重庆市自然科学基金(2008BB5069)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
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- 利用蚕豆根观察植物有丝分裂被引量：1
- 2009年
- 洋葱因取材方便、发根条件简单、染色体数目少（2n=16），因此常作为有丝分裂实验的首选材料^[1]。但由于菜农在采收洋葱后会喷洒一种植物保鲜剂—青鲜素（MH），这就阻碍了洋葱发根。根据笔者的发现，春季（3、4月）洋葱发根根多，其他时间发根根非常少^[2]，因此对开展此实验，取材在时间上受到限制，但若采用蚕豆根尖，可避免此问题，
- 龚慧明
- 关键词：有丝分裂蚕豆根尖植物染色体数目青鲜素发根
- Stathmin mRNA在树突状细胞中的表达及其意义
- 2010年
- 目的探讨StathminmRNA在树突状细胞中的表达及其意义。方法分离和培养小鼠的树突状细胞,用细菌脂多糖(LPS)刺激0h、3h、12h后,收集细胞,并提取细胞总RNA,经RT-PCR反转录为cDNA,再通过荧光定量实时PCR检测Stathmin的mRNA水平。结果定量PCR标准曲线的相关系数为-0.99,且融解曲线峰单一,表明已成功建立了准确、特异的实时定量PCR方法。经LPS刺激后,树突状细胞Stathmin的mRNA表达水平降低,随时间的延长而递减(P<0.01)。结论树突状细胞的Toll样受体4信号途径与Stathmin的表达相关。
- 唐蓓
- 关键词：STATHMIN树突状细胞
- Arl8a与树突状细胞TLR4-TRIF信号途径的相关性被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨ADP-核糖基化因子样8A（ADP-ribosylation factor-like 8A,Arl8a）与树突状细胞（dendritic cell,DC）中TLR4-TRIF-GEFH1-RhoB信号途径的相关性.方法 从野生型和TRIF敲除基因（TRIFKO）小鼠中分离和培养DC,LPS刺激后收集细胞扩增总cDNA,通过实时定量PCR检测Arl8a的mRNA表达.然后用鸟嘌呤核苷酸交换因子H1（GEFH1）的siRNA转染来自野生型小鼠的DC,进行LPS刺激或未刺激处理并检测Arl8a的mRNA表达.再用GEFH1和Arl8a的siRNA转染DC,LPS刺激后检测RhoB的mRNA表达.结果 在LPS刺激后,Arl8a的mRNA表达在野生型小鼠的DC中增加,在TRIFKO小鼠的DC中则未被上调.此外,在野生型小鼠中Arl8a的mRNA上调可被GEFH1的siRNA明显抑制（P＜0.01）.而Arl8a和GEFH1的siRNA均能显著抑制RhoB的mRNA表达（P＜0.01）.结论 Arl8a的表达与DC的TRL4-TRIF途径有关,并且在转录水平与GEFH1和RhoB相关.
- 唐蓓
- 关键词：RHOB
- 一种稳定且高效的磷酸钙293T细胞转染法被引量：6
- 2011年
- 目的:用磷酸钙细胞转染法稳定高效地转染293T细胞。方法:利用磷酸钙转染法将MSCV-GFP质粒导入293T细胞,在混合DNA-CaCl2溶液和2×HBS缓冲液以形成沉淀物时,对混悬方式和时间这两个至关重要的因素进行了调整。并将该法与常用磷酸钙细胞转染法进行了比较。结果:在调整了混悬方式和时间后,得到了85%以上的转染率。在对比实验中,常用磷酸钙细胞转染法得到85%以上转染率所占比率为50%,而利用该文方法比率则为100%。结论:利用此磷酸钙细胞转染法可稳定高效地转染293T细胞。
- 唐蓓
- 关键词：磷酸钙转染稳定性
- Kinectin与树突状细胞TLR4-TRIF信号途径的相关性
- 2008年
- 驱动结合蛋白Kinectin是真核细胞内一种与囊泡转运相关的膜受体蛋白，为驱动蛋白（Kinesin）受体。当树突状细胞（DC）接受细菌脂多糖（LPS）的刺激后，其Toll样受体（TLR）4信号途径被活化，大量的抗原肽-MHCⅡ复合物被转运到细胞表面以启动免疫应答。
- 唐蓓
- 关键词：树突状细胞信号途径受体蛋白细菌脂多糖驱动蛋白
- LPS介导的树突状细胞成熟过程中的表型变化被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨树突状细胞成熟过程中,DC表面MHC分子和共刺激分子的表达变化及MHCⅡ的胞内分布变化。方法:制备小鼠骨髓来源的树突状细胞,LPS分别刺激0、3、6、12和24小时,荧光抗体标记后,用流式细胞仪检测MHCⅠ、MHCⅡ分子和CD86、CD80、CD40等共刺激分子在细胞表面的表达,同时以激光共聚焦显微镜观察MHCⅡ的胞内分布变化。结果:在LPS刺激后,DC细胞表面的不同表型分子,其表达水平随时间延长有不同的上升趋势。同时在未成熟DC中,MHCⅡ主要集中在细胞核附近,LPS刺激后,MHCⅡ朝细胞外围扩散,到刺激12小时,有较多的MHCⅡ出现在细胞表面。结论:LPS介导的树突状细胞成熟过程中的表型分子有不同的变化趋势。
- 唐蓓
- 关键词：LPS树突状细胞
