国家自然科学基金(21307163)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- UPLC-HRMS法定量分析小鼠组织中的6-氧-甲基鸟嘌呤被引量：2
- 2017年
- 为评价4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的器官致癌性,建立了一种定量分析C57BL/6小鼠组织中DNA甲基化加合物6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)的超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,并分别对NNK染毒后生理盐水对照组、吡唑处理组和5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量进行了测定。用试剂盒提取组织样品DNA,提取物在80℃下酸解后加入内标6-氧-甲基-d3-鸟嘌呤([CD_3]6-O-MeG),经过HLB固相萃取柱净化后进行UPLC-HRMS分析。结果表明:(1)6-O-MeG在0.05~10.00 ng/mL内线性良好(R^2=0.999 8),检出限0.011ng/mL,回收率92.1%~102.2%,日内和日间精密度分别为1.10%~4.34%和1.89%~6.58%。(2)给药4 h后,吡唑处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量分别为对照组的2.09和1.87倍,5-MOP处理组则分别为对照组的0.32和0.67倍,表明小鼠体内的CYP2A5在NNK的代谢活化过程中起到重要作用。该方法样品前处理简单、选择性好、灵敏度高,适用于小鼠组织中6-O-MeG的测定。
- 李琛王荣浩毛健霍现宽王丁众张建勋
- 关键词：NNK
- DNA甲基转移酶活性对NNK α-亚甲基羟基化代谢的影响被引量：1
- 2017年
- 为准确评价DNA甲基转移酶(DNMT)的活性对4-(甲基亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)通过α-亚甲基羟基化代谢途径产生O^6-甲基鸟嘌呤(O^6-mG)的影响,采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,分别对100 mg/kg NNK染毒后的生理盐水处理组、地西他滨处理组小鼠肝脏和肺中DNMT的活性、DNA甲基化程度,以及4-(3-吡啶基)-4-氧代丁酸(OPBA)、4-(3-吡啶基)-4-羟基丁酸(HPBA)和O^6-mG的质量分数进行了测定。结果表明:(1)地西他滨能够抑制DNA甲基转移酶活性,降低DNA甲基化水平。(2)地西他滨对NNK通过α-亚甲基羟基化代谢产生OPBA和HPBA的途径无显著影响。(3)抑制DNA甲基转移酶的活性,能减少NNK通过α-亚甲基羟基化代谢产生O^6-mG的量。
- 王荣浩李琛毛健刘帅东王丁众张启东霍现宽张建勋
- 关键词：地西他滨
- LC-HRMS法检测C57BL/6小鼠血液中NNK及其7种代谢物被引量：3
- 2016年
- 为准确测定小鼠血液中4-（N-甲基-N-亚硝氨基）-1-（3-吡啶基）-1-丁酮（NNK）及其代谢物,了解小鼠体内NNK的代谢途径,利用Q Exactive轨道阱高分辨质谱仪,建立了一种同时检测C57BL/6小鼠血液中NNK及其7种代谢物[4-（N-甲基-N-亚硝氨基）-1-（3-吡啶基）-1-丁醇（NNAL）、NNK-N-氧化物（NNK-N-oxide）、NNAL-N-氧化物（NNAL-N-oxide）、4-羟基-1-（3-吡啶基）-1-丁酮（HPB）、1-（3-吡啶基）-1,4-二醇（PBD）、1-（3-吡啶基）-1-丁酮-4-羧酸（吡啶基丁酮酸）和1-（3-吡啶基）-1-丁醇-4-羧酸（吡啶基羟基酸）]的液相色谱-高分辨质谱（LC-HRMS）方法。以NNK-d4、NNAL-d3和HPB-d4为内标,小鼠血清样品经乙腈沉淀蛋白后,直接进行亲水相互作用色谱（HILIC）柱分离和质谱分析,质谱扫描模式采用一级全扫描和数据依赖二级扫描（Full MS/dd MS2）模式。结果表明：各目标物的定量限在0.042-0.263 ng/m之间,线性相关系数为0.999 1-1.000 0,加标回收率在89.2%-116.5%之间,日内精密度在1.54%-8.06%之间。该方法选择性好,分析效率高,目标物线性范围大,适合于小鼠血液中NNK及其代谢物检测与分析。
- 刘帅东王丁众冯明飞孙世豪刘俊辉洪广峰毛健张建勋
- 关键词：C57BL/6小鼠代谢物
- 微透析-UPLC-MS/MS法同时测定活体大鼠脑内烟碱及其代谢物被引量：2
- 2014年
- 建立了同时测定活体大鼠脑内烟碱（Nic）及其5种代谢物可替宁（Cot）、降烟碱（NNic）、烟碱氮氧化物（NNO）、降可替宁（NCot）和反-3＇-羟基可替宁（3-HC）的微透析-超高效液相色谱-串联质谱（UPLC—MS／MS）联用方法。采用微透析系统采集大鼠脑组织样品，加入内标Nic—d3，Cot—d3，NNic-d。和3-HC—d，后直接进行亲水相互作用色谱（HILIC）分离和多反应监测（MRM）分析。结果表明：Nic及其5种代谢物的日内和日间精密度及准确度均小于11％，检出限和探针回收率分别为0．012～0．029ng／mL和4．7％～9．3％。该方法快速简单、灵敏稳定，适合用于活体分析大鼠脑内的Nic及其代谢物。
- 毛健卢剑清徐妍洪广峰卢斌斌孙世豪宗永立张建勋
- 关键词：烟碱代谢物微透析MS鼠脑
- 微透析-HPLC-ECD联用在线测定烟碱暴露大鼠脑内单胺神经递质的动态变化被引量：2
- 2017年
- 为探讨烟碱依赖的形成机理,实时评价烟碱引起的单胺神经递质变化效应,采用在线微透析和高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)联用方法测定了大鼠脑纹状体中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。以2.0μL/min灌流,每15 min收集1次透析液并自动注入五氟苯基柱,在梯度洗脱条件下分离检测。结果表明:方法的线性范围为0.2~500.0 ng/m L,日内和日间精密度均≤9.7%,加标回收率为86.2%~105.9%,体外透析探针回收率为25.3%~28.3%。以2.0 mg/kg烟碱进行腹腔注射后,大鼠纹状体中DA和5-HT的释放增加但未见持续增强,而HVA和5-HIAA的量明显升高。该方法简便快速,灵敏度高,选择性好,适合于烟碱作用下活体动物脑内单胺类神经递质变化的动态分析。
- 徐妍毛健庆宏
- 关键词：纹状体单胺神经递质烟碱
- 微透析-HPLC-ECD联用在线测定烟碱暴露大鼠脑内单胺神经递质的动态变化
- 为探讨烟碱依赖的形成机理,实时评价烟碱引起的单胺神经递质变化效应,采用在线微透析和高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)联用方法测定了大鼠脑纹状体中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(H...
- 徐妍毛健庆宏
- 关键词：纹状体单胺神经递质烟碱
- 文献传递
