国家自然科学基金(30771612)
- 作品数：12 被引量：67H指数：6
- 相关作者：曹伟胜廖明张贺楠张小桃史伟伟更多>>
- 相关机构：华南农业大学中国牧工商(集团)总公司中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目NSFC-广东联合基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 血管瘤病变型J亚群禽白血病CHN株感染性克隆的构建
- 禽白血病病毒(ALV)属于禽C型反转录病毒属。传统的禽白血病主要是由外源性A亚群和B亚群ALV引起,C和D亚群很少引起自然发病。1989年,Payne首次从肉鸡群中分离出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)后,该亚群病毒在世...
- 张贺楠赖汉漳梁雁萍张小桃曹伟胜廖明
- 文献传递
- 血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒的分离与鉴定
- 将患血管瘤病变型白血病蛋鸡病料加PBS研磨,离心取上清过滤除菌后感染11日龄SPF鸡胚成纤维细胞,维持第6天时取一份用于抽取细胞DNA,利用两对ALV-J特异性引物进行扩增,同时,另一份细胞用丙酮乙醇混合液固定后利用AL...
- 赖汉漳曹伟胜张贺楠宁章勇秦爱建辛朝安廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒血管瘤
- 文献传递
- PI3K/Akt信号转导通路在ALV-J感染中作用的初步研究被引量：2
- 2011年
- 【目的】探讨ALV-J在宿主细胞中复制与PI3K/Akt信号转导通路的关系。【方法】将血管瘤病变型ALV-J毒株HN06和骨髓瘤病变型ALV-J毒株NX0101分别感染DF-1细胞,通过Western blot、Real-time PCR、IFA和ELISA等方法,观察细胞Akt蛋白磷酸化水平、病毒RNA表达水平和病毒蛋白表达水平等指标。【结果】HN06株和NX0101株在体外细胞中复制水平有差异。HN06株的早期感染可引起Akt转导通路的活化,病毒引起的Akt磷酸化具有病毒滴度依赖性,而且能被PI3K特异性抑制剂LY294002所抑制,表明HN06株诱导的Akt活化是PI3K途径依赖的。LY294002可在病毒感染早期呈剂量依赖性地显著降低受染细胞中HN06 RNA水平、囊膜蛋白水平和细胞培养物上清中的病毒粒子含量。【结论】PI3K/Akt信号转导通路活化对HN06株在细胞感染早期具有重要的作用,该结果与已报道的有关细胞PI3K/Akt信号转导通路参与NX0101株的早期感染的结论一致。本研究为进一步阐明ALV-J入侵宿主细胞和复制的精确机制等研究奠定了基础。
- 冯少珍李娇吴晓婵曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒血管瘤PI3K/AKT
- A亚群ALV入侵细胞与PI3K/Akt信号通路途径的初步研究
- 前言目前J亚群禽白血病病毒(ALV-J)在我国华南地区鸡群中普遍流行,但也有由ALV-A引起禽白血病病例的存在。2009年,本研究组报道了广东本地黄羽肉种鸡A亚群禽白血病的病例,并从发病蛋鸡病料中分离鉴定出一株ALV-A...
- 冯少珍张小桃曹伟胜廖明
- 文献传递
- 血管瘤相关禽白血病病毒CD08株的分离与鉴定被引量：8
- 2009年
- 通过病理剖检、接种DF-1细胞、ELISA抗原检测以及聚合酶链式反应（PCR）等方法,从湖南常德某集约化养殖场的疑似禽白血病感染的蛋鸡中分离到1株血管瘤相关B亚群禽白血病病毒（ALV-B）,命名为CD08。利用特异引物对分离株进行PCR检测和gp85扩增,将测序得到的gp85序列与国内外各亚群禽白血病病毒相同区域序列进行相似性分析,发现其核苷酸序列相似性在44.3%-92.9%之间,其中与属于ALV-B的MAV-2株相似性最高,而与美国ALV-J ADOL-7501株相似性最低。基于gp85核苷酸序列的系统进化分析表明：CD08株的gp85序列与MAV-2株的亲缘关系最近。
- 张小桃赖汉漳张贺楠徐成刚廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：禽白血病血管瘤
- 不同亚群禽白血病病毒5′LTR序列及启动子活性分析被引量：3
- 2011年
- 对不同亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)5′LTR序列及其启动子活性进行了比较分析,以探讨LTR对ALV复制和致病力的影响。通过PCR分别扩增克隆了中国分离株GD08(ALV-A)、CD08(ALV-B)、HN06(血管瘤病变型ALV-J)和NX0101(骨髓瘤病变型ALV-J)毒株基因组5′LTR片段。与国内外不同亚群ALV分离株5′LTR核苷酸序列比较发现,NX0101株和HN06株与ALV-J国内外分离株的同源性最高,达90.8%～97.5%;GD08株与ALV-A国内分离株SDAU09C1的同源性最高,为94.6%;CD08株与GD08株和ALV-J各株的同源性高达90%以上。LTR中的R区具有较高的保守性,但CD08株U3区缺失11bp,GD08株U5区与其它毒株的U5区差异较大。将LTR片段插入到pCAT-Basic载体的CAT报告基因前,通过转染DF-1细胞和测定CAT表达量来评价LTR的启动子活性。HN06株和NX0101株之间,以及GD08株和CD08株之间LTR启动子活性有差异,但差异不显著;而ALV-J毒株与GD08株和CD08株之间的LTR启动子活性差异显著。
- 冯少珍李娇吴晓婵曹伟胜廖明
- 关键词：启动子活性
- 鸡IFN-α，-β，-γ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
- 根据GenBank上鸡α-、β-、γ-干扰素(ChIFN-α,-β,-γ)基因的序列,在保守区设计并合成各自特异引物,并以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)为内参,采用SYBR Green I染料建立实时荧光定量PCR(...
