪（flow-cytometer,FCM）检测细胞凋亡情况,用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测BMSCs的DNA损伤情况。结果 CdCl2可对BMSCs在6.25~200μmol/L有明显的抑制作用,细胞给药12及24 h后,存在剂量-效应关系和时间-效应关系,CdCl2对BMSCs抑制作用最强的浓度为200μmol/L（24 h）;显微镜下观察,对照组细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,胞体透亮,折光性强;CdCl2诱导组细胞呈凸起回缩,细胞变小、变圆,贴壁不牢,悬浮细胞增多;与对照组比较,CdCl2诱导组细胞存活率明显降低,细胞凋亡明显增加,细胞的DNA拖尾率、平均尾长显著增加（P〈0.01）。结论 CdCl2在质量浓度为6.25~200μmol/L时对BMSCs有明显的抑制作用;对BMSCs抑制作用最强的浓度为200μmol/L（24 h）,且可引起大鼠BMSCs凋亡及DNA的损伤。
- 刘永琦窦娟娟达瑞蔡玲颜春鲁
- 关键词：BMSCSCDCL2细胞凋亡DNA损伤
- 肿瘤微环境对骨髓间充质干细胞形态、生长及增殖的影响被引量：14
- 2013年
- 因骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells-bone marrow,HMSC-bm)易于体外分离、培养、扩增及外源基因的导入,肿瘤趋向性和低免疫源性等特点,近年来已成为肿瘤生物治疗理想的载体。该实验采用Transwell小室建立HMSC-bm与肺腺癌细胞A549非接触共培养体系,研究肿瘤微环境诱导3 d、7 d后分别传至第3代、第5代HMSC-bm相关生物学特性的改变。结果显示,随着共培养时间的延长及传代代次的增加,实验组HMSC-bm细胞形态逐渐发生显著变化;细胞生长曲线与周期检测结果发现细胞增殖速度逐渐增快,提示肺腺癌微环境诱导HMSC-bm分化,导致其形态、生长及增殖等生物学特性改变,具有向肿瘤转化的可能,但尚需进一步研究,为HMSC-bm的临床广泛应用提供科学依据。
- 刘永琦王倩秦洁李屹舍雅莉李静雅
- 关键词：人骨髓间充质干细胞肿瘤微环境形态学细胞周期
- 甲醛对鼠BM-MSCs细胞系的遗传毒性影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究甲醛对BM—MSCs的遗传毒性，从而为甲醛导致白血病的发作提供生物学依据。方法采用噻唑篮比色（Mrrr）法检测BM—MSCs的增殖活性；用彗星、KCI—SDS沉淀、姐妹染色单体互换（SCE）和微核（MN）柃测甲醛对BM—MSCs的遗传毒忡效应。结果75～200μmol／L。甲醛可呈剂量依赖抑制BM—MSCs的增殖（P〈0．01），诱导BM—MSCsDNA断裂效应呈现先增高后降低趋势，在125μmol/L时，达到峰值，其中75～150μmol／L甲醛作用较对照组显著升高（P〈0．01）；甲醛在≥125μmol／L，时可以明显引起BM—MSCsDNA-蛋白交联（DPCs）、SCE和MN的形成，较对照组显著升高（P〈0．01）。结论甲醛可抑制BM—MSCs的增殖活性，并且对BM—MSCs具有一定的遗传毒性效应。
- 舍雅莉刘永琦李屹李能莲王雅莉张立骆亚莉
- 关键词：甲醛遗传毒性
