国家自然科学基金(81071270)
- 作品数：11 被引量：32H指数：3
- 相关作者：冯刚刘康罗栩伟白亦光杨泽龙更多>>
- 相关机构：川北医学院南充市中心医院西南医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技支撑计划南充市应用技术研究与开发资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 地黄梓醇对椎间盘髓核细胞NLRP3炎性体的调控作用被引量：6
- 2020年
- 目的研究地黄梓醇对椎间盘髓核细胞NLRP3炎性体的调控作用。方法采用H2O2刺激大鼠原代椎间盘髓核细胞建立细胞模型,地黄梓醇预给药。CCK8法测定细胞活力,流式细胞仪检测髓核细胞凋亡,ELISA测定细胞上清液T-SOD、MDA、IL-1β水平,实时荧光定量PCR测定TXNIP、NLRP3、caspase-1、IL-1β mRNA表达,Western blot检测TXNIP、NLRP3、caspase-1、IL-1β、NF-κB p65蛋白表达,免疫荧光法检测TXNIP、NLRP3表达。结果地黄梓醇(5、10μmol/L)能上调细胞上清液T-SOD水平,下调MDA、IL-1β水平(P<0.05),抑制H2O2诱导髓核细胞凋亡(P<0.05),降低髓核细胞TXNIP、NLRP3、caspase-1、IL-1β mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01),并且10μmol/L地黄梓醇能抑制NF-κB p65蛋白表达(P<0.05)。结论地黄梓醇可有效抑制H2O2导致的髓核细胞凋亡,可能与调控ROS/NLRP3/IL-1β通路轴有关。
- 张鹏尹志良朱献忠刘康冯刚
- 关键词：过氧化氢髓核细胞NLRP3
- 生长分化因子5在椎间盘退行性变疾病中的研究进展被引量：2
- 2012年
- 长年劳损、慢性疾病或脊柱外伤等造成的椎间盘退行性变疾病（intervertebral disc degeneration disease,IDD）为临床的常见病和多发病,是引起下腰痛的主要病因。传统的治疗方法包括非手术保守治疗和手术治疗,虽然在一定程度上可缓解临床症状,但不能解决根本问题,还会引起相应的并发症。椎间盘细胞自我修复能力也极为有限,许多促进其再生和修复的方法不太令人满意。
- 罗栩伟罗栩伟
- 关键词：生长分化因子5椎间盘退行性变蛋白多糖
- 小鼠成纤维细胞诱导为诱导性多能干细胞的研究被引量：1
- 2012年
- 胚胎干细胞（embryonicstemcells，ESCs）由于具有无限增殖和多向分化的特性，因此在再生医学和药物发现与评价等领域极具应用价值。但是ESCs细胞在细胞来源、免疫排斥和法律等方面存在诸多限制。诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells，iPSC）技术的出现使人们从上述争论中解脱出来，由于iPSC在干细胞标志物表达、
- 刘康罗栩伟冯刚陈竹宋桂芹李战梅
- 关键词：多能干细胞细胞诱导诱导性小鼠干细胞标志物多向分化
- GDF-5基因重组腺病毒修复人退变髓核细胞的实验研究
- 2019年
- 目的探讨腺病毒介导的GDF-5基因对人退变髓核细胞外基质表达的影响,探求一种基因治疗新途径。方法利用腺病毒载体将GDF-5基因导入退变髓核细胞,设置为空白对照组(Control组)、阴性对照组(GFP组)、实验组(GDF-5组)3组,并分为3、7、14、21天四个观察时间点,分别检测3组髓核细胞sGAG、Hyp的含量,免疫染色、Safranine-O染色观察细胞外基质合成情况,Real-timePCR检测Aggrecan、CollagenⅡmRNA表达水平。结果GDF-5组髓核细胞sGAG/DNA、Hyp/DNA均在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),而Control组与GFP组之间任意观察时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05);免疫染色、Safranine-O染色结果显示GDF-5组髓核细胞的蛋白多糖、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖在14、21天均呈强阳性染色,Control组和GFP组呈弱阳性染色。Real-timePCR结果显示GDF-5组Aggrecan、CollagenⅡmRNA的表达在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒介导的GDF-5能明显促进人退变髓核细胞Aggrecan、CollagenⅡmRNA的表达,并增加蛋白多糖、Ⅱ型胶原的合成,对细胞外基质具有明确的修复作用,是一种有效的基因治疗新方法。