- 张贺楠赖汉漳齐岩孔留五张小桃曹伟胜廖明
- 关键词：IFN-ΒIFN-Γ实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 人工感染血管瘤病变型ALV-J对鸡免疫器官的影响被引量：8
- 2011年
- 为探讨血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒(ALV-J)HN06克隆株的致病情况,通过人工接种7日龄SPF雏鸡ALV-J HN06株,检测HN06株对鸡体的影响。结果发现,感染鸡生长较慢,体重比对照组低。HN06株对胸腺抑制显著,对法氏囊影响不明显,外周免疫器官的脾指数比对照组大。PCR检测病毒在免疫器官中的分布结果显示,骨髓和脾在攻毒后第7天可检测到病毒整合到基因组中,法氏囊和胸腺则分别在攻毒后第14天和第21天才能检测到。通过ELISA和细胞培养技术检测病毒血症、抗体产生和排毒情况,发现HN06感染鸡血浆中第7天即出现病毒(7/21),第28天出现抗体(2/21),第21天泄殖腔出现排毒(2/21)。随着产生抗体鸡的比例升高,排毒鸡逐渐减少,42d后无排毒现象。由此可见,试验鸡后天感染HN06株出现病毒血症,HN06不但抑制机体生长,还影响免疫器官的发育;HN06首先感染免疫器官中的骨髓和脾,再感染法氏囊和胸腺;抗体的产生能抑制排毒,但病毒血症仍然存在。
- 冯少珍李娇吴晓婵曹伟胜廖明
- 关键词：禽白血病病毒J亚群免疫抑制
- 不同病变型J亚群禽白血病病毒LTR启动子序列分析及活性比较被引量：7
- 2010年
- 从ALV-J中国地方分离株SCAU-HN06株（血管瘤病变型）、NX0101株和JS-nt株（骨髓瘤病变型）病毒的细胞培养物提取前病毒DNA,通过PCR扩增各毒株的LTR并克隆,随后进行测序分析。与国内外ALV-J参考毒株LTR序列比较发现：国内地方分离株与英国ALV-J原型株HPRS-103和美国ALV-J原型株ADOL-7501的LTR核苷酸序列相似性为88.0%~97.2%;LTR中的U5区及R区具有较高的保守性,而U3区内存在较大差异。将不同病变型ALV-J的LTR片段分别插入pCAT-basic载体CAT报告基因5＇端。用所得的重组报告基因表达质粒转染DF-1细胞,48h后通过测定转染细胞中的CAT表达量来评价LTR启动子的活性。结果表明,SCAU-HN06株与骨髓瘤病变型ALV-J（JS-nt株,NX0101株）LTR启动子活性差异不显著。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘红波曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒长末端重复序列启动子活性
- 血管瘤相关J亚群禽白血病病毒ZH-08株的分离与全基因组序列测定被引量：11
- 2010年
- 本研究从临床表现为典型血管瘤型禽白血病病例的广东某肉种鸡场的病鸡中,分离到1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为ZH-08。利用ELISA抗原检测、PCR和间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定,结果都呈阳性。依据ALV-J原型株HPRS-103前病毒全基因组序列设计并合成3对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示该分离株基因组序列全长7 597 bp,与已公开的全基因组序列大小比较略有差异,但符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因。将该分离株的亚群特异性gp85基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较,发现ZH-08与YZ9901株相似性最高(93.7%)。基于gp85核苷酸序列的系统进化分析表明:ZH-08株与SD07LK1株的亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性以及致病机制研究奠定了基础。
- 张小桃史伟伟刘红波张贺楠廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：血管瘤J亚群禽白血病病毒全基因组序列
