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小干扰RNA沉默NF-κB P65基因表达对胰腺癌细胞株PANC-1增殖与凋亡的影响被引量：6: 2008年; 目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC-1中NF-κBP65基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响。方法:利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人NF-κB P65的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC-1中。RT-PCR法测定胰腺癌细胞内NF-κB P65mRNA与细胞周期素D1(cyclinD1)mRNA的表达。ELISA法检测NF-κB亚单位P65的DNA结合活性的改变。MTT法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况。流式细胞仪测定细胞凋亡率及细胞周期的变化。结果:化学合成的人NF-κB P65 siRNA能有效地抑制PANC-1细胞中NF-κB P65与cyclinD1基因在mRNA水平上的表达(P<0.01),同时ELISA结果显示,RelA siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。RelA siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P<0.01),同时G1期细胞所占的比例较对照组增加了10%,S期和G2/M期细胞则分别减少了4%与6%。结论:体外实验初步证明NF-κB P65基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色,通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC-1增殖并诱导其凋亡。; 王殿忠谢敏潘一明朱海涛; 关键词：NF-ΚB PANC-1细胞

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南京市医学科技发展项目(YKK05104)