- 罗栩伟李艳冯刚苟林白亦光杨飞刘康陈竹
- 关键词：GDF-5重组腺病毒髓核细胞基因治疗
- 移植同种异体脂肪干细胞对兔椎间盘退变早期的干预实验研究被引量：2
- 2019年
- 目的观察同种异体兔脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSC)在退变早期对椎间盘的修复效果。方法采用穿刺抽吸法建立兔椎间盘退行性变模型,体外培养ADSC对模型进行移植治疗。27只5月龄日本大耳白兔随机分为3组:正常对照组(NC组,n=9),ADSC移植组(ADSC组,n=9)和DMEM培养基组(DMEM组,n=9)。每只实验动物的L 3-4、L 4-5和L 5-6作为实验干预椎间盘。术后4,8,12周分别利用标准化T2加权像信号强度(%ST2WI)、病理组织学、退变分数、免疫组化染色以及Ⅱ型胶原(collagenⅡ)和蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达水平评价修复效果。结果术后4,8,12周,DMEM组的%ST2WI值、collagenⅡ和aggrecan的mRNA表达量均明显低于其他各组(P<0.05),NC组和ADSC组组间无明显差异;NC组和ADSC组退变分数明显低于DMEM组(P<0.05),NC组和ADSC组间无明显差异;NC组和ADSC组的collagenⅡ免疫组化均显示强阳性,而DMEM组随着时间的推移阳性逐渐减弱。结论在退变早期移植同种异体的兔ADSC能有效抑制椎间盘的退变。
- 白亦光刘康杨泽龙罗栩伟林涛肖东琴冯刚
- 关键词：脂肪干细胞椎间盘退行性变干细胞移植
- 诱导性多潜能干细胞滋养层制备条件的实验研究
- 2011年
- 目的制备小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEFs)滋养层,用于诱导性多潜能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)的体外培养。方法取13.5～15.5天胎龄的胎鼠,采用组织消化法分离原代培养成纤维细胞,对MEFs的生长形态、生长曲线进行观察。采用10μg/ml丝裂霉素C预处理P2～P3代MEFs 2～3h制备出细胞滋养层,在该滋养层上进行iPSCs培养,观察iPSCs的集落生成情况,并行碱性磷酸酶细胞染色。结果 MEFs经丝裂霉素C预处理后细胞既不增殖,也不会死亡,仍保持分泌多种生长因子的能力。iPSCs在MEFs滋养层上生长良好,类似于胚胎干细胞一样能形成"鸟巢"状集落,并可维持iPSCs正常形态,抑制其分化而不影响活力,碱性磷酸酶染色阳性。结论利用诱导性多潜能干细胞滋养层方法制备的细胞滋养层,能有效支持iPSCs的生长,为进一步开展iPSCs的研究提供了理论依据和实验基础。
- 罗栩伟罗栩伟刘康陈桂秀陈竹刘康宋桂芹
- 关键词：诱导性多潜能干细胞胚胎成纤维细胞滋养层
- 移植同种异体骨髓间充质干细胞对兔椎间盘退变早期的干预实验研究被引量：1
- 2020年
- 目的:在诱导椎间盘退变的早期移植同种异体兔骨髓间充质干细胞(BMSC),观察BMSC对退变椎间盘的修复效果。方法:体外分离、培养BMSC,并通过组织化学染色、免疫组织化学和免疫荧光染色对其进行鉴定。采用穿刺抽吸法建立兔椎间盘退行性变模型,造模同期进行细胞移植治疗。27只5月龄日本大耳白兔随机分为正常对照组(NC组)、BMSC移植组(BMSC组)、DMEM培养基组(DMEM组),每组各9只。每只实验动物的L 3-4、L 4-5和L 5-6作为实验干预椎间盘。术后4、8、12周分别利用标准化T2加权像信号强度(%ST2WI)、病理组织学、退变分数、免疫组化染色、免疫荧光染色以及二型胶原(CollagenⅡ)和蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达水平评价修复效果。结果:术后12周,DMEM组的%ST2WI值、CollagenⅡ和aggrecan的mRNA表达量均低于其它各组(P<0.05),NC组和BMSC组比较,差异无统计学意义(P>0.05);NC组和BMSC组退变分数低于DMEM组(P<0.05),NC组和BMSC组比较,差异无统计学意义(P>0.05);NC组、BMSC组的CollagenⅡ免疫组化和aggrecan免疫荧光染色均显示强阳性,而DMEM组随着时间的推移阳性逐渐减弱。结论:在退变早期移植同种异体的兔BMSC能有效抑制椎间盘的退变。
