广西省自然科学基金(0447001)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：卢克焕杨华牛金涛杜挺媛曾有权更多>>
- 相关机构：广西大学济源市畜牧局第四军医大学更多>>
- 发文基金：广西省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 水牛垂体催乳素cDNA的克隆与序列分析被引量：4
- 2009年
- 根据GenBank中报道的几种哺乳动物催乳素(PRL)基因序列,设计1对特异性引物。从广西本地水牛脑垂体中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增水牛PRL cDNA全序列,并连接到pMD18-T载体,经PCR和酶切鉴定的阳性克隆进行测序,测定结果表明:该cDNA开放阅读框(ORF),长度为690bp,编码氨基酸为229个,其中前19个氨基酸为信号肽。用NCBI上的Blast功能将测序结果同GenBank已发表的序列进行比对,具有很高的同源性,其中与牛属动物同源性最高,达98.4%,证明所克隆的序列为水牛PRL cDNA全序列,已提交到GenBank(登陆号:EF054878)。本研究成功克隆水牛PRL cDNA全序列,为下一步构建原核表达载体、表达体外蛋白,以及进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 杜挺媛卢克焕杨华牛金涛魏凤
- 关键词：水牛垂体催乳素CDNA克隆
- 猪精子RNA提取的初步研究被引量：3
- 2008年
- 实验采用Trizol一次法或试剂盒提取猪精子的总RNA,然后通过RT-PCR扩增的方法,检测精子和睾丸组织中鱼精蛋白(PRM-1)的mRNA;使用不同数量的精子,检测在本实验条件下能扩增出PRM-1带所需要的最小精子数量;通过OD260/280的测算,判断不同提取方法所得RNA的纯度;通过琼脂糖电泳得到精子RNA与睾丸、卵巢组织RNA的电泳图。实验结果表明:在使用RNA沉淀剂时,1.51×107精子可检测到PRM-1的mRNA,不使用沉淀剂则需要3.02×107精子才检测到;使用Trizol一次法提取的精子总RNA纯度较常规Mini试剂盒(W6221)高;本实验首次得到猪精子总RNA的普通琼脂糖凝胶电泳图。初步研究的结果表明,Trizol一次法可用来提取精子总RNA供进一步研究;猪精子RNA的28S和18S片段与睾丸、卵巢组织无明显差异。
- 曾有权仇恒滨徐凯陆阳清卢克焕
- 关键词：猪精子总RNAMRNA
