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广东省科技计划工业攻关项目(2005850301017)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：钱垂文王一飞熊盛金琳刘格更多>>
相关机构：暨南大学更多>>
发文基金：中国博士后科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇细胞
  • 1篇细胞分化
  • 1篇基因
  • 1篇基因沉默
  • 1篇分化
  • 1篇NM23-H...
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇K562细胞
  • 1篇沉默

机构

  • 1篇暨南大学

作者

  • 1篇张美英
  • 1篇张传海
  • 1篇刘秋英
  • 1篇刘格
  • 1篇金琳
  • 1篇熊盛
  • 1篇王一飞
  • 1篇钱垂文

传媒

  • 1篇中华血液学杂...

年份

  • 1篇2008
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
K562细胞nm23-H1基因沉默对其向巨核细胞分化的影响被引量：1
2008年
目的探讨nm23-H1沉默对K562细胞向巨核细胞分化的影响。方法采用Lipo-fectamine2000将靶向nm23-H1基因的RNA干扰质粒pSilencer^TM 4．1-CMV-sinm23及空质粒转染K562细胞，经G418筛选建立该基因稳定下调的K562细胞（K562-sinm23细胞）及空质粒转染K562细胞（K562-siNC细胞），实时定量PCR、免疫组织化学、蛋白印迹反应等方法证实了nm23基因沉默细胞构建成功。NBT还原比色试验检测细胞分化能力。流式细胞术检测在诱导剂佛波酯作用下K562-sinm23细胞表面巨核细胞分化抗原GPⅡb-Ⅲa（CD41）的表达。蛋白印迹法检测细胞在佛波酯诱导后ERK1／2磷酸化活性。结果与K562细胞和K562-siNC细胞比较，pSilencer^TM 4．1-CMV-sinm23能够沉默内源性nm23-H1 mRNA的表达，基因水平和蛋白水平的沉默效率分别达到75％和70％。经佛波酯诱导，与K562-siNC细胞比较K562-sinm细胞的分化能力明显增强（NBT还原能力A值分别为0．23±0．05和0．31±0．07）。nm23-H1基因调控K562细胞向巨核细胞分化与ERK1／2磷酸化活性增强有关。结论成功构建了nm23-H1基因稳定下调表达的K562细胞株，并且证明nm23-H1参与了K562细胞向巨核细胞系的分化。
金琳刘格张传海熊盛张美英刘秋英钱垂文王一飞
关键词：基因NM23-H1K562细胞细胞分化RNA干扰
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