- 白亦光陈巧玲刘康肖东琴罗栩伟林涛杨泽龙冯刚
- 关键词：骨髓间充质干细胞椎间盘退行性变干细胞移植
- 纤维环穿刺抽吸法和纤维环切开法建立兔椎间盘退变模型的比较被引量：10
- 2013年
- [目的]通过纤维环穿刺抽吸法和纤维环切开法建立兔椎间盘退变模型,分析此两种方法的可行性及特点。[方法]取10个月龄健康日本大耳白兔24只,随机分为2组,其中A组为纤维环穿刺抽吸组,利用18 G穿刺针分别在兔L3、4、L4、5、L5、6椎间盘刺入并抽吸髓核8～12 mg;B组为纤维环切开组,利用手术刀分别在兔L3、4、L4、5、L5、6椎间盘纤维环上做水平位切口;造模完毕,两组兔分别于术后4、8、12、16周进行MRI检查,病理组织学观察和免疫组化染色观察。[结果]A、B两组退变椎间盘MRI T2加权像信号随时间延长呈现持续减弱趋势,术后4、8周纤维环穿刺组T2加权像信号强度评分较纤维环切开组低(P<0.05),组织学观察发现造模组髓核细胞逐渐减少;免疫组化染色观察Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达含量随时间延长逐渐降低,且B组含量明显低于A组。[结论]两种方法均能建立兔椎间盘退变模型,但纤维环切开法椎间盘的退变程度较纤维环穿刺法出现较早且较为剧烈。
- 白亦光韩小伟张旭乾陈华平赵明刘康陈竹杨泽龙倪伟冯刚
- 关键词：椎间盘退变
- 髓核细胞和骨髓间充质干细胞对早期椎间盘退行性变干预作用对比被引量：2
- 2019年
- 目的:比较髓核细胞(NPC)和骨髓间充质干细胞(BMSC)体外对兔椎间盘退行性变(IDD)修复效果。方法:体外分离、培养NPC、BMSC,并通过病理组织学染色和免疫组织化学染色对其进行鉴定。采用穿刺抽吸法建立兔IDD模型,造模时同期进行细胞移植治疗。将36只5月龄日本大耳白兔随机分为4组:正常对照组(NC组)、NPC移植组(NPC组)、BMSC移植组(BMSC组)、DMEM阴性对照组(DMEM组),每组9只。每只实验动物的L3-4、L4-5和L5-6作为实验干预椎间盘。术后4周、8周、12周分别利用标准化T2加权像信号强度(%ST2WI)、病理组织学、退变分数、免疫组化染色以及二型胶原(CollagenⅡ)和蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达水平评价修复效果。结果:术后4周、8周、12周,NC组、NPC组和BMSC组的%ST2WI值及CollagenⅡ、aggrecan mRNA相对表达量均明显高于DMEM组(均P<0.05),NC组、NPC组和BMSC组组间比较均无明显差异(均P>0.05),DMEM组在术后4周、8周、12周%ST2WI值较NC组下降约50%、61%、70%;NC组、NPC组和BMSC组退变分数明显低于DMEM组(均P<0.05),NC组、NPC组和BMSC移植组组间比较均无明显差异(均P>0.05);NC组、NPC组和BMSC组的CollagenⅡ免疫组化结果显示强阳性,而DMEM组随着时间的推移阳性逐渐减弱。结论:BMSC和NPC移植在退变早期均能有效抑制椎间盘髓核组织的退变,BMSC有望成为NPC的良好替代者。
- 白亦光陈巧玲刘康肖东琴罗栩伟林涛冯刚
- 关键词：髓核细胞椎间盘退行性变骨髓间充质干细胞干细胞移植
- 软组织平衡术联合Scarf和Akin截骨治疗中重度踇外翻畸形被引量：3
- 2020年
- 目的评估软组织平衡术联合Scarf和Akin截骨治疗中重度踇外翻畸形的疗效。方法回顾分析2017年9月~2019年9月我院足踝外科采用软组织平衡术联合Scarf截骨和Akin截骨手术治疗的28例(35足)中重度踇外翻患者临床资料。观察患者术后并发症发生情况并记录截骨愈合时间;术后第3、6月随访时摄X线片测量踇外翻角(HVA)、第1、2跖骨间夹角(IMA),记录术前美国矫形足踝协会(AOFAS)和疼痛视觉模拟评分(VAS),并与术前比较;采用Roles-Maudsley评分对患者进行满意度调查。结果共27例(34足)患者获得随访,随访时间6~24个月,平均12.4个月。所有手术伤口均一期愈合,无伤口感染或伤口裂开发生;所有患者的两处截骨均一期愈合,愈合时间(2.7±0.4)月,无截骨延迟愈合或不愈合发生。与术前相比,术后6月HVA、IMA、AOFAS、VAS均降低(均P<0.05)。患者满意率92.6%。结论软组织平衡术联合Scarf和Akin截骨治疗中重度踇外翻疗效良好。
- 吴辉罗栩伟冯刚杨飞李亮
- 关键词：踇外翻
